Page 30 - 2020年1月第31卷第2期

表2 参附益心方对缺氧原代心肌细胞中FAT/CD36及 缓心衰患者的疾病进展至关重要。
PPARα、PPARβ/δ蛋白表达的影响（x±±s，n＝3） 中医认为，心衰多因外感风寒、内伤饮食、情志失
Tab 2 Effects of Shenfu yixin decoction on the expres- 畅、温热疫毒日久导致气血亏虚、心脉失养而引起，病位
sion of FAT/CD36，PPARα and PPARβ/δ pro- 在心，涉及肺、脾、肾三脏，病机总属本虚标实、虚实夹
tein in primary hypoxic cardiomyocytes（x±±s， 杂，本虚为气虚、阳虚，标实为痰饮、血瘀、水停，治法宜
n＝3） 益气温阳、活血利水 。河南中医药大学孙建芝教授以
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组别 FAT/CD36 PPARα PPARβ/δ 此法立方，得参附益心方。方中以人参大补元气为君，
正常组 0.98±0.06 1.04±0.10 0.64±0.03 使气旺血行，水饮痰湿无以停聚；附子、桂枝为臣，温肾
模型组 0.71±0.03 ＊ 0.95±0.04 0.61±0.00
辅酶Q10组 0.53±0.02 # 0.69±0.02 # 0.54±0.03 阳、通心脉，使元阳充盛正气存内；丹参、赤芍、益母草活
参附益心方低剂量组 0.61±0.00 0.60±0.02 # 0.45±0.03 # 血化瘀利水，猪苓、泽泻、车前子利水渗湿，诸药配伍使
参附益心方高剂量组 0.37±0.02 # 0.40±0.04 # 0.32±0.04 # 瘀祛水行；葶苈子泻肺平喘、利水消肿，砂仁、大枣温补
＊
注：与正常组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
#
中焦，保护胃气，为佐使之药。全方补泻兼施，标本兼
#
＊
Note：vs. normal group， P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
[18]
治，扶正不滞邪，利水不伤阴 。
4 讨论
本研究选用缺氧细胞模型，模拟心衰时心肌细胞的
正常生理条件下，心脏运动所需的ATP约有60％～
缺氧状态，从ATP含量、脂肪酸利用相关因子FAT/CD36
80％来自于脂肪酸代谢，20％～40％来自于碳水化合物
以及 PPARα、PPARβ/δ蛋白表达等方面来探讨参附益心
（葡萄糖、乳酸、酮体）代谢；在消耗等量氧气的情况下，
方对缺氧原代心肌细胞脂肪酸利用的影响及可能机
脂肪酸代谢途径比碳水化合物（葡萄糖）代谢途径产生
制。结果显示，模型组细胞中 ATP 含量及 FAT/CD36 蛋
的ATP少 。可见，在心衰发生时，心肌细胞缺血缺氧能
[7]
白的表达均较正常组显著降低；PPARα、PPARβ/δ蛋白的
量生成不足，而抑制脂肪酸代谢、增加葡萄糖氧化供能
表达虽有降低，但差异无统计学意义。这提示心衰发生
将更有助于心肌获益。
时，心肌细胞的能量代谢底物发生了变化，由优先利用
ATP是心脏可直接利用的能量形式，对维持心肌细
脂肪酸转变为优先利用葡萄糖 ，脂肪酸氧化率降低，产
[7]
胞正常代谢和功能具有重要意义；若 ATP 生产不足，将
能总体减少。与模型组比较，辅酶 Q10组和参附益心方
导致心肌收缩和舒张功能减弱 。辅酶 Q10是线粒体氧
[8]
高剂量组细胞中 ATP 含量均显著升高，辅酶 Q10组细胞
化磷酸化的辅酶之一，对线粒体氧化磷酸化和细胞ATP
中FAT/CD36、PPARα蛋白，参附益心方高剂量组细胞中
的形成具有重要作用；同时，其可增加心输出量，降低外
FAT/CD36 蛋白以及参附益心方各剂量组细胞中 PPAR
[9]
周阻力，是治疗心衰的常用药物 。因此，本研究选择辅
α、PPARβ/δ蛋白的相对表达量均显著降低。这提示参附
酶Q10作为阳性对照。
益心方可进一步抑制缺氧条件下原代心肌细胞的脂肪
FAT/CD36 作为脂肪酸转位酶，存在于细胞内和细
酸利用，改善其能量供应。
胞膜上，参与脂肪酸的跨膜转运，并影响机体对脂肪酸
综上所述，参附益心方可通过抑制 FAT/CD36 及
[10]
的利用 。有研究证实，FAT/CD36 编码基因缺失大鼠
PPARα、PPARβ/δ蛋白的表达来抑制缺氧原代心肌细胞
[11]
的脂肪酸摄取率明显降低，而葡萄糖利用度明显升高 。
的脂肪酸利用，改善其能量代谢，延缓心衰过程。由于
由此可见，可通过抑制心衰模型大鼠 FAT/CD36 蛋白的
本研究的缺氧时间设定为6 h，处于缺氧早期，而参附益
表达来抑制心肌细胞对脂肪酸的利用。PPAR家族为过
心方对缺氧中晚期原代心肌细胞脂肪酸利用的抑制作
氧化氢酶增殖物激动受体，其生理功能主要涉及脂肪酸
用尚未可知，故本课题组后续将延长缺氧时间来检测
代谢、糖代谢、细胞增殖与分化等 。其中，PPARα为机
[12]
FAT/CD36 蛋白、PPARα、PPARβ/δ蛋白及其 mRNA 的表
体调控脂肪酸代谢的重要因子，可参与脂肪酸β氧化过
达，对上述结论进行验证；此外，参附益心方对脂肪酸利
程，活化的PPARα可提高肉毒碱棕榈酰转移酶1（CPT-1）
用其他相关因子的调控作用及机制，以及对葡萄糖利用
编码基因的表达，后者可促使脂肪酸通过线粒体内膜转
的调控作用尚未明确，仍有待进一步深入研究。
移至线粒体基质内，然后被机体代谢 。Morgan EE
[13]
参考文献
等 研究发现，心衰患者心肌组织脂肪酸氧化率下调与
[14]
[ 1 ] DOENST T，NGUYEN TD，ABEL ED. Cardiac metabo-
PPARα蛋白表达减少有关。PPARβ/δ可通过调控CPT-1、 lism in heart failure：implications beyond ATP produc-
过 氧 化 物 酶 体 增 殖 物 激 活 受 体 γ 辅 助 活 化 因 子 1 α
tion[J]. Circ Res，2013，113（6）：709-724.
（PGC-1α）等编码基因的表达，进一步调节脂肪酸β氧化 [ 2 ] 邹亚兴，吴文宇，罗莉，等.苓桂术甘汤对多柔比星所致心
[15]
过程，其反应强度与机体脂肪酸利用呈正比 。有研究 力衰竭大鼠的改善作用及其机制[J].中国中医基础医学
证实，心衰患者心肌PPARβ/δ蛋白表达下降，脂肪酸氧化 杂志，2018，24（7）：912-915、954.
[16]
将受到抑制，而葡萄糖有氧代谢则会增加 。由此可 [ 3 ] FRAGASSO G，PALLOSHI A，PUCETTI P，et al. A ran-
见，抑制PPARα、PPARβ/δ蛋白及其编码基因的表达对延 domized clinical trial of trimetazidine，a partial free fatty
·152 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2 中国药房 2020年第31卷第2期