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及中剂量组 G0/G1期细胞比例均显著升高，而 TAG 各剂 表2 TAG对HT-29细胞周期的影响（x±±s，n＝3，％％）
量组 S 期细胞比例以及高剂量组 G0/G1期细胞比例均显 Tab 2 Effects of TAG on HT-29 cell cycle（x±±s，n＝
著降低（P＜0.05或P＜0.01），详见图3、表2。 3，％％）
组别 G0/G1期 S期 G2/M期
500
360 空白组 40.80±1.65 53.91±1.35 5.29±2.84
400
270 TAG低剂量组 43.22±1.20 48.50±1.12 ＊＊ 8.29±1.08 ＊
计数 300 计数 180 TAG中剂量组 46.92±1.52 ＊＊ 21.03±1.25 ＊＊ 32.06±2.04 ＊＊
200
100 90 TAG高剂量组 34.40±1.34 ＊＊ 22.62±0.83 ＊＊ 42.98±2.17 ＊＊
＊＊
＊
0 0 注：与空白组比较，P＜0.05， P＜0.01
0 40 80 120 160 0 40 80 120 160 ＊ ＊＊
通道（FL2-AFL2-区域） 通道（FL2-AFL2-区域） Note：vs. blank group， P＜0.05， P＜0.01
A.空白组 B. TAG低剂量组 3.4 TAG对HUVEC迁移、侵袭能力的影响
400 与空白组比较，TAG 各剂量 HUVEC 的迁移率和侵
320 240 袭率均显著降低（P＜0.01），详见图4、图5、表3。
计数 240 180 3.5 TAG对HUVEC管腔形成的影响
160 计数 120 与空白组比较，TAG 各剂量组各时间点 HUVEC 的
80 60
管腔数量均显著减少（P＜0.01），详见图6、表4。
0 0
0 30 60 90 120 150 0 40 80 120 160 4 讨论
通道（FL2-AFL2-区域） 通道（FL2-AFL2-区域）
C. TAG中剂量组 D. TAG高剂量组 CRC是全球性的医学难题之一，诸多学者均致力于
图3 TAG对HT-29细胞周期影响的流式图 抗CRC药物的研发。有研究指出，细胞血管新生是肿瘤
Fig 3 Flow plots of the effects of TAG on HT-29 cell 发生、发展的重要因素，中药抑制肿瘤细胞血管新生是
cycle 临床防治肿瘤的有效策略之一 [11-12] 。钩吻是一味剧毒中

0 h

24 h

A.空白组 B. TAG低剂量组 C. TAG中剂量组 D. TAG高剂量组
图4 TAG对HUVEC迁移能力影响的显微图（迁移试验，×100）
Fig 4 Micrographs of the effects of TAG on migration ability of HUVEC（migration test，×100）

药，临床应用较少，相关体外研究证实其具有一定的镇 成能力的影响，初步评价TAG在肿瘤细胞血管新生中的
痛、抗类风湿、抗肿瘤等活性 [13-14] 。现代药理研究多涉及 作用。
该药抗炎及镇痛等领域。本课题组前期研究表明，钩吻 在 HT-29 细胞形态学观察及增殖试验中发现，TAG
具有良好的抗肿瘤效果，其中TAG及部分单体成分均可 各剂量组 HT-29 细胞数量均有所减少，细胞连接松散，
抑制肿瘤的发生与发展 [8-10，15] 。基于前期研究成果，本研 并可见死亡细胞，细胞存活率均较空白组显著降低。这
究以HT-29细胞和HUVEC为对象，从细胞周期出发，初 提示TAG可诱导HT-29细胞凋亡，并抑制其增殖。周期
步探讨 TAG 对 CRC 细胞增殖的抑制作用，并通过血管 检测结果显示，TAG 各剂量组 G2/M 期细胞比例以及中
新生试验来验证 TAG 对血管新生的抑制作用。其中， 剂量组 G0/G1期细胞比例均较空白组显著升高，而 TAG
HT-29细胞主要用以观察TAG对CRC细胞的抑制效果， 各剂量组 S 期细胞比例以及高剂量组 G0/G1期细胞比例
以及评价 TAG 对其细胞周期的影响；HUVEC 因具有干 均较空白组显著降低。这提示 TAG 能通过影响 HT-29
[16]
细胞潜能，是血管内皮细胞试验时较为常用的细胞 ， 细胞的周期分布，使其 S 期（TAG 各剂量组）、G0/G1 期
故本研究通过考察 TAG 对 HUVEC 迁移、侵袭、管腔形 （TAG 高剂量组）细胞比例下降，G2/M 期（TAG 各剂量

·960 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8 中国药房 2020年第31卷第8期