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炎杀菌、活血化瘀、抗肿瘤、抗氧化、保肝等药理活                            77 min,80%A→95%A);流速:1 mL/min;柱温:35 ℃;
        性 [8-10] 。本课题组前期的化学成分研究中,分离得到了                     检测波长:280 nm;进样量:10 μL。
        其黄酮类的代表性成分异牡荆素、当药黄素 。药理活                                        表1 酢浆草药材信息来源
                                              [11]
                                                     [9]
        性研究表明,异牡荆素具有抗癌、抗炎、抗氧化等作用 ,                              Tab 1 Information source of O. corniculata
        当药黄素具有抗抑郁、抗炎等作用              [12-13] 。             编号         批号               产地          采集时间
            指纹图谱具有整体性、模糊性的特征,符合中医药                         S1       20170209        贵州省安顺市         2017年2月
                                                           S2       20160420        贵州省兴义市         2016年4月
        传统理论的特点,是中药质量控制的有效手段;传统单
                                                           S3       20170503        贵州省兴义市         2017年5月
        一化学成分的含量测定难以全面反映药材质量,而多指                           S4       20170312        贵州省安顺市         2017年3月
        标含量测定可在一定程度上更为有效地保证药材质量,                           S5       20161126        贵州省贵阳市         2016年11月
                                                           S6       20170504        贵州省兴义市         2017年5月
        中药材指纹图谱结合多指标含量测定能全面地反映药
                                                           S7       20170505        贵州省兴义市         2017年5月
        材质量优劣,已成为中药质量控制的科学有效手段 。                           S8       20170603        贵州省兴义市         2017年6月
                                                     [14]
        目前,酢浆草收录于《贵州省中药材、民族药材质量标                           S9       20170606        贵州省兴义市         2017年6月
        准》 中,该标准仅对其生药及薄层鉴别作出规定;现有                          S10      20170507        贵州省兴义市         2017年5月
           [2]
                                                           S11      20170607        贵州省兴义市         2017年6月
        的关于酢浆草质量控制的研究中,也仅有对酢浆草中异                           S12      20170604        贵州省兴义市         2017年6月
        牡荆素的定量研究 ,且建立的指纹图谱均未指认共有
                        [15]
                                                           2.1.2  混合对照品溶液的制备            取异牡荆素对照品、当
        峰 [16-17] 。基于此,本研究采用高效液相色谱法(HPLC)建
                                                           药黄素对照品各10 mg,精密称定,分别置于10 mL量瓶
        立了酢浆草的指纹图谱,并同时测定了其中异牡荆素、
                                                           中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制得异牡荆素、当
        当药黄素的含量,旨在为其质量标准的完善提供参考。                           药黄素质量浓度分别为0.978、0.988 mg/mL的单一对照
        1 材料                                               品贮备液。取上述异牡荆素对照品贮备液0.3 mL、当药
        1.1  仪器                                            黄素对照品贮备液0.4 mL,置于5 mL量瓶中,加甲醇定
            UltiMate3000型HPLC仪,包括系统控制器、低压梯                 容,摇匀,制得含异牡荆素、当药黄素质量浓度分别为
        度组件、温控样品室、输液泵、脱气组件、自动进样器、柱                         0.0587、0.0790 mg/mL的混合对照品溶液。
        温箱、二极管阵列检测器、Chromeleon 7.0 色谱工作站                   2.1.3  供试品溶液的制备          取酢浆草粉末(过 50 目筛)
       (美国Thermo Fisher Scientific公司);AE240型十万分之           约1 g,精密称定,置于100 mL具塞锥形瓶中,加70%乙
        一电子天平[梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司];                        醇25 mL,超声(功率:200 W,频率:40 kHz)处理30 min,
        Allegra64R 型台式冷冻离心机(美国 Beckman 公司);                取出,放冷,用 70%乙醇补足减失的质量,摇匀,取上层
        KQ-5200B 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公                        液,置于离心管中以 12 000 r/min 离心 10 min,取上清
        司);WP-UP-Ⅱ-20型超纯水机(四川沃特尔科技发展有                      液,即得供试品溶液。
        限公司)。                                              2.1.4  精密度试验       取“2.1.3”项下供试品溶液(编号:
        1.2  药品与试剂                                         S2)适量,按“2.1.1”项下色谱条件进样平行测定6次,以
            当药黄素对照品(纯度:≥98%)、异牡荆素对照品                       异牡荆素的保留时间和峰面积为参照,记录各共有峰的
       (纯度:≥98%)均由贵州医科大学贵州省药物制剂重点                          相对保留时间和相对峰面积。结果,19个共有峰的相对
        实验室自制;甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为                          保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3%(n=6),表明
        超纯水。                                               方法精密度良好。
        1.3  药材                                            2.1.5  稳定性试验       取“2.1.3”项下供试品溶液(编号:
            12 批酢浆草样品(编号:S1~S12,贵州维康子帆药                    S2)适量,分别于室温下放置 0、3、6、9、12、24 h 时,按
        业股份有限公司),经贵州医科大学贵州省药物制剂重                          “2.1.1”项下色谱条件进样测定,以异牡荆素的保留时间
        点实验室刘春花副教授鉴定为酢浆草科酢浆草属植物                            和峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相对
        酢浆草(O. corniculata L.)的干燥全草。酢浆草药材信                 峰面积。结果,19个共有峰的相对保留时间和相对峰面
        息来源详见表1。                                           积的 RSD 均小于 3%(n=6),表明供试品溶液于室温下
        2 方法与结果                                            放置24 h内稳定性良好。
        2.1 指纹图谱的建立                                        2.1.6  重复性试验       取酢浆草药材样品(编号:S2)粉末
        2.1.1  色谱条件      色谱柱:ACE Excel-5-C18 (250 mm×      约 1 g,共 6 份,按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再
        4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B),               按“2.1.1”项下色谱条件进样测定,以异牡荆素的保留时
        梯度洗脱(0~10 min,10%A→26%A;10~20 min,26%              间和峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相
        A→27%A;20~30 min,27%A→29%A;30~36 min,29            对峰面积。结果,19个共有峰的相对保留时间和相对峰
        A→32.5% A;36~46 min,32.5% A→39% A;46~57            面积的RSD均小于3%(n=6),表明方法重复性良好。
        min,39%A→55%A;57~71 min,55%A→80%A;71~              2.1.7 HPLC 指纹图谱的生成           取 12 批酢浆草药材样


        中国药房    2020年第31卷第6期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6  ·657  ·
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