Page 65 - 202004

即得。 0.007 3、0.003 8、0.005 9 mg/mL。
2.2.3 阴性对照溶液 以80％甲醇为阴性对照溶液。 2.6 精密度试验
2.3 系统适用性试验 取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，按“2.1”项下色
取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶液（编号： 谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。结果，没食子
S1）、阴性对照溶液适量，按“2.1”项下色谱条件进行测 酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷
定，记录色谱图。结果，理论板数按芍药苷峰计不低于 峰面积的 RSD 分别为 0.63％、0.65％、0.38％、0.54％、
3 000，阴性对照无干扰，各成分分离度均大于 3，详见 0.83％、0.97％（n＝6），表明仪器精密度良好。
图 1。 2.7 稳定性试验
取“2.2.2”项下供试品溶液（编号：S1）适量，分别于
0.80
0.60 室温放置0、2、4、8、12 h时，按“2.1”项下色谱条件进样测
AU 0.40
0.20 定，记录峰面积。结果，没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、
0
0 10 20 30 40 50 60 芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷峰面积的 RSD 分别为
t，min
A.混合对照品溶液 0.63％、0.76％、0.53％、0.66％、0.71％、0.65％（n＝5），表
1.20
0.90 明供试品溶液在室温下放置12 h内基本稳定。
AU 0.60 2.8 重复性试验
0.30
0 取赤芍药材粉末（编号：S1）1 g，共6份，按“2.2.2”项
0 10 20 30 40 50 60
t，min 下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测
B.供试品溶液（编号：S1）
0.05
0.04 定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品中6种成分的
AU 0.03
0.02 含量。结果，没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯
0.01
0 10 20 30 40 50 60 甲酸、苯甲酰芍药苷含量的 RSD 分别为 1.13％、1.11％、
t，min
C.阴性对照溶液 1.22％、1.34％、1.28％、1.34％（n＝6），表明本方法重复
注：1.没食子酸；2.儿茶素；3.芍药内酯苷；4.芍药苷；5.苯甲酸；6.苯 性良好。
甲酰芍药苷 2.9 加样回收率试验
Note：1. gallic acid；2. catechin；3. alibiflorin；4. paeoniflorin；5. 精密称取已知含量的赤芍药材粉末（编号：S1）1 g，
benzoic acid；6. benzoylpaeoniflorin 共6份，分别按各已知含量的50％、100％、150％比例加
图1 高效液相色谱图 入各单一对照品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，
Fig 1 HPLC chromatograms 再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加
2.4 线性关系考察 样回收率。结果表明，本方法准确度良好，详见表3。
分别精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，用 2.10 赤芍药材样品含量测定
甲醇逐级稀释，制成不同质量浓度的系列线性工作溶 取 11 批赤芍药材粉末各 1 g，按“2.2.2”项下方法制
液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以 备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录
待测成分质量浓度（x，mg/mL）为横坐标、峰面积（y）为 峰面积并按标准曲线法计算样品中6种成分的含量。每
纵坐标进行线性回归，结果见表2。 样品平行测定3次，取平均值，结果见表4。
表2 回归方程与线性范围 2.11 不同采收期赤芍药材折干率的动态变化
Tab 2 Regression equation and linear range 计算不同采收期赤芍药材的折干率：折干率＝（干
待测成分 回归方程 r 线性范围，mg/mL 质量/鲜质量）×100％。折干率越高表示药材所含水份
[12]
没食子酸 y＝6×10 x－288 588 0.999 2 0.013 2～0.25 越少 。以采收期（x）为横坐标、折干率（y，％）为纵坐标
7
7
儿茶素 y＝4×10 x－828 316 0.999 9 0.013 2～0.25 绘制折干率动态变化柱状图，结果见图2。由图2可知，不
7
芍药内酯苷 y＝4×10 x－46 145 0.999 7 0.026 8～0.51 同采收期赤芍药材的折干率存在差异，其中5－10月采收
7
芍药苷 y＝1×10 x+3×10 6 0.999 2 0.42～8.01
7
苯甲酸 y＝6×10 x－739 164 0.999 4 0.016～0.31 的赤芍药材折干率总体呈上升趋势；8月30日－10月15
苯甲酰芍药苷 y＝1×10 x+622 465 0.999 8 0.02～0.38 日折干率均大于 48％，并在 9 月 15 日达到最高值，约为
7
2.5 定量限与检测限考察 49％；5－6月折干率较低，在5月30日达最低，约为33％。
精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，用甲 2.12 不同采收期赤芍药材中有效成分的动态变化
醇倍比稀释，按“2.1”项下色谱条件进样测定，以信噪比 以采收期（x）为横坐标、有效成分含量（y，％）为纵
10∶1、3∶1分别计算定量限、检测限。结果，没食子酸、儿 坐标，绘制有效成分含量动态变化折线图，结果见图 3、
茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷的定 图4（因芍药苷含量过大，约为其他成分的10倍，在图中
量限分别为 0.009 3、0.008 5、0.016 3、0.021 7、0.011 3、 会影响整体视图效果，故将芍药苷含量缩小10倍，缩小
0.017 4 mg/mL，检测限分别为 0.003 3、0.002 7、0.005 4、 后不影响含量变化趋势。由于芍药内酯苷、芍药苷、苯

中国药房 2020年第31卷第4期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 ·443 ·