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为参照峰。以1号峰保留时间和峰面积为参照，计算其 B2～B5、B7～B9聚为一类。
他峰的相对保留时间和相对峰面积，结果详见表3、表4。 表4 9批样品HPLC图谱共有峰的相对峰面积
1（S） Tab 4 Relative peak area of common peaks in HPLC
900
chromatograms of 9 batches of samples
800
峰号 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9
700
1 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
600 2 0.038 0.035 0.049 0.024 0.032 0.041 0.036 0.038 0.037
mV 500 3 0.021 0.001 0.001 0.012 0.002 0.001 0.001 0.007 0.014
U， 400 4 0.027 0.017 0.021 0.013 0.014 0.012 0.015 0.019 0.018
2 3 4 8 9 5 0.005 0.001 0.000 0.003 0.001 0.000 0.000 0.001 0.001
300 5 67 10 11
S 参 6 0.015 0.002 0.001 0.008 0.001 0.001 0.001 0.003 0.003
B9
200 B8
B7 7 0.014 0.036 0.033 0.043 0.034 0.006 0.031 0.041 0.040
B6
100 B5 8 0.017 0.016 0.007 0.027 0.014 0.001 0.011 0.024 0.021
B4
B3
0 B2 9 0.031 0.088 0.087 0.106 0.085 0.015 0.079 0.112 0.111
B1
10 0.007 0.004 0.004 0.006 0.005 0.001 0.003 0.004 0.004
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88
t，min 11 0.012 0.004 0.000 0.015 0.002 0.001 0.001 0.011 0.013
A. 9批样品溶液（叠加图谱）
A3
800 1 A4
700 A5
600 A1
A2
500 B2
mV 400 B5
U， B7
300 B8
200 B9
100 9 B4
2 3 7 B3
0 B1
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 B6
t，min 0 5 10 15 20 25
B.混合对照品溶液 图3 聚类分析树状图
注：1.没食子酸；2.（－）-表没食子儿茶素；3.没食子酸甲酯；7.2，4，
Fig 3 Dendrogram of cluster analysis
6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖；9.2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖
Note：1. gallic acid；2.（－）-epigallocatechin；3.methyl gallate；7. 2.4 百药煎中5种有效成分的含量测定
2，4，6-tri-O-galloyl-β-D-glucose；9. 2，4，6-tri-O-galloyl-α-D-glucose 2.4.1 色谱条件 同“2.2.1”项下色谱条件。
图2 高效液相色谱图 2.4.2 溶液的制备 按“2.2.2”项下方法制备供试品溶
Fig 2 HPLC chromatograms
液，即得；按“2.2.3”项下方法制备混合对照品溶液，即
表3 9批样品HPLC图谱共有峰的相对保留时间 得；以甲醇为阴性对照溶液。
Tab 3 Relative retention time of common peaks in 2.4.3 系统适用性试验 取“2.4.2”项下混合对照品溶
HPLC chromatograms of 9 batches of samples 液、供试品溶液和阴性对照溶液各适量，按“2.2.1”项下
峰号 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 色谱条件进样测定，记录色谱，详见图4。由图4可知，5
1 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
2 2.291 2.293 2.290 2.291 2.300 2.291 2.290 2.298 2.286 种成分峰的分离度均大于 1.5，理论板数均大于 10 000，
3 2.494 2.493 2.494 2.494 2.500 2.495 2.492 2.494 2.494 阴性对照对测定无干扰。
4 2.716 2.721 2.718 2.718 2.731 2.722 2.719 2.726 2.710 2.4.4 线性关系考察 取“2.4.2”项下混合对照品溶液
5 3.348 3.350 3.336 3.349 3.357 3.348 3.342 3.355 3.329
6 4.357 4.371 4.364 4.363 4.369 4.362 4.354 4.364 4.352 1 mL，分别置于 1、2、5、10 mL 量瓶中加甲醇稀释至刻
7 4.618 4.633 4.631 4.623 4.629 4.626 4.614 4.623 4.615 度，摇匀；另精密量取稀释 10 倍的混合对照品溶液 1
8 5.997 6.009 6.005 5.998 6.004 6.009 5.998 6.002 6.008 mL，分别置于 2、5、10、25、50 mL 量瓶中，加甲醇稀释至
9 6.430 6.431 6.428 6.424 6.429 6.439 6.422 6.425 6.433
10 6.812 6.860 6.859 6.856 6.866 6.870 6.854 6.854 6.889 刻度，摇匀，得系列线性工作溶液。分别精密吸取上述
11 8.541 8.539 8.535 8.535 8.555 8.543 8.526 8.536 8.575 线性工作溶液各 20 μL，按“2.4.1”项下色谱条件进样测
2.3 14批百药煎样品的聚类分析 定，记录峰面积。以各待测成分质量浓度（x，μg/mL）为横
以各共有峰的峰面积为原始数据（由于样品 A1～ 坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，结果见表5。
A5在共有峰的出峰时间下未检测到峰面积，故以0为原 2.4.5 定量限与检测限考察 分别精密吸取“2.4.2”项
始数据），采用SPSS 20.0软件，以组间平均数联结法，夹 下混合对照品溶液适量，加甲醇倍比稀释，按“2.4.1”项
角余弦为样品相似度的距离公式对14批样品（A1～A5， 下色谱条件进样测定，记录峰面积，以信噪比10 ∶ 1、3 ∶ 1
B1～B9）进行聚类分析，详见图3。由图3可知，14批样 分别计算定量限、检测限。结果，没食子酸、（－）-表没
品可聚为 3 类，A1～A5 聚为一类；B1、B6 聚为一类； 食子儿茶素、没食子酸甲酯、2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-
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