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炎杀菌、活血化瘀、抗肿瘤、抗氧化、保肝等药理活 77 min,80%A→95%A);流速:1 mL/min;柱温:35 ℃;
性 [8-10] 。本课题组前期的化学成分研究中,分离得到了 检测波长:280 nm;进样量:10 μL。
其黄酮类的代表性成分异牡荆素、当药黄素 。药理活 表1 酢浆草药材信息来源
[11]
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性研究表明,异牡荆素具有抗癌、抗炎、抗氧化等作用 , Tab 1 Information source of O. corniculata
当药黄素具有抗抑郁、抗炎等作用 [12-13] 。 编号 批号 产地 采集时间
指纹图谱具有整体性、模糊性的特征,符合中医药 S1 20170209 贵州省安顺市 2017年2月
S2 20160420 贵州省兴义市 2016年4月
传统理论的特点,是中药质量控制的有效手段;传统单
S3 20170503 贵州省兴义市 2017年5月
一化学成分的含量测定难以全面反映药材质量,而多指 S4 20170312 贵州省安顺市 2017年3月
标含量测定可在一定程度上更为有效地保证药材质量, S5 20161126 贵州省贵阳市 2016年11月
S6 20170504 贵州省兴义市 2017年5月
中药材指纹图谱结合多指标含量测定能全面地反映药
S7 20170505 贵州省兴义市 2017年5月
材质量优劣,已成为中药质量控制的科学有效手段 。 S8 20170603 贵州省兴义市 2017年6月
[14]
目前,酢浆草收录于《贵州省中药材、民族药材质量标 S9 20170606 贵州省兴义市 2017年6月
准》 中,该标准仅对其生药及薄层鉴别作出规定;现有 S10 20170507 贵州省兴义市 2017年5月
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S11 20170607 贵州省兴义市 2017年6月
的关于酢浆草质量控制的研究中,也仅有对酢浆草中异 S12 20170604 贵州省兴义市 2017年6月
牡荆素的定量研究 ,且建立的指纹图谱均未指认共有
[15]
2.1.2 混合对照品溶液的制备 取异牡荆素对照品、当
峰 [16-17] 。基于此,本研究采用高效液相色谱法(HPLC)建
药黄素对照品各10 mg,精密称定,分别置于10 mL量瓶
立了酢浆草的指纹图谱,并同时测定了其中异牡荆素、
中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制得异牡荆素、当
当药黄素的含量,旨在为其质量标准的完善提供参考。 药黄素质量浓度分别为0.978、0.988 mg/mL的单一对照
1 材料 品贮备液。取上述异牡荆素对照品贮备液0.3 mL、当药
1.1 仪器 黄素对照品贮备液0.4 mL,置于5 mL量瓶中,加甲醇定
UltiMate3000型HPLC仪,包括系统控制器、低压梯 容,摇匀,制得含异牡荆素、当药黄素质量浓度分别为
度组件、温控样品室、输液泵、脱气组件、自动进样器、柱 0.0587、0.0790 mg/mL的混合对照品溶液。
温箱、二极管阵列检测器、Chromeleon 7.0 色谱工作站 2.1.3 供试品溶液的制备 取酢浆草粉末(过 50 目筛)
(美国Thermo Fisher Scientific公司);AE240型十万分之 约1 g,精密称定,置于100 mL具塞锥形瓶中,加70%乙
一电子天平[梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司]; 醇25 mL,超声(功率:200 W,频率:40 kHz)处理30 min,
Allegra64R 型台式冷冻离心机(美国 Beckman 公司); 取出,放冷,用 70%乙醇补足减失的质量,摇匀,取上层
KQ-5200B 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公 液,置于离心管中以 12 000 r/min 离心 10 min,取上清
司);WP-UP-Ⅱ-20型超纯水机(四川沃特尔科技发展有 液,即得供试品溶液。
限公司)。 2.1.4 精密度试验 取“2.1.3”项下供试品溶液(编号:
1.2 药品与试剂 S2)适量,按“2.1.1”项下色谱条件进样平行测定6次,以
当药黄素对照品(纯度:≥98%)、异牡荆素对照品 异牡荆素的保留时间和峰面积为参照,记录各共有峰的
(纯度:≥98%)均由贵州医科大学贵州省药物制剂重点 相对保留时间和相对峰面积。结果,19个共有峰的相对
实验室自制;甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为 保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3%(n=6),表明
超纯水。 方法精密度良好。
1.3 药材 2.1.5 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液(编号:
12 批酢浆草样品(编号:S1~S12,贵州维康子帆药 S2)适量,分别于室温下放置 0、3、6、9、12、24 h 时,按
业股份有限公司),经贵州医科大学贵州省药物制剂重 “2.1.1”项下色谱条件进样测定,以异牡荆素的保留时间
点实验室刘春花副教授鉴定为酢浆草科酢浆草属植物 和峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相对
酢浆草(O. corniculata L.)的干燥全草。酢浆草药材信 峰面积。结果,19个共有峰的相对保留时间和相对峰面
息来源详见表1。 积的 RSD 均小于 3%(n=6),表明供试品溶液于室温下
2 方法与结果 放置24 h内稳定性良好。
2.1 指纹图谱的建立 2.1.6 重复性试验 取酢浆草药材样品(编号:S2)粉末
2.1.1 色谱条件 色谱柱:ACE Excel-5-C18 (250 mm× 约 1 g,共 6 份,按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再
4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B), 按“2.1.1”项下色谱条件进样测定,以异牡荆素的保留时
梯度洗脱(0~10 min,10%A→26%A;10~20 min,26% 间和峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相
A→27%A;20~30 min,27%A→29%A;30~36 min,29 对峰面积。结果,19个共有峰的相对保留时间和相对峰
A→32.5% A;36~46 min,32.5% A→39% A;46~57 面积的RSD均小于3%(n=6),表明方法重复性良好。
min,39%A→55%A;57~71 min,55%A→80%A;71~ 2.1.7 HPLC 指纹图谱的生成 取 12 批酢浆草药材样
中国药房 2020年第31卷第6期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6 ·657 ·