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吗啡 1.0％、0.98％（n＝6），表明本方法重复性良好。
0.40
（8）加样回收率试验。取同一批已知含量的咳清胶
0.30
囊样品（批号：20180301）内容物，混匀后，取 0.5 g，共 6
AU 0.20 份，精密称定，按1∶1质量比分别加入吗啡和磷酸可待因
0.10 混合对照品，按“2.2.1”项下供试品溶液 1 制备方法制备
磷酸可待因
0 溶液，然后按“2.2.2（1）”项下色谱条件进行测定，记录峰
0 5 10 15 20 25 30
t，min 面积并计算加样回收率。结果，吗啡、磷酸可待因的平
A.混合对照品溶液
均加样回收率分别为 96.18％、95.95％，RSD 分别为
吗啡
0.60 1.78％、2.07％（n＝6），表明本方法准确度较好，结果详
0.50
见表1。
0.40
AU 0.30 表1 加样回收率试验结果（n＝6）
0.20 Tab 1 Results of recovery tests（n＝6）
0.10 磷酸可待因
0 成分 样品中含 加入量， 测得量， 加样回收 平均加样回 RSD，
mg
mg
收率，％
率，％
％
量，mg
0 5 10 15 20 25 30
t，min 吗啡 0.606 96 0.563 28 1.146 51 95.79 96.18 1.78
B.供试品溶液1 0.617 88 0.563 28 1.166 49 97.40
0.60 0.611 40 0.563 28 1.144 68 94.67
0.594 96 0.563 28 1.123 24 93.79
0.50
0.615 60 0.563 28 1.163 43 97.26
0.40
0.615 84 0.563 28 1.168 62 98.14
AU 0.30 磷酸可待因 0.121 39 0.140 70 0.259 87 98.42 95.95 2.07
0.20 0.121 18 0.140 70 0.256 24 94.29
0.10 0.122 28 0.140 70 0.253 71 93.41
0 0.118 99 0.140 70 0.252 77 95.08
0 5 10 15 20 25 30 0.123 12 0.140 70 0.260 26 97.47
t，min
C.阴性对照溶液 0.123 17 0.140 70 0.259 72 97.05
图4 按本研究新建方法测得的高效液相色谱图 （9）耐 用 性 试 验 。 取 供 试 品 溶 液 1（批 号 ：
Fig 4 HPLC chromatograms by established method 20180301），在其他色谱条件不变的情况下，分别采用
in this study Welch C18 （250 mm×4.6 mm，5 µm）、ACE C18 （250 mm×
4.6 mm，5 µm）、XBridge C18 （250 mm×4.6 mm，5 µm）色
28 313（r＝0.999 9）。结果表明，吗啡和磷酸可待因分别
谱柱进行试验。结果，以不同色谱柱测得的供试品溶液
在进样量为 0.301 56～2.110 90、0.064 93～0.454 52 µg
1 中吗啡的含量分别为 1.2、1.2、1.2 mg/g，磷酸可待因的
范围内与其峰面积线性关系良好。
含量分别为0.23、0.24、0.23 mg/g，RSD分别为0和2.47％
（4）检测线和定量限考察。取“2.2.1”项下混合对照
品溶液适量，加甲醇倍比稀释，当信噪比为3 ∶ 1、10 ∶ 1时 （n＝3）。结果表明，3种不同品牌的色谱柱对吗啡和磷酸
可待因的含量测定结果无显著影响，本方法耐用性良好。
分别测得检测限和定量限。结果，吗啡、磷酸可待因的
（10）样品含量测定。取 18 批样品，每批 2 份，分别
检测限分别为 0.000 10、0.001 28 µg，定量限分别为
按“2.2.1”项下供试品溶液1制备方法制备溶液，按“2.2.2
0.000 34、0.042 5 µg。
（1）”项下色谱条件进行测定，记录峰面积并计算2个成
（5）精密度试验。精密吸取“2.2.1”项下混合对照品
溶液，按“2.2.2（1）”项下色谱条件重复进样 6 次，记录峰 分含量，取平均值。结果，18 批样品中吗啡含量范围为
面积。结果，吗啡和磷酸可待因峰面积的 RSD 分别为 0.97～1.37 mg/g，磷 酸 可 待 因 含 量 范 围 为 0.16～0.37
0.29％、0.38％（n＝6），表明仪器精密度良好。 mg/g，详见表2。
（6）稳定性试验。取同一供试品溶液 1（批号： 3 讨论
20180301），分别在室温下放置 0、2、4、6、8、12 h 时按 3.1 TLC鉴别方法的考察
“2.2.2（1）”项下色谱条件进行测定，记录峰面积。结果， 在吉祥草的TLC鉴别试验中，笔者分别对样品的提
吗啡和磷酸可待因峰面积的 RSD 分别为 0.13％、0.46％ 取方法（超声、水浴回流等）和提取溶剂（70％乙醇、甲
（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置12 h内稳定。 醇、50％甲醇等）等前处理条件进行了考察，并且对三氯
（7）重复性试验。取同一批咳清胶囊样品（批号： 甲烷-乙酸乙酯-甲酸（8 ∶ 5 ∶ 0.2，V/V/V）、正己烷-乙酸乙
20180301）内容物，混匀后，取1.0 g，共6份，按“2.2.1”项 酯-冰醋酸（3 ∶ 2 ∶ 0.5，V/V/V）、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸
下供试品溶液 1 制备方法平行制备溶液，分别按“2.2.2 （10 ∶ 4 ∶ 0.2，V/V/V）等展开剂进行了筛选。结果显示，采
（1）”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算2个成 用70％乙醇、水浴回流提取的样品前处理方法和以二氯
分含量。结果，吗啡和磷酸可待因含量的 RSD 分别为 甲烷-乙酸乙酯-甲酸（10∶4∶0.2，V/V/V）为展开剂时，TLC

·598 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 5 中国药房 2020年第31卷第5期