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10.03 μg和藁本内酯11.46 μg的混合对照品溶液。（2）供 3 ∶ 1 时，得检测限；当信噪比为 10 ∶ 1 时，得定量限，结果
试品溶液制备。取成方冻干粉（批号：190615）约 0.5 g， 见表2。
精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入 70％甲醇 25 2.2.6 精密度试验 精密吸取“2.2.2”项下混合对照溶
mL，密塞，称定质量，超声30 min（功率：250 W，频率：40 液适量，按“2.2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录
kHz，下同），放冷，再称定质量，用70％甲醇补足减失的 色谱图。结果，阿魏酸、毛蕊花糖苷和藁本内酯峰面积
质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。（3）阴性样品溶液 A 的 RSD 分别为 0.52％、0.98％、0.75％（n＝6），表明仪器
制备。取阴性冻干粉A约0.2 g，按上述供试品溶液制备 精密度良好。
方法制备，即得。 2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液（批号：190615），
2.2.3 系统适用性试验 分别取“2.2.2”项下混合对照 分别于室温条件下放置 0、2、5、8、10、12 h 时，按“2.2.1”
品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液 A，在“2.2.1”项色 项下色谱条件进样测定，记录色谱图。结果，阿魏酸、毛
谱条件下进样测定，记录色谱图。结果，在该色谱条件 蕊 花糖苷和藁本内酯峰面积的 RSD 分别为 1.02％、
下，各峰间分离度均大于1.5，其他成分对待测成分的测 0.47％、0.72％（n＝6），表明供试品溶液在室温放置12 h
定无干扰，理论板数以阿魏酸峰计不低于3 000，色谱图 内稳定性良好。
见图1。 2.2.8 重复性试验 取同一批冻干粉样品（批号：
190615）6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按
阿魏酸 “2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法
毛蕊花糖苷 藁本内酯
U，V μ A 计算各成分含量。结果，阿魏酸、毛蕊花糖苷和藁本内

B 酯平均含量分别为1.246、0.414、0.324 mg/g，RSD分别为
0.96％、0.61％、0.55％（n＝6），表明方法重复性良好。
C
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2.2.9 加样回收率试验 取冻干粉样品（批号：190615）
t，min
6份，每份约0.25 g，精密称定，分别置于具塞锥形瓶中，
注：A.供试品溶液；B.阴性样品溶液A；C.阿魏酸、毛蕊花糖苷和藁
各加入待测成分对照品适量，按“2.2.2”项下方法制备供
本内酯混合对照品溶液
Note：A. test solution；B. negative sample solution A；C. mixed con- 试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
trol solution of ferulic acid，verbascoside and ligustilide 积并计算各成分的加样回收率。结果，阿魏酸、毛蕊花
图1 阿魏酸、毛蕊花糖苷、藁本内酯含量测定高效液相 糖苷和藁本内酯平均加样回收率分别为 99.6％（RSD＝
色谱图
0.83％，n＝6）、100.9％（RSD＝1.07％，n＝6）和 98.8％
Fig 1 HPLC chromatogram of content determination
（RSD＝0.84％，n＝6），详见表3。
of ferulic acid，verbascoside and ligustilide
表 3 阿魏酸、毛蕊花糖苷和藁本内酯回收率试验结果
2.2.4 线性关系考察 分别精密吸取“2.2.2”项下混合 （n＝6）
对照品贮备液 0.05、1、2、3、5 mL，置于不同 10 mL 量瓶 Tab 3 Results of the recovery test of ferulic acid，ver-
中，加70％甲醇稀释制得 5 个不同质量浓度的混合对照 bascoside and ligustilide（n＝6）
品溶液。取“2.2.2”项下混合对照贮备溶液及上述5个质 待测成分 样品中含量，mg 加入量，mg 测得量，mg 回收率，％ 平均回收率，％ RSD，％
量浓度混合对照品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测 阿魏酸 0.305 3 0.323 2 0.624 1 98.64 99.6 0.83
0.324 0 0.323 2 0.649 6 100.75
定，以进样量为横坐标（x）、峰面积为纵坐标（y）分别绘 0.295 4 0.323 2 0.618 4 99.95
制各成分标准曲线，计算其回归方程。结果，各成分在 0.325 2 0.323 2 0.643 8 98.56
0.326 8 0.323 2 0.647 6 99.27
各自进样量范围内与峰面积的线性关系良好，详见表2。
0.305 7 0.323 2 0.630 0 100.35
表2 线性关系考察结果 毛蕊花糖苷 0.101 4 0.099 2 0.201 5 100.87 100.9 1.07
Tab 2 Results of linear relationship test 0.107 6 0.099 2 0.208 9 102.07
0.098 1 0.099 2 0.196 8 99.45
待测成分 回归方程 r 线性范围，μg 检测限，μg 定量限，μg 0.108 1 0.099 2 0.208 7 101.45
5
阿魏酸 y＝9.75×10 x-4.71×10 3 0.999 9 0.067 80～13.56 2.12×10 －4 7.43×10 －4 0.108 6 0.099 2 0.207 4 99.63
毛蕊花糖苷 y＝3.93×10 x+1.25×10 4 0.999 8 0.050 15～10.03 1.30×10 －3 3.87×10 －3 0.101 6 0.099 2 0.202 9 102.15
6
6
藁本内酯 y＝4.09×10 x+3.17×10 4 0.999 5 0.057 30～11.46 8.02×10 －4 2.34×10 －3 藁本内酯 0.079 4 0.081 9 0.160 5 99.04 98.8 0.84
黄芪甲苷 y＝1.744x＋4.634 0.099 9 1.128～11.28 1.09×10 －3 3.36×10 －3 0.084 2 0.081 9 0.164 6 98.12
2.2.5 检测限与定量限考察 精密吸取“2.2.2”项下混 0.076 8 0.081 9 0.158 5 99.75
0.084 6 0.081 9 0.164 8 97.96
合对照品溶液适量，加甲醇倍比稀释后，按“2.2.1”项下 0.085 0 0.081 9 0.165 3 98.08
色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。当信噪比为 0.079 5 0.081 9 0.161 4 100.02

·578 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 5 中国药房 2020年第31卷第5期