Page 35 - 2020年1月第31卷第2期

液适量，以甲醇逐级稀释，按“2.3.2”项下色谱条件进样 0.012 1
0.010
测定，分别以信噪比 3 ∶ 1、10 ∶ 1 计算检测限和定量限。 0.008 2
AU 0.006
结果，橙皮苷的检测限和定量限分别为2.0、7.0 ng。 0.004
0.002
2.3.9 稳定性试验 取同一供试品溶液（编号：Y3）适 0
0 5 10 15 20 25 30 35
量，分别在室温下放置0、2、4、6、10、12 h时，按“2.3.2”项 t，min
下色谱条件进样测定。结果，橙皮苷峰面积 RSD 为 A.混合对照品溶液
2.3％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置12 h内稳定 0.20
0.10
性良好。
AU 1 2
2.3.10 色谱柱耐用性试验 取同一供试品溶液（编号： 0
X1）适量，参照“2.3.2”项下色谱条件，分别使用3种不同 －0.10
0 5 10 15 20 25 30 35
品牌的色谱柱，即Phenomenex Luna（250 mm×4.6 mm，5 t，min
B.供试品溶液
μm）、YMC-Pack ODS-A（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Kro-
masil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）进样测定并计算橙皮 0.20
AU
苷含量。结果，橙皮苷含量的RSD为0.5％（n＝3），表明 0
本方法中色谱柱耐用性良好。
0 5 10 15 20 25 30 35
2.3.11 样品含量测定 取各批次样品各 0.1 g，精密称 t，min
定，按“2.3.1”项下供试品溶液制备法处理，再按“2.3.2” C.阴性对照溶液
注：1.和厚朴酚；2.厚朴酚
项下色谱条件进样测定并计算橙皮苷含量，平行操作 2
Note：1. honokiol；2. magnolol
次，取平均值，结果见表3。 图5 厚朴酚、和厚朴酚的高效液相色谱图
表3 橙皮苷含量测定结果（n＝2） Fig 5 HPLC chromatograms of magnolol and honokiol
Tab 3 Results of content determination of hesperidin
2.4.4 线性关系考察 取厚朴酚、和厚朴酚对照品各适
（n＝2）
量，加甲醇制成每 1 mL 含厚朴酚 35.74 μg、和厚朴酚
样品编号 橙皮苷含量，mg/g 样品编号 橙皮苷含量，mg/g 28.24 μg 的混合对照品母液；精密吸取上述混合对照品
X1 27.7 Y3 30.2
X2 18.0 Y4 45.6 母液 1、2、3、4、5、6、7、8、10 mL置于 10 mL量瓶中，以甲
X3 18.8 Y5 35.1 醇稀释定容，即得系列线性对照品溶液。分别吸取上述
Y1 33.4 Y6 37.6
Y2 49.7 系列对照品溶液各适量，按“2.4.2”项下色谱条件进样测
定。分别以厚朴酚、和厚朴酚峰面积（X）为横坐标、两者
2.4 厚朴酚、和厚朴酚含量测定
2.4.1 溶液制备 取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品各 对应的进样量（Y，μg）为纵坐标进行线性回归，得厚朴酚
4
4
适量，加甲醇制成每 1 mL 分别含厚朴酚 60 μg、和厚朴 回归方程为 Y＝1.22×10 X－9.91×10（r＝0.999 9），和厚
4
4
酚40 μg的溶液，即得2种成分的混合对照品溶液。取本 朴酚回归方程为 Y＝1.68×10 X－1.04×10（r＝0.999 9）。
品适量，研细，取约2 g置于索氏提取器中，精密称定，加 结果表明，厚朴酚、和厚朴酚进样量分别在 0.035 7～
甲醇适量，水浴加热回流提取3 h，提取液以水浴挥去溶 0.357 4 μg、0.028 2～0.282 4 μg范围内线性关系良好。
剂浓缩后，转移至25 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇 2.4.5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液（编号：
匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方比例称取 Y4）10 μL，按“2.4.2”项下色谱条件连续进样 6 次。结
相应量的缺姜厚朴阴性样品，按供试品溶液制备方法处 果，厚朴酚、和厚朴酚峰面积 RSD 分别为 1.4％、1.0％
理，即得阴性对照溶液。 （n＝6），表明仪器精密度良好。
2.4.2 色谱条件 色谱柱：Phenomenex Luna C18柱（250 2.4.6 重复性试验 取同一批样品（编号：Y4）共 6 份，
mm×4.6 mm，5 μm）；柱温：30 ℃；流动相：乙腈-1％冰醋 每份2 g，按照“2.4.1”项下方法制备供试品溶液，并按照
酸（52∶48，V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：294 nm。 “2.4.2”项下色谱条件分别进样测定，以外标法计算厚朴
2.4.3 系统适用性及专属性试验 取“2.4.1”项下混合 酚、和厚朴酚的含量。结果，厚朴酚、和厚朴酚的平均含
对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各适量，按 量分别为 0.46、0.33 mg/g，RSD 分别为 2.0％、2.0％（n＝
“2.4.2”项下色谱条件进样测定。结果显示，各色谱峰 6），表明方法重复性良好。
分离良好，理论板数按厚朴酚或和厚朴酚计均不低于 2.4.7 加样回收率试验 取已知厚朴酚、和厚朴酚含量
2 000，阴性对照溶液在混合对照品色谱峰相应的位置上 的样品（编号：Y4）共 6 份，每份约 1 g，置于索氏提取器
无干扰色谱峰，表明本方法系统适用性及专属性均良 中，精密称定，分别精密加入每1 mL含厚朴酚17.868 μg、
好。色谱图见图5。 和厚朴酚14.120 μg的混合对照品溶液（按“2.4.1”项下方

中国药房 2020年第31卷第2期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2 ·157 ·