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2.3.6 灌流实验过程中4种千金子素的稳定性考察 根 二指肠、空肠、回肠、结肠处吸收的 Ka值和 Peff值测定结
据前期预试验结果，选取脂肪油用量为0.2 g/L的自组装 果见表 2。由表 2 可见，不同千金子脂肪油用量的自组
胶束溶液，共 5 份，分别于 37 ℃保温 0、1、2、3、4 h 时，经 装胶束均能使 4 种千金子素在各肠段的 Ka值和 Peff值呈
0.22 μm 微孔滤膜滤过后，按“2.3.2”项下方法制备供试 现不同程度的升高。当千金子脂肪油用量为0.4 g/L时，
品溶液，再按“2.3.3”项下色谱条件进样测定并按标准曲 4 种千金子素在各肠段均呈现最大吸收，且与不含脂肪
线法计算4种千金子素的含量，考察在37 ℃肠灌流过程 油组（0 g/L，下同）比较，其Peff值均显著升高（P＜0.05或
中自组装胶束及其中成分的稳定性。结果，自组装胶束 P＜0.01）；与不含脂肪油组比较，除千金子素 L1在十二
的性状稳定，未见絮凝或沉淀等现象；4种千金子素在不 指肠段以及千金子素L2、L3在空肠段中的Ka值差异无统
同时间点间的含量RSD均小于2.5％（n＝5），见表1。这 计学意义（P＞0.05）之外，不同千金子脂肪油用量组中4
表明，自组装胶束及其中的4种千金子素成分在37 ℃条 种千金子素在各肠段的Ka值均显著升高（P＜0.05或P＜
件下进行肠灌流4 h过程中稳定性良好。 0.01）。按不同脂肪油用量组各肠段的Ka、Peff值排序：当
表 1 37 ℃℃肠灌流过程中 4 种千金子素的稳定性试验 千金子脂肪油用量为 0.2 g/L 时，千金子素 L1、L2、L3 的
结果 Ka、Peff值在空肠处均为最高，千金子素 L8的 Ka、Peff值在
Tab 1 Results of stability tests of 4 kinds of euphorbia 回肠处均为最高，4 种千金子素的 Ka、Peff值在结肠处均
during intestinal perfusion at 37 ℃℃ 为最低（除千金子素 L2的 Peff值在回肠处最低外）；当千
不同时间点的含量，mg/L 含量（x±s）， 金子脂肪油用量为0.4 g/L时，千金子素L1、L2的Ka、Peff值
待测成分 RSD，％
0 h 1 h 2 h 3 h 4 h mg/L
8.41 8.37 8.14 8.19 8.29 8.28±0.11 1.39 在空肠处均为最高，千金子素L3、L8的Ka、Peff值在回肠处
千金子素L1
4.15 4.37 4.17 4.25 4.32 4.25±0.09 2.22 均为最高，4 种千金子素的 Ka、Peff值在结肠处均为最低
千金子素L2
7.28 7.13 7.23 7.22 7.09 7.19±0.08 1.08
千金子素L3 （除千金子素L1、L2的Peff值在十二指肠处为最低外）；当
11.82 12.17 12.12 11.71 11.98 11.96±0.19 1.63
千金子素L8
千金子脂肪油用量为 1 g/L 时，千金子素 L1、L2、L3的 Ka、
2.3.7 样品含量测定 “2.2”项下灌流实验结束后，分别
Peff值在空肠处均为最高，千金子素L8的Ka、Peff值在回肠
取不同组别含药肠灌流液的灌流液和流出液，按“2.3.2”
处均为最高，4 种千金子素的 Ka、Peff值在结肠处均为最
项下方法制备供试品溶液，并按“2.3.3”项下色谱条件进
低；当千金子脂肪油用量为4 g/L时，4种千金子素的Ka、
样分析，以标准曲线法计算含量。
Peff值在空肠处均为最高（除千金子素 L8的 Ka值在回肠
2.4 数据处理
处最高外），在结肠处均为最低（除千金子素 L2的 Peff值
根据“2.3”项下测定结果，按下列公式计算4种千金
子素的 Ka值（min ）和 Peff值（cm/min）：Ka＝（1－coutV out/ 在回肠处为最低外）。4 种千金子素在各肠段的吸收效
－1
果总体上呈现空肠最好、结肠最差的趋势。
cinV in ）·Qin/V；Peff＝－Qin ·ln（coutV out/cinV in ）/A。式中，cin和cout
分别为该肠段灌流液和流出液中待测成分的质量浓度 3.2 不同千金子脂肪油用量对 4 种千金子素在大鼠回
肠段累积吸收量的影响
（mg/L）；V in和V out分别为该肠段灌流液的灌流液和流出液
体积（mL，均以液体质量表示）；Qin为灌流速度（mL/min）； 由表 2 可见，不同千金子脂肪油用量组中 4 种千金
2
V 为该灌流肠段的体积（cm），V＝πR L[R 为该肠段半径 子素在空肠段吸收均最好；但与不含脂肪油组比较，其
3
（cm），L 为该肠段的长度（cm）]；A 为该灌流肠段的表面 余脂肪油用量组中 4 种千金子素在空肠处的 Ka值差异
积（cm），A＝2πRL。其中，灌流液的流入与流出体积按 大部分无统计学意义（P＞0.05），难以比较不同脂肪油
2
重量法 进行校正，即假设进出口的灌流液密度一样， 用量条件下的吸收差异。因此，选择吸收较好的回肠
[15]
则灌流液和流出液的质量可分别表示灌流液和流出液 段[与不含脂肪油组比较，其他脂肪油用量组的 Ka值和
的体积。此外，按以下公式计算4种千金子素各个时间 Peff值差异均有统计学意义（P＜0.01）]进行累积吸收量
点的吸收量（Q）：Q＝cinV in－coutV out；将各个时间点某肠段 计算。结果显示，与不含脂肪油组比较，千金子脂肪油
的吸收量累加，即为千金子素的累积吸收量。 用量为0.2～4 g/L时，4种千金子素在大鼠回肠处的累积
采用SPSS 17.0软件进行统计处理，实验数据以x± 吸收量均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且以0.4 g/L脂
s 表示，各组间数据比较采用单因素方差分析（One-way 肪油用量组为最高，详见表3。
ANOVA）。P＜0.05为差异有统计学意义。 4 讨论
3 结果 千金子素 L1、L2、L3、L8均为千金二萜烷型二萜醇酯
3.1 不同千金子脂肪油用量对 4 种千金子素在大鼠各 类化合物，含有多个酯键，极性较小，采用 ACD/ChemS-
肠段中吸收情况的影响 ketch 10.0 软件计算千 4 种千金子素的疏水常数分别为
120 min的在体灌流过程中，4种千金子素在大鼠十 5.55±0.53、8.61±0.45、7.25±0.42、5.56±0.43，进一步

·438 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 中国药房 2020年第31卷第4期