Page 55 - 2020年1月第31卷第2期

葡萄糖、2，4，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖的定量限分 份，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.4.1”项
别为 0.060、0.104、0.017、0.029、0.057 μg/mL，检测限分 下色谱条件进样测定并按标准曲线法计算样品中5种成
别为0.018、0.031、0.005、0.009、0.017 μg/mL。 分的含量。结果，没食子酸、（－）-表没食子儿茶素、没
0.80
1 食子酸甲酯、2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖、2，4，6-
0.60
AU 0.40 三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖的平均含量分别为40.75％、
0.20
0 2 3 7 9 23.21％、0.61％、1.75％、2.76％，RSD 分别为 1.22％、
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
t，min 0.06％、1.73％、1.35％、0.92％（n＝6），表明该方法重复
A.混合对照品溶液 性良好。
0.80
1
0.60 2.4.9 加样回收率试验 取百药煎样品（编号：B1）共6
AU 0.40
0.20 份，每份约 0.1 g，精密称定，分别加入一定量的没食子
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 酸、（－）-表没食子儿茶素、没食子酸甲酯、2，4，6-三-O-
t，min
B.供试品溶液（编号：B1） 没食子酰-α-D-葡萄糖、2，4，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄
0.80 糖对照品，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，再按
0.60
AU 0.40 “2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样
0.20
0 回收率，结果见表6。
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
t，min 表6 加样回收率试验结果（n＝6）
C.阴性对照溶液
Tab 6 Results of recovery tests（n＝6）
注：1.没食子酸；2.（－）-表没食子儿茶素；3.没食子酸甲酯；7.2，4，
6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖；9.2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖 待测成分 取样量， 样品含量， 加入量， 测得量， 加样回收 平均加样 RSD，
Note：1. gallic acid；2.（－）-epigallocatechin；3.methyl gallate；7. g mg mg mg 率，％ 回收率，％ ％
没食子酸 0.100 2 40.720 40.720 81.468 100.07 99.34 1.60
2，4，6-tri-O-galloyl-β-D-glucose；9. 2，4，6-tri-O-galloyl-α-D-glucose
0.100 4 40.731 40.720 80.930 98.72
图4 含量测定高效液相色谱图 0.100 2 40.730 40.720 80.293 97.16
Fig 4 HPLC chromatograms of content determination 0.100 6 40.793 40.720 82.278 101.88
0.100 5 40.762 40.720 81.311 99.58
表5 回归方程与线性范围 0.100 4 40.751 40.720 80.921 98.65
Tab 5 Regression equations and linear ranges （－）-表没食子儿茶素 0.100 2 23.174 23.207 45.680 96.98 98.34 0.85
0.100 4 23.220 23.207 46.179 98.93
待测成分 回归方程 线性范围，μg/mL r 0.100 2 23.188 23.207 46.128 98.85
7
没食子酸 y＝5.187×10 x+4.654×10 5 29.96～599.2 0.999 6
6
（－）-表没食子儿茶素 y＝3.550×10 x+4.211×10 3 0.832～416 0.999 6 0.100 6 23.237 23.207 46.016 98.16
没食子酸甲酯 y＝7.683×10 x－1.302×10 3 0.102～51 0.999 8 0.100 5 23.233 23.207 45.953 97.90
7
0.100 4 23.211 23.207 46.241 99.24
2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖 y＝3.775×10 x+5.407×10 3 0.286 4～143.2 0.999 8
7
7
2，4，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖 y＝1.089×10 x－7.160×10 2 0.286 4～143.2 0.999 8 没食子酸甲酯 0.100 2 0.602 0.610 1.222 101.64 99.62 1.54
0.100 4 0.602 0.610 1.198 97.70
2.4.6 精密度试验 取“2.4.2”项下混合对照品溶液适 0.100 2 0.602 0.610 1.208 99.34
0.100 6 0.602 0.610 1.218 100.98
量，按“2.4.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面
0.100 5 0.602 0.610 1.211 99.84
积。结果，没食子酸、（－）-表没食子儿茶素、没食子酸 0.100 4 0.602 0.610 1.201 98.20
甲酯、2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖、2，4，6-三-O-没 2，4，6-三-O-没食子 0.100 2 1.747 1.751 3.459 97.77 99.83 1.82
酰-α-D-葡萄糖 0.100 4 1.750 1.751 3.507 100.34
食 子 酰 -β-D- 葡 萄 糖 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1.07％ 、 0.100 2 1.748 1.751 3.553 103.08
0.82％、0.34％、1.24％、1.69％（n＝6），表明仪器精密度 0.100 6 1.753 1.751 3.500 99.77
良好。 0.100 5 1.751 1.751 3.485 99.03
0.100 4 1.751 1.751 3.484 98.97
2.4.7 稳定性试验 取“2.4.2”项下供试品溶液（编号： 2，4，6-三-O-没食子 0.100 2 2.766 2.766 5.556 100.87 100.25 1.24
B1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按 酰-β-D-葡萄糖 0.100 4 2.766 2.766 5.481 98.16
0.100 2 2.766 2.766 5.544 100.43
“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，没
0.100 6 2.767 2.766 5.544 100.40
食子酸、（－）-表没食子儿茶素、没食子酸甲酯、2，4，6- 0.100 5 2.767 2.766 5.585 101.88
三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖、2，4，6-三-O-没食子酰-β-D- 0.100 4 2.766 2.766 5.526 99.78
葡萄糖峰面积的 RSD 分别为 1.50％、0.57％、1.07％、 2.4.10 耐用性试验 取百药煎样品（编号：B1）适量，按
1.97％、1.68％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 “2.4.2”项下方法制备供试品溶液，再参照“2.4.1”项下色
24 h内稳定性良好。 谱条件，以不同流动相（B）浓度（0.08％、0.1％、0.12％）、
2.4.8 重复性试验 取百药煎样品（编号：B1）适量，共6 不 同 流 速（0.7、0.8、0.9 mL/min）、不 同 柱 温（25、30、

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