Page 34 - 2020年1月第31卷第2期

为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸试液，于 1
0.040
105 ℃下加热至斑点显色清晰，置于日光下检视。结果 0.030
显示，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，样品 AU 0.020
0.010
色谱显相同颜色的斑点，且阴性样品无干扰，详见图3。
0
0 5 10 15 20 25 30
t，min
A.对照品溶液
1
0.040
AU 0.020
0
0 5 10 15 20 25 30
t，min
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 B.供试品溶液
注：1.缺苍术（土炒）阴性样品；2.苍术对照药材；3.苍术素对照品； 0.015
4～12.样品（批号：081203、090601、090901、071003、080101、080302、 0.010
100301、100802、110401） AU
0.005
Note：1.negative sample without Atractylodes Lancea （stir-fried
with earth）；2. Atractylodes Lancea reference medicinal material；3. atrac- 0
tylodin control；4-12. samples（batch number：081203，090601，090901， 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
t，min
071003，080101，080302，100301，100802，110401） C.阴性对照溶液
图3 苍术（土炒）TLC鉴别色谱图 注：1.橙皮苷
Fig 3 TLC chromatogram for identification of Atrac- Note：1. hesperidin
tylodes Lancea（stir-fried with earth） 图4 橙皮苷的高效液相色谱图
Fig 4 HPLC chromatograms of hesperidin
2.3 橙皮苷含量测定
2.3.1 溶液制备 取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每 2.3.5 精密度试验 精密吸取同一份供试品溶液（编
1 mL 含 60 μg 的溶液，即得对照品溶液。取本品适量， 号：X1）适量，按“2.3.2”项下色谱条件连续进样6次。结
研细，取约0.1 g置于锥形瓶中，精密称定，精密加入甲醇 果，橙皮苷峰面积RSD为0.1％（n＝6），表明仪器精密度
50 mL，称定质量，水浴加热回流 1 h，放冷，再次称定质 良好。
量，加甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得 2.3.6 重复性试验 取同一批样品（编号：Y3）共 6 份，
供试品溶液。按处方比例称取相应量的缺陈皮、醋青 每份 0.1 g，按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，再按
皮、麸炒枳壳的阴性样品，按供试品溶液制备方法处理， “2.3.2”项下色谱条件分别进样测定，以外标法计算橙皮
即得阴性对照溶液。 苷含量。结果，橙皮苷平均含量为 30.2 mg/g，RSD 为
2.3.2 色谱条件 色谱柱：Phenomenex Luna C18柱（250 1.2％（n＝6），表明方法重复性良好。
mm×4.6 mm，5 μm）；柱温：30 ℃；流动相：甲醇-水（40∶60， 2.3.7 加样回收试验 取已知橙皮苷含量的样品（编
V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：284 nm。 号：Y3）共 6 份，每份约 0.05 g，分别置于锥形瓶中，精密
2.3.3 系统适用性及专属性试验 取“2.3.1”项下对照
称定，分别精密加入每 1 mL 含橙皮苷 177.02 μg 的对照
品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各适量，按“2.3.2”
品溶液（按“2.3.1”项下方法重新配制）10 mL、甲醇 40
项下色谱条件进样测定。结果显示，各色谱峰分离良
mL，按“2.3.1”项下供试品溶液制备法处理，然后按照
好，理论板数按橙皮苷峰计不低于2 000，阴性对照溶液
“2.3.2”项下色谱条件进样测定并计算加样回收率，结果
在橙皮苷对照品色谱峰相应的位置上无干扰色谱峰，表
见表2。
明本方法系统适用性及专属性均良好。色谱图见图4。
表2 橙皮苷加样回收率试验结果
2.3.4 线性关系考察 取橙皮苷对照品适量，加甲醇制
Tab 2 Results of recovery tests of hesperidin
成每1 mL含橙皮苷201.8 μg的对照品母液；分别精密吸
取样量， 样品中橙皮苷含量， 加入橙皮苷量， 总测得量， 加样回收率，平均加样回收率，RSD，
取该母液 1、2、3、4、5、6、7.5、10 mL 置于 10 mL 量瓶中， g mg mg mg ％ ％ ％
以甲醇稀释定容，即得系列线性对照品溶液。分别取上 0.050 9 1.538 1.770 3.297 99.38
述线性对照品溶液各适量，按“2.3.2”项下色谱条件进样 0.048 3 1.459 1.770 3.202 98.47
0.047 3 1.429 1.770 3.200 100.06
测定。以橙皮苷峰面积（X）为横坐标、进样量（Y，μg）为 99.92 2.2
0.048 9 1.477 1.770 3.219 98.42
纵坐标进行线性回归，得橙皮苷回归方程为 Y＝1.93× 0.056 3 1.701 1.770 3.451 98.87
10 X－9.72×10（r＝0.999 9）。结果表明，橙皮苷进样量 0.047 3 1.429 1.770 3.275 104.29
4
6
在0.201 8～2.018 μg范围内线性关系良好。 2.3.8 检测限与定量限考察 取“2.3.1”项下对照品溶

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