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处理繁琐,鉴别能力弱,已逐渐被仪器分析方法取代;气 糖的 HPLC 指纹图谱;在此基础上,通过对单糖组分的
相色谱法对中性单糖的分离效果较好,而对酸性多糖的 定性、定量分析,初步探讨了18批广金钱草药材多糖的
分离效果较差,且前期处理复杂、耗时,易出现色谱峰异 组成特征、单糖含量及摩尔比。本研究还发现,广金钱
构化裂分;HPLC法可较好地对中性、酸性多糖进行分离 草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性强于阳性对照
[12]
鉴定 。故本研究采用 PMP 柱前衍生化-HPLC 法对广 阿卡波糖,提示其可能具有降血糖作用。但本研究尚未
金钱草多糖的单糖组成进行定性、定量分析。结果显 对广金钱草多糖的药效学进行分析,有待后续研究进一
示,所建HPLC法重复性、稳定性良好,且灵敏度较高。 步完善。
3.3 色谱条件的优化 参考文献
本课题组分别比较了乙腈-乙酸铵溶液和乙腈- [ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S]. 2015年
KH2PO4溶液等两种流动相体系,发现后者的分离效果 版.北京:中国医药科技出版社,2015:44.
更优。进一步对 KH2PO4 溶液的浓度(0.01、0.02、0.05 [ 2 ] 王鑫.广金钱草中黄酮类化合物定性分析及其抗大鼠肾
mol/L)进行筛选后发现,以 0.05 mol/L KH2PO4溶液(用 草酸钙结石作用的研究[D].石家庄:河北医科大学,
氢氧化钠调节 pH 至 6.8)作为有机相时,各待测物色谱 2018.
峰峰形的对称性良好。此外,本课题组还考察了各单糖 [ 3 ] MI J,DUAN JM,ZHANG J,et al. Evaluation of antiuro-
在 YMC-Pack ODS-AQ、Inertsil ODS-3、Phenomenex Lu- lithic effect and the possible mechanisms of Desmodium
na C18等色谱柱上的分离效果,最终确定了本文中的色 styracifolium and Pyrrosiae petiolosa in rats[J]. Urol Res,
谱条件。 2012,40(2):151-161.
3.4 指纹图谱的结果分析 [ 4 ] 李冠烈,汤少娴,饶智华,等.广金钱草总黄酮对大鼠离体
本研究建立了 18 批广金钱草药材多糖的 HPLC 指 心脏缺血再灌注损伤的分子保护作用研究[J].生物化
工,2018,4(3):97-101.
纹图谱,确定了9个共有峰,并指认了其中7个。18批样
[ 5 ] ZHOU C,LUO JG,KONG LY. Quality evaluation of Des-
品中有 15 批的相似度超过 0.9,表明广金钱草多糖具有
modium styracifolium using high-performance liquid chro-
较好的稳定性,可作为药材质量控制的指标之一。
matography with photodiode array detection and electro-
3.5 单糖定量分析结果分析
spray ionization tandem mass spectrometry[J]. Phytochem
本课题组在 18 批广金钱草药材多糖中共检测了 5
Anal,2012,23(3):240-247.
种单糖成分的含量,分别为鼠李糖 0.471~2.092 mg/g,
[ 6 ] 苏畅,李小江,贾英杰,等.香菇多糖的抗肿瘤作用机制研
半乳糖醛酸 1.379~8.919 mg/g,葡萄糖 2.560~35.679 究进展[J].中草药,2019,50(6):1499-1504.
mg/g,半 乳 糖 1.194~6.905 mg/g,阿 拉 伯 糖 0.566~ [ 7 ] 李海春. 8种石斛多糖抗氧化、抗衰老活性的比较研究[D].
4.158 mg/g;以鼠李糖为基准,半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳 广州:华南农业大学,2016.
糖、阿拉伯糖的摩尔比分别为 1.58~4.07、2.26~19.95、 [ 8 ] 王娅,闫丽娜,孙甜甜,等.何首乌多糖的结构表征及其免
2.20~4.21、1.31~2.86。结果表明,不同产地广金钱草 疫调节活性研究[J].中草药,2019,50(10):2290-2295.
的多糖组成均以葡萄糖为主,鼠李糖的含量最低,且各 [ 9 ] 杨夏,冯颖淑,童珊珊,等.降血脂多糖活性机制及构效关
单糖含量存在差异,可能与产地的土壤、气候等环境因 系研究进展[J].中国中药杂志,2018,43(20):4011-4018.
素有关。 [10] 陈思.茶枝柑多糖提取、分离纯化、结构及抗氧化活性研
3.6 α-葡萄糖苷酶抑制活性的结果分析 究[D].广州:广东药科大学,2011.
PNPG 经α-葡萄糖苷酶催化可生成对硝基苯酚 [11] 阿卜杜热合曼·努如拉,阿米乃木·买买提,艾再提·克热
(PNP),PNP 在 400 nm 左右波长处有最大紫外吸收,测 木,等.榅桲子不同提取部位对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
定此波长下 PNP 的 OD 值,可用以计算抑制剂对α-葡萄 及其降血糖作用[J].食品安全质量检测学报,2018,9
[13]
糖苷酶的抑制率 。基于此,本研究以PNPG为底物、以 (15):4018-4023.
阿卡波糖为阳性对照,初步评价了广金钱草多糖对α-葡 [12] 王贵春,陈雪峰,刘宁,等.柱前衍生化高效液相色谱法分
萄糖苷酶的抑制作用。结果发现,广金钱草多糖对α-葡 析发菜胞外多糖的单糖组成[J].食品工业科技,2015,36
(10):59-61.
萄糖苷酶具有明显的体外抑制作用,且活性强于阳性对
[13] 朱海雯.藏药绿萝花的化学成分和α-葡萄糖苷酶抑制活
照阿卡波糖,可为后续其降血糖作用研究提供依据。
性研究[D].重庆:重庆大学,2015.
4 结语
(收稿日期:2019-05-24 修回日期:2019-10-18)
本研究采用PMP柱前衍生化-HPLC法分析了18批
(编辑:张元媛)
广金钱草药材多糖中的单糖组分,并建立了广金钱草多
中国药房 2020年第31卷第2期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2 ·189 ·