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15th，the drying rate was the highest（about 49％）. The contents of gallic acid and paeoniflorin in the leaves of P. lactiflora were
        higher than the root during Jul.-Oct. Results of principal component analysis showed that the variance contribution rates of the first
        two principal components were 71.845％ and 18.170％ ，respectively；cumulative variance contribution rate was 90.015％ . The
        months with higher comprehensive scores were May to Jun. and Sept. to Oct. CONCLUSIONS：Established method is simple，
        accurate，reproducible and precise. It can be used to determine the contents of 6 active ingredients in Radix Paeoniae Rubra during
        different harvest periods. Sept. 30th to Oct. 15th is the optimum harvesting periods for Radix Paeoniae Rubra，and leaves can be
        harvested around Jul. 15th.
        KEYWORDS     Paeonia lactiflora；Roots；Leaves；Harvesting period；HPLC；Content determination；Variation rule；Principal
        component analysis


            赤芍为毛茛科芍药（Paeonia lactiflora Pall.）或川赤           色谱纯，甲醇等其余试剂均为分析纯，水为纯净水。
        芍（Paeonia vitchii Lynch）的干燥根，具有清热凉血、散               1.3 药材
                     [1]
        淤止痛的功效 。该药始载于《神农本草经》，被列为中                               11 批赤芍样品（编号：S1～S11；其中，赤芍根以“赤
          [2]
        品 ，其药理活性成分主要包括酚酸类、单帖苷类及苯肽                           芍药材”表示，叶以“赤芍叶”表示）均采集于黑龙江中医
        类成分   [2-3] 。现代研究表明，该药具有调节免疫、解痉挛、                   药大学药用植物园，经黑龙江中医药大学药学院王振月
        抗炎、抗惊厥、改善心肺功能、抑制癌细胞增殖等作                             教授鉴定为毛茛科芍药（P. lactiflora Pall.）的干燥根或
        用 [4-6] 。目前，有关赤芍的研究主要集中在药理作用、化                      叶，样品信息来源见表 1。赤芍药材采集后立即洗去泥
        学成分提取与分离等方面            [7-8] ，而对其最佳采收期的研究           沙，称定鲜质量，于 40 ℃烘干，称定干质量。赤芍药材
        较少，仅有2015年版《中国药典》（一部）中规定赤芍可在                        和赤芍叶粉碎后过40目筛，备用。
                    [1]
        春秋二季采挖 。
                                                                             表 1 样品信息
            同一地区药材因采收时间不同，其有效成分的含量
                                                                      Tab 1 Information of samples
        也会存在差异，这对药材的质量有较大的影响，因此可
                                                            编号 品种   部位     采集时间      编号 品种   部位    采集时间
                                                [9]
        通过有效成分含量的高低来确定最佳采收期 ，以确保                            S1  芍药  根    2018年5月15日  S7  芍药  根、叶  2018年8月30日
        药材质量。本课题组在研究刺五加时发现，其叶中所含                            S2  芍药  根    2018年5月30日  S8  芍药  根、叶  2018年9月15日
        成分与根中基本一致          [10-11] ，提示中药不同部位的成分可            S3  芍药  根    2018年6月15日  S9  芍药  根、叶  2018年9月30日
                                                            S4  芍药  根、叶  2018年7月15日  S10  芍药  根、叶  2018年10月15日
        能相似；同时，目前关于赤芍叶中有效成分的研究较
                                                            S5  芍药  根、叶  2018年7月30日  S11  芍药  根、叶  2018年10月30日
        少。为此，本研究从开发药材新的药用部位、避免资源                            S6  芍药  根、叶  2018年8月15日
        浪费的角度出发，在探讨同一年不同月份内赤芍化学成                            2 方法与结果
        分是否存在规律性变化的同时，比较了其根与叶中有效
                                                            2.1  色谱条件
        成分含量的动态变化规律，以确定赤芍的最佳采收期，
                                                                色谱柱：Thermo Hypersil ODS-2 C18 （250 mm×4.6
        旨在为其规范化种植与采收提供参考。
                                                            mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B），梯
        1 材料                                                度洗脱（0～8 min，5％A→9％A；8～20 min，9％A→10％
        1.1  仪器
                                                            A；20～24 min，10％ A→13％ A；24～28 min，13％ A；
            e2695型高效液相色谱仪，包括四元梯度泵、自动进
                                                            28～38 min，13％A→16％A；38～48 min，16％A→23％
        样器、柱温箱、二极管阵列检测器、Empower               TM  3 色谱工     A；48～52 min，23％A→30％A；52～70 min，30％A→
        作站（美国 Waters 公司）；FW100 型高速万能粉碎机（天
                                                            70％A）；流速：1.0 mL/min；检测波长：230 nm；柱温：
        津市泰斯特仪器有限公司）；AE240 型十万分之一电子
                                                            35 ℃；进样量：10 µL。
        天平[梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司]；H1650
                                                            2.2 溶液的制备
        型台式高速离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公
                                                            2.2.1  混合对照品溶液         精密称取没食子酸、儿茶素、
        司）；KM-822C型超声波清洗机（广州市科洁盟实验仪器
                                                            芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷对照品适
        有限公司）。
        1.2 药品与试剂                                           量，置于同一量瓶中，加甲醇溶解制成含上述6种成分质
            没食子酸对照品（批号：Y19M8C36143，纯度：≥                     量浓度分别为 0.25、0.25、0.51、8.01、0.31、0.38 mg/mL 的
        98％）、儿茶素对照品（批号：Y89W8F4653，纯度：≥                      混合对照品溶液。
        98％）、芍药内酯苷对照品（批号：Y25F8H30152，纯                      2.2.2  供试品溶液       取赤芍药材或赤芍叶粉末 1 g，置
        度：≥98％）、芍药苷对照品（批号：X12A8C33672，纯                     于 50 mL 具塞锥形瓶中，加 80％甲醇 10 mL，称定质量，
        度：≥98％）、苯甲酸对照品（批号：Z18S7H21155，纯度：≥                  超声（功率：480 W，频率：40 kHz）提取45 min，再次称定
        98％）、苯甲酰芍药苷对照品（批号：P02D7F26004，纯                     质量，用 80％甲醇补足减失的质量，以 4 000 r/min 离心
        度：≥98％）均购自上海源叶生物科技有限公司；乙腈为                          3 min，取上清液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，


        ·442  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4                                   中国药房    2020年第31卷第4期
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