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条件进样测定,平行操作3次,记录峰面积并按标准曲线                           苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量无显著差异,但
        法计算样品中5种成分的含量,结果见表11。                               不同省份产地黑豆药材样品间含量差异明显,这可能与
               表11 样品含量测定结果(n=3,mg/g)                       其产地的地理位置、气候、土壤等因素可影响黑豆的次
        Tab 11 Results of content determination of samples  生代谢产物有关(因黑豆的次生代谢产物中也含有黄酮
               (n=3,mg/g)                                   类成分) 。
                                                                   [12]
        编号     大豆苷      黄豆黄苷     染料木苷     大豆苷元    染料木素          综上所述,本文所建指纹图谱和 5 种异黄酮类成分
        S1     0.240 2   0.055 8  0.369 3  0.012 3  0.012 9  的含量测定方法均可用于黑豆药材的质量控制;不同产
        S2     0.247 9   0.057 4  0.388 8  0.014 8  0.016 5
        S3     0.241 8   0.056 0  0.376 6  0.014 1  0.015 9  地黑豆药材中异黄酮类成分相似,但含量有所差异。
        S4     0.192 9   0.022 1  0.308 7  0.058 1  0.059 7  参考文献
        S5     0.178 3   0.021 7  0.288 5  0.058 8  0.065 1
        S6     0.186 3   0.023 8  0.295 7  0.056 5  0.059 9  [ 1 ]  国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2015年
        S7     0.203 5   0.029 3  0.334 1  0.051 7  0.054 6      版.北京:中国医药科技出版社,2015:344-345.
        S8     0.214 4   0.041 6  0.342 6  0.039 5  0.035 8  [ 2 ]  周三,关崎春雄,岳旺,等.野生大豆、黑豆和大豆的异黄
        S9     0.211 7   0.028 2  0.344 8  0.033 7  0.037 5
        S10    0.264 3   0.094 4  0.597 2  0.050 9  0.082 5      酮类成分比较[J].大豆科学,2008,27(2):315-319.
        S11    0.260 3   0.093 0  0.585 4  0.050 4  0.082 9  [ 3 ]  周莎,宛金,王彦晖,等.基于“黑豆补肾”的科学内涵论中
        S12    0.265 9   0.096 2  0.584 2  0.050 2  0.081 0
                                                                 医之“道理”观[J].医学与哲学,2018,39(8):78-81.
        3 讨论                                                [ 4 ]  刘秀玉,王利丽,左瑞庭,等.药用黑豆的研究进展[J].亚
            在前期预试验中,笔者分别考察了 30%、50%、                             太传统医药,2017,13(20):82-85.
        70%、90%甲醇为提取溶剂时的提取效果,发现以 70%                        [ 5 ]  张素霞,李红丽.大豆异黄酮功能特性及其检测方法的研
        甲醇提取时,各待测成分的色谱峰响应相对最高,故选                                 究进展[J].粮油加工,2009,2(19):64-67.
        择 70%甲醇为提取溶剂。笔者又比较了不同检测波长                           [ 6 ]  黄涛,刘丽,张笑敏,等.夏天无HPLC指纹图谱及多指标
        (210、254、260、280、360 nm)下各色谱峰的分离效果,发                     含量测定研究[J].中草药,2019,50(10):2474-2479.
        现当检测波长为260 nm时,各色谱峰均有较强吸收,且                         [ 7 ]  陆泉. RP-HPLC 法测定药材黑豆中大豆苷的含量[J].首
                                                                 都医药,2014,21(18):73-74.
        分离度较好,故选择检测波长为 260 nm。同时,笔者还
                                                            [ 8 ]  刘洋,郭晓雨,孙殿奎,等.不同产地黑豆黄酮提取物的抗
        考察了乙腈-0.10%冰乙酸水溶液、乙腈-0.12%甲酸水溶
                                                                 氧化能力比较研究[J].人参研究,2012,24(1):21-23.
        液不同流动相系统的分离效果,发现以乙腈-0.12%甲酸
                                                            [ 9 ]  ZHANG J,GUO Q,WEI M,et al. Metabolite identifica-
        水溶液为流动相进行梯度洗脱时,各色谱峰分离度较
                                                                 tion and pharmacokinetic profiling of isoflavones from
        好,故选择流动相为乙腈-0.12%甲酸水溶液进行梯度
                                                                 black soybean in rats using ultrahigh-performance liquid
        洗脱。
                                                                 chromatography with linear-ion-trap-orbitrap and triple-
            指纹图谱能体现中药成分的整体性,符合中药质量                               quadrupole tandem mass spectrometry[J]. J Agric Food
                   [10]
        评价的特点 ,但无法确定指纹图谱中各共有峰所代表                                 Chem,2018,66(49):12941-12952.
        的物质及其含量,因此在指纹图谱的基础上进行多成分                            [10]  姜华,高原,杨景明,等.源于“整体观”思想的中药质量评
                                            [11]
        定量分析,可在一定程度上弥补上述不足 。相似度评                                 价方法研究概述[J].中国中药杂志,2015,40(6):1027-
        价结果显示,12 批黑豆药材样品的相似度均大于 0.94,                            1031.
        表明各批黑豆药材样品的化学成分一致性较好;共获得                            [11]  何兵,刘艳,李春红,等.多指标定量指纹图谱在中药金银
        19个共有峰,相对保留时间的RSD为0~0.53%,相对峰                            花质量评价中的应用[J].中国药学杂志,2015,50(14):
        面积的RSD为0~62.50%,表明不同产地黑豆药材样品                             1237-1242.
        间虽然具有相同的化学成分,但含量存在差异。聚类分                            [12]  屠鹏飞.中药指纹图谱制定的方法学探讨[C]//国际色谱
        析、PCA 分析结果均显示,12 批黑豆药材样品可聚为两                             指纹图评价中药质量研讨会论文集.广州:国家中医药
                                                                 管理局,2001:111-114.
        类:S4~S12 聚为一类,S1~S3 聚为一类;S4~S12 药材
                                                                         (收稿日期:2019-08-19  修回日期:2020-01-03)
        样品质量相近,与 S1~S3 存在较大差异。含量测定结
                                                                                                 (编辑:陈 宏)
        果显示,同一省份产地黑豆药材样品中大豆苷、黄豆黄








        ·434  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4                                   中国药房    2020年第31卷第4期
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