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津中国分析检测仪器有限公司);XP-205 型十万分之一 苷 Re 2.50 mg、人参皂苷 Rf 0.55 mg、人参皂苷 F1 0.99
分析天平(瑞士Metler Toledo公司);Elmasonic S450H型 mg、人参皂苷 Rg1 2.54 mg、人参皂苷 Rg2 0.13 mg、人参
超声仪(德国Elma公司);TGL-18KR型高速台式冷冻离 皂苷 Ro 4.85 mg 的混合对照品母液,于 4 ℃条件下保
心机(上海安亭科学仪器厂)。 存,备用。
1.2 药品与试剂 2.1.2 供试品溶液 取粉碎后的人参样品(过四号筛,
人参皂苷Rg1、Re、Rg2、F1、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Ro、 下同)约 0.2 g,精密称定,置于离心管中,加 70%甲醇 5
Rf对照品均由吉林大学天然药物化学实验室提供(批号 mL浸泡20 min后,于35 ℃条件下超声(功率:250 W,频
分别为 1817、1805、1827、1807、1812、1822、1832、1803、 率:40 kHz)提取30 min,放冷,称定质量,用70%甲醇补
1804、1815、1806,使用 UPLC 法按峰面积归一法计算纯 足减失质量,再以 5 000 r/min 离心 8 min,取上清,过
度均不低于 98.0%);淀粉(国药集团化学试剂有限公 0.22 μm滤膜,即得。
司,纯度:≥99.0%,作对照品用);乙腈、甲酸为色谱纯, 2.2 色谱条件
碘、碘化钾、甲醇、硝酸钙等其余试剂均为分析纯,水为 色谱柱:Acquity UPLC BEH C18 (2.1 mm×100 mm,
®
超纯水。 1.7 μm);流动相:0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈
1.3 药材 溶液(B),梯度洗脱(0~1 min,90%A;1~1.5 min,90%
30批人参样品收集于长白山产区和药材集散地,由 A→85%A;1.5~2 min,85%A→81%A;2~15 min,81%
中国人民解放军总医院野山参博物馆副馆长方土福先 A→78% A;15~30 min,78% A→68% A;30~40 min,
生和北京同仁堂特聘专家易叶基先生鉴定为五加科植 68%A→66%A);流速:0.5 mL/min;柱温:35 ℃;检测波
物人参(P. ginseng C. A. Mey.)的根及根茎。其中,样品 长:203 nm;进样量:5 μL。
S1~S10 为园参,样品 S11~S20 为移山参,样品 S21~ 2.3 方法学考察
S30 为野山参,均为全须生晒参规格。部分移山参和野 2.3.1 系统适用性试验 吸取 11 种人参皂苷混合对照
山参的芦头基部是圆芦(即芦碗不明显),其芦碗数由鉴 品溶液(取“2.1.1”项下混合对照品母液以70%甲醇稀释
定专家根据碗节痕迹来判断。人参质地程度是结合样 至适当浓度)、供试品溶液(批号:S21)、空白溶剂(70%
品的质感、纵皱纹及切片断面来判断,分为松泡、半实半 甲醇),按“2.2”项下色谱条件进样测定。结果显示,11
泡、坚实,依次用数字1、2、3进行赋值。人参样品信息和 种人参皂苷的分离度良好,理论板数均达到定量要求,
外观性状特征详见表1。 空白溶剂不干扰分析(图略)。
表1 人参样品信息及外观性状特征 2.3.2 线性关系考察 精密吸取“2.1.1”项下 11 种人参
Tab 1 P. ginseng information and its appearance and 皂苷混合对照品母液,以 70%甲醇逐级稀释,制成系列
characteristics 质量浓度的线性对照品溶液,按“2.2”项下色谱条件进样
芦碗数, 芦头长度, 质地 芦碗数, 芦头长度, 质地 测定,记录峰面积。以各对照品质量浓度(X,mg/mL)为
编号 种类 编号 种类
个 cm 赋值 个 cm 赋值 横坐标、峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程
S1 园参 3 2.3 3 S16 移山参 11 4.6 1 和线性范围见表2。
S2 园参 3 1.8 3 S17 移山参 10 4.2 2
S3 园参 3 0.6 3 S18 移山参 8 3.3 3 表2 11种人参皂苷的回归方程及线性范围
S4 园参 3 2.5 3 S19 移山参 12 4.6 3 Tab 2 Regression equation and linear range of 11
S5 园参 3 1.2 3 S20 移山参 8 2.7 3 kinds of ginsenoside
S6 园参 3 1.1 3 S21 野山参 13 4.9 1
待测成分 回归方程 R 2 线性范围,mg/mL
S7 园参 3 0.6 3 S22 野山参 15 4.9 1
S8 园参 3 0.9 3 S23 野山参 13 4.4 1 人参皂苷Rg1 Y=6 086 360.26X+27 494.73 0.999 9 0.025~0.508
S9 园参 3 2.4 3 S24 野山参 15 6.8 1 人参皂苷Re Y=5 386 767.01X+28 203.52 0.999 9 0.025~0.500
人参皂苷Rf Y=6 244 290.01X+23 417.01 0.999 7 0.011~0.546
S10 园参 3 1.3 3 S25 野山参 13 5.6 2
S11 移山参 8 2.7 2 S26 野山参 15 5.5 2 人参皂苷Rg2 Y=6 731 986.63X+17 401.64 0.999 6 0.003~0.128
S12 移山参 12 6.1 2 S27 野山参 13 6.3 2 人参皂苷Rb1 Y=4 283 520.05X+26 285.06 0.999 9 0.039~0.786
人参皂苷Ro Y=5 565 772.86X+12 996.20 0.999 6 0.048~0.485
S13 移山参 9 4.6 3 S28 野山参 17 7.6 1
S14 移山参 9 4.9 1 S29 野山参 14 7.7 1 人参皂苷Rc Y=4 440 385.06X+4 506.35 0.999 8 0.026~0.512
S15 移山参 10 6.1 2 S30 野山参 15 4.4 1 人参皂苷F1 Y=8 329 854.81X+10 043.50 0.999 8 0.002~0.295
Y=4 617 202.05X+32 812.13 0.999 9 0.018~0.881
人参皂苷Rb2
2 人参中11种单体皂苷的含量测定
人参皂苷Rb3 Y=4 579 940.09X+8 092.84 1.000 0 0.008~0.169
采用UPLC法测定11种单体皂苷含量。 人参皂苷Rd Y=5 049 401.38X+46 298.63 0.999 8 0.011~0.340
2.1 溶液的制备 2.3.3 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液(批号:
2.1.1 混合对照品母液 精密称取 11 种人参皂苷对照 S21),按“2.2”项下色谱条件连续进样测定 6 次,记录
品各适量,加 70%甲醇制成每 1 mL 中分别含人参皂苷 峰面积。结果,11种人参皂苷峰面积的RSD均小于3%
Rb1 3.93 mg、人参皂苷 Rb2 0.88 mg、人参皂苷 Rb3 0.85 (n=6),表明方法精密度良好。
mg、人参皂苷 Rc 2.56 mg、人参皂苷 Rd 1.14 mg、人参皂 2.3.4 重复性试验 取同一人参样品粉末(批号:S21)
·652 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6 中国药房 2020年第31卷第6期