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津中国分析检测仪器有限公司);XP-205 型十万分之一                        苷 Re 2.50 mg、人参皂苷 Rf 0.55 mg、人参皂苷 F1 0.99
        分析天平(瑞士Metler Toledo公司);Elmasonic S450H型            mg、人参皂苷 Rg1 2.54 mg、人参皂苷 Rg2 0.13 mg、人参
        超声仪(德国Elma公司);TGL-18KR型高速台式冷冻离                      皂苷 Ro 4.85 mg 的混合对照品母液,于 4 ℃条件下保
        心机(上海安亭科学仪器厂)。                                      存,备用。
        1.2 药品与试剂                                           2.1.2  供试品溶液       取粉碎后的人参样品(过四号筛,
            人参皂苷Rg1、Re、Rg2、F1、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Ro、         下同)约 0.2 g,精密称定,置于离心管中,加 70%甲醇 5
        Rf对照品均由吉林大学天然药物化学实验室提供(批号                           mL浸泡20 min后,于35 ℃条件下超声(功率:250 W,频
        分别为 1817、1805、1827、1807、1812、1822、1832、1803、        率:40 kHz)提取30 min,放冷,称定质量,用70%甲醇补
        1804、1815、1806,使用 UPLC 法按峰面积归一法计算纯                  足减失质量,再以 5 000 r/min 离心 8 min,取上清,过
        度均不低于 98.0%);淀粉(国药集团化学试剂有限公                         0.22 μm滤膜,即得。
        司,纯度:≥99.0%,作对照品用);乙腈、甲酸为色谱纯,                       2.2 色谱条件
        碘、碘化钾、甲醇、硝酸钙等其余试剂均为分析纯,水为                               色谱柱:Acquity UPLC BEH C18 (2.1 mm×100 mm,
                                                                                   ®
        超纯水。                                                1.7 μm);流动相:0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈
        1.3 药材                                              溶液(B),梯度洗脱(0~1 min,90%A;1~1.5 min,90%
            30批人参样品收集于长白山产区和药材集散地,由                         A→85%A;1.5~2 min,85%A→81%A;2~15 min,81%
        中国人民解放军总医院野山参博物馆副馆长方土福先                             A→78% A;15~30 min,78% A→68% A;30~40 min,
        生和北京同仁堂特聘专家易叶基先生鉴定为五加科植                             68%A→66%A);流速:0.5 mL/min;柱温:35 ℃;检测波
        物人参(P. ginseng C. A. Mey.)的根及根茎。其中,样品               长:203 nm;进样量:5 μL。
        S1~S10 为园参,样品 S11~S20 为移山参,样品 S21~                  2.3  方法学考察
        S30 为野山参,均为全须生晒参规格。部分移山参和野                          2.3.1  系统适用性试验        吸取 11 种人参皂苷混合对照
        山参的芦头基部是圆芦(即芦碗不明显),其芦碗数由鉴                           品溶液(取“2.1.1”项下混合对照品母液以70%甲醇稀释
        定专家根据碗节痕迹来判断。人参质地程度是结合样                             至适当浓度)、供试品溶液(批号:S21)、空白溶剂(70%
        品的质感、纵皱纹及切片断面来判断,分为松泡、半实半                           甲醇),按“2.2”项下色谱条件进样测定。结果显示,11
        泡、坚实,依次用数字1、2、3进行赋值。人参样品信息和                         种人参皂苷的分离度良好,理论板数均达到定量要求,
        外观性状特征详见表1。                                         空白溶剂不干扰分析(图略)。
                 表1   人参样品信息及外观性状特征                         2.3.2  线性关系考察       精密吸取“2.1.1”项下 11 种人参
        Tab 1  P. ginseng information and its appearance and  皂苷混合对照品母液,以 70%甲醇逐级稀释,制成系列
               characteristics                              质量浓度的线性对照品溶液,按“2.2”项下色谱条件进样
                芦碗数, 芦头长度, 质地             芦碗数, 芦头长度, 质地     测定,记录峰面积。以各对照品质量浓度(X,mg/mL)为
        编号   种类                  编号  种类
                  个    cm   赋值             个    cm   赋值     横坐标、峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程
        S1  园参    3    2.3   3   S16  移山参  11   4.6   1     和线性范围见表2。
        S2  园参    3    1.8   3   S17  移山参  10   4.2   2
        S3  园参    3    0.6   3   S18  移山参   8   3.3   3          表2   11种人参皂苷的回归方程及线性范围
        S4  园参    3    2.5   3   S19  移山参  12   4.6   3     Tab 2 Regression equation and linear range of 11
        S5  园参    3    1.2   3   S20  移山参   8   2.7   3            kinds of ginsenoside
        S6  园参    3    1.1   3   S21  野山参  13   4.9   1
                                                            待测成分           回归方程           R 2     线性范围,mg/mL
        S7  园参    3    0.6   3   S22  野山参  15   4.9   1
        S8  园参    3    0.9   3   S23  野山参  13   4.4   1     人参皂苷Rg1    Y=6 086 360.26X+27 494.73  0.999 9  0.025~0.508
        S9  园参    3    2.4   3   S24  野山参  15   6.8   1     人参皂苷Re     Y=5 386 767.01X+28 203.52  0.999 9  0.025~0.500
                                                            人参皂苷Rf     Y=6 244 290.01X+23 417.01  0.999 7  0.011~0.546
        S10  园参   3    1.3   3   S25  野山参  13   5.6   2
        S11  移山参  8    2.7   2   S26  野山参  15   5.5   2     人参皂苷Rg2    Y=6 731 986.63X+17 401.64  0.999 6  0.003~0.128
        S12  移山参  12   6.1   2   S27  野山参  13   6.3   2     人参皂苷Rb1    Y=4 283 520.05X+26 285.06  0.999 9  0.039~0.786
                                                            人参皂苷Ro     Y=5 565 772.86X+12 996.20  0.999 6  0.048~0.485
        S13  移山参  9    4.6   3   S28  野山参  17   7.6   1
        S14  移山参  9    4.9   1   S29  野山参  14   7.7   1     人参皂苷Rc     Y=4 440 385.06X+4 506.35  0.999 8  0.026~0.512
        S15  移山参  10   6.1   2   S30  野山参  15   4.4   1     人参皂苷F1     Y=8 329 854.81X+10 043.50  0.999 8  0.002~0.295
                                                                       Y=4 617 202.05X+32 812.13  0.999 9  0.018~0.881
                                                            人参皂苷Rb2
        2 人参中11种单体皂苷的含量测定
                                                            人参皂苷Rb3    Y=4 579 940.09X+8 092.84  1.000 0  0.008~0.169
            采用UPLC法测定11种单体皂苷含量。                             人参皂苷Rd     Y=5 049 401.38X+46 298.63  0.999 8  0.011~0.340
        2.1 溶液的制备                                           2.3.3  精密度试验       精密吸取同一供试品溶液(批号:
        2.1.1  混合对照品母液         精密称取 11 种人参皂苷对照              S21),按“2.2”项下色谱条件连续进样测定 6 次,记录
        品各适量,加 70%甲醇制成每 1 mL 中分别含人参皂苷                       峰面积。结果,11种人参皂苷峰面积的RSD均小于3%
        Rb1 3.93 mg、人参皂苷 Rb2 0.88 mg、人参皂苷 Rb3 0.85         (n=6),表明方法精密度良好。
        mg、人参皂苷 Rc 2.56 mg、人参皂苷 Rd 1.14 mg、人参皂              2.3.4  重复性试验      取同一人参样品粉末(批号:S21)


        ·652  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6                                   中国药房    2020年第31卷第6期
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