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氮酮用量分别为0.26、0.28、0.30、0.32 mL。 膜剂基质，加生理盐水适量稀释后备用；取体外经皮渗
根据上述不同因素水平和“2.1.1”项下方法分别制 透试验 3 h 时的接收液冻干样品，加适量生理盐水溶解
备涂膜剂基质（处方中不足部分以水补足）。对所制备 后备用；取川芎嗪原料药，加适量空白皮肤匀浆液溶解
的涂膜剂基质样品采用“2.1.2”项下评分标准进行评 后备用；取川芎嗪原料药，加适量生理盐水溶解后备
价。结果显示，PVA-124、无水乙醇、甘油、吐温80、氮酮 用。取上述溶液各适量，按“2.2.1”项下色谱条件分别进
的用量分别为 2.5 g、7.0 mL、1.97 mL、0.07 mL、0.28 mL 样检测，记录色谱图。结果显示，各色谱峰分离良好，无
时，相应的基质综合评分最高，详见表2。 杂质峰干扰，表明涂膜剂基质和空白皮肤匀浆液对川芎
表2 单因素指标优化结果 嗪的含量测定无干扰，详见图1。
Tab 2 Optimization results of single factor indicators 0
基质评价指标 mAU －0.2
－0.4
因素 用量（以50 mL处方量计） Y －0.6
a b c d e
0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5
A 2.5 g 6 6 6 6 3 6.6 t，min
B 7.0 mL 6 3 10 6 6 7.1 A.空白皮肤匀浆溶液
C 1.97 mL 6 6 6 6 6 7.2 0.2
D 0.07 mL 10 6 10 3 6 8.6 mAU 0.1
E 0.28 mL 10 10 10 6 3 9.8 0
2.1.4 涂膜剂载药量的考察 在“2.1.3”项下优选的基 0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5
t，min
质处方基础上制备含不同载药量川芎嗪（300、250、200、 B.空白涂膜剂基质溶液
150、100、50 mg/mL）的涂膜剂，再按“2.1.2”项下的评分 600
标准优选川芎嗪涂膜剂的载药量。结果显示，当载药量 mAU 400
200
0
≤100 mg/mL 时，所制备的川芎嗪涂膜剂体系分散均 0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5
匀，成膜完整连续，易于涂布，成膜时间在5 min以内，且 t，min
C.经皮渗透试验3 h时的接收液冻干样品溶液
不会出现药物析出等现象，故将100 mg/mL设定为该涂 600
膜剂的最大载药量。 mAU 400
200
0
2.1.5 川芎嗪涂膜剂的制备 按基质处方工艺和载药 0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5
t，min
量考察结果，称取 PVA-124 5.0 g，加入水 80 mL 密封浸 D.川芎嗪原料药+空白皮肤匀浆液混合溶液
润 24 h 后，于 90 ℃水浴下溶胀至凝胶状，取出放凉；边 400
搅拌边向PVA-124凝胶溶液中加入川芎嗪10 g，再依次 mAU 200
0
缓慢加入无水乙醇溶液 14 mL、甘油 4 mL、吐温 80 0.15 0 2.5 5 7.5 10 12.5 15 17.5
mL、氮酮 0.55 mL，搅拌使之分散均匀，最后加水至 100 t，min
E.川芎嗪原料药溶液
mL，即得黏稠状的川芎嗪涂膜剂（载药量 100 mg/mL）。
图1 专属性试验HPLC色谱图
同法制备载药量为75、50 mg/mL的川芎嗪涂膜剂，用于 Fig 1 HPLC chromatogram of specificity test
后续试验。
2.2 川芎嗪含量测定方法的建立 2.2.4 精密度试验 取“2.1.5”项下制备的川芎嗪涂膜
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Symmetry-C18 （250 mm×4.6 剂（载药量 50 mg/mL），用生理盐水稀释制成低、中、高
mm，5 μm）；流动相：水（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0～20 质量浓度（6.25、25、100 μg/mL）的溶液，于同日内的3个
min，5％B→41％B）；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；检 不同时间点，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，每个浓
测波长：280 nm；进样量：5 μL。 度均重复测定 6 次。结果，川芎嗪峰面积 RSD 分别为
2.2.2 线性关系考察 精密称取川芎嗪对照品 10 mg， 0.49％、0.65％、0.42％（n＝6），表明该方法精密度良好。
加生理盐水溶解并定容至 50 mL，制得 200 μg/mL 的对 2.2.5 重复性试验 取体外经皮渗透试验中川芎嗪涂
照品母液。取上述对照品母液适量，以生理盐水稀释制 膜剂（载药量 50 mg/mL）在 90 min 时的取样液各适量，
成质量浓度分别为 100、50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL 共6份，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，并按标准曲线
的系列对照品溶液。取上述系列对照品溶液各适量，按 法计算含量。结果，取样液中川芎嗪含量为24.71 μg/mL，
“2.2.1”项下色谱条件分别进样检测，平行操作 3 次。以 RSD为1.12％（n＝6），表明该方法重复性良好。
峰面积为纵坐标（y）、质量浓度为横坐标（x）进行线性回 2.2.6 稳定性试验 精密吸取体外经皮渗透试验中川
归，得标准曲线y＝7.398 9x－2.286 2（r＝0.999 9）。结果 芎嗪涂膜剂（载药量50 mg/mL）在90 min时的接收液适
表明，川芎嗪质量浓度在3.125～100 μg/mL范围内线性 量，分别在室温下放置 0、4、8、12、16、24 h 时，按“2.2.1”
关系良好。 项下色谱条件进样测定，结果，川芎嗪峰面积 RSD 为
2.2.3 专属性试验 取未给药大鼠的背部皮肤，加生理 0.61％（n＝6）；另取上述样品接收液适量，于－80 ℃分
盐水适量研磨后制成空白皮肤匀浆液后备用；取空白涂 别冻融1、2、3、4、5、6次，同法进样测定，结果，川芎嗪峰

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