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条件进样测定,平行操作3次,记录峰面积并按标准曲线 苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量无显著差异,但
法计算样品中5种成分的含量,结果见表11。 不同省份产地黑豆药材样品间含量差异明显,这可能与
表11 样品含量测定结果(n=3,mg/g) 其产地的地理位置、气候、土壤等因素可影响黑豆的次
Tab 11 Results of content determination of samples 生代谢产物有关(因黑豆的次生代谢产物中也含有黄酮
(n=3,mg/g) 类成分) 。
[12]
编号 大豆苷 黄豆黄苷 染料木苷 大豆苷元 染料木素 综上所述,本文所建指纹图谱和 5 种异黄酮类成分
S1 0.240 2 0.055 8 0.369 3 0.012 3 0.012 9 的含量测定方法均可用于黑豆药材的质量控制;不同产
S2 0.247 9 0.057 4 0.388 8 0.014 8 0.016 5
S3 0.241 8 0.056 0 0.376 6 0.014 1 0.015 9 地黑豆药材中异黄酮类成分相似,但含量有所差异。
S4 0.192 9 0.022 1 0.308 7 0.058 1 0.059 7 参考文献
S5 0.178 3 0.021 7 0.288 5 0.058 8 0.065 1
S6 0.186 3 0.023 8 0.295 7 0.056 5 0.059 9 [ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2015年
S7 0.203 5 0.029 3 0.334 1 0.051 7 0.054 6 版.北京:中国医药科技出版社,2015:344-345.
S8 0.214 4 0.041 6 0.342 6 0.039 5 0.035 8 [ 2 ] 周三,关崎春雄,岳旺,等.野生大豆、黑豆和大豆的异黄
S9 0.211 7 0.028 2 0.344 8 0.033 7 0.037 5
S10 0.264 3 0.094 4 0.597 2 0.050 9 0.082 5 酮类成分比较[J].大豆科学,2008,27(2):315-319.
S11 0.260 3 0.093 0 0.585 4 0.050 4 0.082 9 [ 3 ] 周莎,宛金,王彦晖,等.基于“黑豆补肾”的科学内涵论中
S12 0.265 9 0.096 2 0.584 2 0.050 2 0.081 0
医之“道理”观[J].医学与哲学,2018,39(8):78-81.
3 讨论 [ 4 ] 刘秀玉,王利丽,左瑞庭,等.药用黑豆的研究进展[J].亚
在前期预试验中,笔者分别考察了 30%、50%、 太传统医药,2017,13(20):82-85.
70%、90%甲醇为提取溶剂时的提取效果,发现以 70% [ 5 ] 张素霞,李红丽.大豆异黄酮功能特性及其检测方法的研
甲醇提取时,各待测成分的色谱峰响应相对最高,故选 究进展[J].粮油加工,2009,2(19):64-67.
择 70%甲醇为提取溶剂。笔者又比较了不同检测波长 [ 6 ] 黄涛,刘丽,张笑敏,等.夏天无HPLC指纹图谱及多指标
(210、254、260、280、360 nm)下各色谱峰的分离效果,发 含量测定研究[J].中草药,2019,50(10):2474-2479.
现当检测波长为260 nm时,各色谱峰均有较强吸收,且 [ 7 ] 陆泉. RP-HPLC 法测定药材黑豆中大豆苷的含量[J].首
都医药,2014,21(18):73-74.
分离度较好,故选择检测波长为 260 nm。同时,笔者还
[ 8 ] 刘洋,郭晓雨,孙殿奎,等.不同产地黑豆黄酮提取物的抗
考察了乙腈-0.10%冰乙酸水溶液、乙腈-0.12%甲酸水溶
氧化能力比较研究[J].人参研究,2012,24(1):21-23.
液不同流动相系统的分离效果,发现以乙腈-0.12%甲酸
[ 9 ] ZHANG J,GUO Q,WEI M,et al. Metabolite identifica-
水溶液为流动相进行梯度洗脱时,各色谱峰分离度较
tion and pharmacokinetic profiling of isoflavones from
好,故选择流动相为乙腈-0.12%甲酸水溶液进行梯度
black soybean in rats using ultrahigh-performance liquid
洗脱。
chromatography with linear-ion-trap-orbitrap and triple-
指纹图谱能体现中药成分的整体性,符合中药质量 quadrupole tandem mass spectrometry[J]. J Agric Food
[10]
评价的特点 ,但无法确定指纹图谱中各共有峰所代表 Chem,2018,66(49):12941-12952.
的物质及其含量,因此在指纹图谱的基础上进行多成分 [10] 姜华,高原,杨景明,等.源于“整体观”思想的中药质量评
[11]
定量分析,可在一定程度上弥补上述不足 。相似度评 价方法研究概述[J].中国中药杂志,2015,40(6):1027-
价结果显示,12 批黑豆药材样品的相似度均大于 0.94, 1031.
表明各批黑豆药材样品的化学成分一致性较好;共获得 [11] 何兵,刘艳,李春红,等.多指标定量指纹图谱在中药金银
19个共有峰,相对保留时间的RSD为0~0.53%,相对峰 花质量评价中的应用[J].中国药学杂志,2015,50(14):
面积的RSD为0~62.50%,表明不同产地黑豆药材样品 1237-1242.
间虽然具有相同的化学成分,但含量存在差异。聚类分 [12] 屠鹏飞.中药指纹图谱制定的方法学探讨[C]//国际色谱
析、PCA 分析结果均显示,12 批黑豆药材样品可聚为两 指纹图评价中药质量研讨会论文集.广州:国家中医药
管理局,2001:111-114.
类:S4~S12 聚为一类,S1~S3 聚为一类;S4~S12 药材
(收稿日期:2019-08-19 修回日期:2020-01-03)
样品质量相近,与 S1~S3 存在较大差异。含量测定结
(编辑:陈 宏)
果显示,同一省份产地黑豆药材样品中大豆苷、黄豆黄
·434 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 中国药房 2020年第31卷第4期