Page 53 - 2020年1月第31卷第2期
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百药煎样品（编号同对应的酒糟编号A1～A5、B1～B9，
        过四号筛）0.2 g，置于 100 mL 锥形瓶中，加甲醇 50 mL，                 900
        静置2 h，超声（功率：300 W，频率：60 kHz）提取40 min，                800
        放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，经                            700
        0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。                               600
        2.2.3  混合对照品溶液的制备              分别取没食子酸、             mV  500
                                                                                                        B9
       （－）-表没食子儿茶素、没食子酸甲酯、2，4，6-三-O-没食                      信号，  400                                    S 参
                                                                                                        B8
                                                                                                        B7
        子酰-α-D-葡萄糖、2，4，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖对                   300                                        B6
                                                                                                        B5
                                                                                                        B4
        照品各适量，精密称定，加甲醇溶解，制得含上述5种成                            200                                        B3
                                                                                                        B2
                                                                                                        B1
                                                                                                        S 五倍子
        分质量浓度分别为 599.2、416.0、51.0、143.2、143.2 mg/L           100                                        A5
                                                                                                        A4
                                                                                                        A3
        的混合对照品溶液。                                              0                                        A2
                                                                                                        A1
        2.2.4  精密度试验      取“2.2.2”项下供试品溶液（编号：                    0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88
                                                                                   t，min
        B1）适量，按“2.2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以                     图1 14批百药煎样品和五倍子药材的HPLC叠加指纹
        没食子酸峰的保留时间和峰面积为参照，记录各共有峰                                 图谱及参照指纹图谱
        的相对保留时间和相对峰面积。结果，11个共有峰相对                          Fig 1 HPLC superposed fingerprints and reference
        峰面积的 RSD 均小于 3.73％（n＝6），相对保留时间的                           fingerprints of 14 batches of samples and Rhus
        RSD均小于0.28％（n＝6），表明该方法精密度良好。                              chinensis
        2.2.5  稳定性试验      取“2.2.2”项下供试品溶液（编号：              价，结果见表 2。由表 2 可见，14 批样品（A1～A5、B1～
        B1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按                  B9）与 S 参的相似度分别为 0.424、0.478、0.458、0.469、
       “2.2.1”项下色谱条件进样测定，以没食子酸峰的保留时                        0.362、0.995、0.993、0.993、0.992、0.994、0.998、0.994、
        间和峰面积为参照，记录各共有峰的相对保留时间和相                           0.991、0.983；样品间相似度差异较大，样品 A1～A5 相
        对峰面积。结果，11 个共有峰相对峰面积的 RSD 均小                       似度＜0.850，提示A1～A5样品可能未发酵成功。进一
        于 3.92％（n＝6），相对保留时间的 RSD 均小于 0.23％                 步以S 五倍子为对照，对样品 A1～A5 进行相似度评价，结
       （n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳定性                       果样品 A1～A5 与 S 五倍子的相似度分别为 0.686、0.776、
        良好。                                                0.915、0.873、0.877，提示样品A1～A5未发酵成功，故稻
        2.2.6  重复性试验      取百药煎样品（编号：B1）适量，共6               壳类酒糟不适用于发酵百药煎。
        份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项                                  表2   相似度评价结果
        下色谱条件进样测定，以没食子酸峰的保留时间和峰面                                   Tab 2  Results of similarity evaluation
        积为参照，记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面                            项目          编号     相似度   项目        编号     相似度
                                                           以S 参为对照     A1     0.424  以S 参为对照   B6     0.998
        积。结果，11个共有峰相对峰面积的RSD均小于3.80％
                                                                       A2     0.478            B7     0.994
       （n＝6），相对保留时间的 RSD 均小于 0.15％（n＝6），表                              A3     0.458            B8     0.991
        明本方法重复性良好。                                                     A4     0.469            B9     0.983
                                                                       A5     0.362  以S 五倍子为对照  A1    0.686
        2.2.7 HPLC 指纹图谱的生成          取五倍子药材及 17 批                       B1     0.995            A2     0.776
        百 药 煎 样 品（A1～A5、B1～B9、S1～S3）各 适 量 ，按                           B2     0.993            A3     0.915
       “2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱                                B3     0.993            A4     0.873
                                                                       B4     0.992            A5     0.877
        条件进样测定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系                                       B5     0.994
        统》（2012版）对样品指纹图谱进行分析。由于百药煎市                        2.2.9  共有峰的指认        由于 A1～A5 样品未发酵成功，
        售样品S1～S3图谱提取吸收信号较强、峰形明显、稳定                         故仅对样品B1～B9进行共有峰指认。结果，样品B1～
        性较好，故以其共有峰生成标准图谱，并作为参照图谱                           B9 共有 11 个共有峰，通过与混合对照品溶液的 HPLC
       （S 参 ）进行对比。结果发现，各批样品色谱峰之间存在一                        图谱对比，共指认出 5 个成分，分别为 1 号峰（没食子
        定差异，样品A1～A5与五倍子药材图谱（S 五倍子 ）较为相                     酸）、2号峰[（－）-表没食子儿茶素]、3号峰（没食子酸甲
        似，样品B1～B9与S 参差异较小，推测样品A1～A5可能                      酯）、7 号峰（2，4，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖）、9 号峰
        未成功发酵为百药煎，详见图1。                                    （2，4，6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖），详见图 2。由图 2
        2.2.8  相似度评价      采用《中药色谱指纹图谱相似度评                  可知，1号峰（没食子酸峰）在图谱中所占的比例较大，与
        价系统》（2012 版），以 S 参为对照，进行整体相似度评                     相邻色谱峰的分离度良好，符合参考峰要求，因此以其


        中国药房    2020年第31卷第2期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2  ·175  ·
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