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取本品内容物10 g，加饱和碳酸钠溶液40 mL，超声 滤液置于蒸发皿中；残渣再加提取溶剂同法操作，重复
（功率为 300 W，频率为 40 kHz）处理 30 min，以 10 000 提取 3 次。合并提取液，蒸干，残渣加流动相定容至 10
r/min 离心 5 min，滤过；滤液加盐酸调节 pH 至 1～2，静 mL量瓶中，摇匀，过0.45 μm滤膜，取续滤液，即得。
[1]
置30 min，滤过；滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30 （3）供试品溶液2：按现行质量标准中方法 制备。
mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作 （4）阴性对照溶液：按咳清胶囊处方和工艺制备缺
为供试品溶液。另取桑白皮对照药材1 g和缺桑白皮阴 罂粟壳药材的阴性样品，并按供试品溶液制备方法制成
性空白制剂内容物（本课题组按咳清胶囊处方和工艺自 阴性对照溶液。
制）10 g，同法制备桑白皮对照药材溶液和缺桑白皮阴性 2.2.2 按现行标准进行含量测定
对照溶液。按照 2015 年版《中国药典》（四部）通则 取供试品溶液 2（批号：20180301）及混合对照品溶
[8]
0502 法 进行试验：吸取上述3种溶液各5 µL，点样于同 液，分别按现行质量标准方法中色谱条件 进样分析，记
[1]
一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液（12∶2∶1， 录色谱图。结果显示，按现行质量标准仅能对咳清胶囊
V/V/V）为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外光灯（波长 中磷酸可待因进行含量测定，不能满足质量标准提高要
为365 nm）下检视。结果，供试品色谱中，在与对照药材 求。按现行质量标准方法测得的色谱图见图3。
色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，且阴性对照 吗啡
无干扰，结果见图2。 0.06 磷酸可待因
0.04
AU
0.02
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
t，min
A.混合对照品溶液
磷酸可待因
0.10
0.08
AU 0.06
0.04
0.02
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
注：1～3.供试品（批号：20180501、20181107、20181204）；4.桑白皮 t，min
B.供试品溶液2
对照药材；5. 缺桑白皮阴性样品
Note：1-3. test sample（batch numbers： 20180501，20181107， 图3 按现行质量标准方法测得的高效液相色谱图
20181204）；4. reference substance of M. alba；5. negative sample with- Fig 3 HPLC chromatograms by current quality stan-
out M. alba dard
图2 咳清胶囊中桑白皮鉴定的TLC图
Fig 2 TLC chromatogram of M. alba in Keqing cap- 2.2.2 按本研究建立方法进行含量测定
（1）色谱条件。色谱柱：XBridge C18 （250 mm×4.6
sules
mm，5 µm）；流动相：乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾水溶液
2.2 吗啡和磷酸可待因的含量测定 （以 5％磷酸溶液调节 pH 至 2.7）（5 ∶ 95，V/V）；流速：1.0
2.2.1 溶液的制备 mL/min；检测波长：210 nm；柱温：35 ℃；进样量：10 μL。
（1）混合对照品溶液：精密称取吗啡对照品 25 mg， （2）专属性与系统适用性试验。分别吸取混合对照
置于25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制 品溶液、供试品溶液 1（批号：20180301）、阴性对照溶液
得质量浓度为1 mg/mL的吗啡对照品贮备液；精密称取 各 10 μL，按“2.2.2（1）”项下色谱条件进行测定，记录色
磷酸可待因对照品10 mg，置于25 mL量瓶中，用甲醇溶 谱图。结果显示，在该条件下能够同时测定咳清胶囊中
解并稀释至刻度，摇匀，制得质量浓度为0.4 mg/mL的磷 吗啡和磷酸可待因2个成分；理论板数按吗啡和磷酸可
酸可待因对照品贮备液。精密量取吗啡对照品贮备液 待因计均不低于8 000，相邻峰间分离度均大于1.5，基线
2 mL和磷酸可待因对照品贮备液1 mL，置于同一25 mL 分离度良好，且阴性对照溶液在供试品和对照品色谱峰
量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，制得吗啡质量浓度 相应位置处无相应峰出现，表明该方法专属性较好。按
为80 μg/mL、磷酸可待因质量浓度为16 μg/mL的混合对 本研究新建方法测得的色谱图见图4。
照品溶液。 （3）线性关系考察。分别精密吸取“2.2.1”项下混合
（2）供试品溶液 1：取本品 20 粒内容物，混匀，取 1.0 对照品溶液 4、8、12、16、20、24、28 µL，注入高效液相色
g，精密称定，置于100 mL具塞锥形瓶中，精密加入提取 谱仪，按“2.2.2（1）”项下色谱条件进行测定，记录峰面
溶剂（氨水 4 mL、三氯甲烷 50 mL），密塞，称定质量，超 积。以进样量（x，μg）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标绘
声（功率为 300 W，频率为 40 kHz）处理 30 min，放冷，再 制标准曲线，得吗啡和磷酸可待因的回归方程分别为：
次称定质量，用三氯甲烷补足减失的质量，摇匀，滤过， y＝4 948 991x－97 372（r＝0.999 9）、y＝3 858 213x－

中国药房 2020年第31卷第5期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 5 ·597 ·