Page 78 - 2019年11月第30卷第21期

中药钩藤为茜草科植物钩藤[Uncaria rhynchophyl- C18 （美国 Dikma Technologies 公司，250 mm×4.6 mm，5
la（Miq.）Miq. exHavil.]、大叶钩藤（Uncaria macrophyl- μm，柱号：2509215，）；Hypersil ODS C18 （大连依利特分
la Wall.）、毛钩藤（Uncaria hirsuta Havil.）、华钩藤[Un- 析仪器有限公司，柱号：2912645，250 mm ×4.6 mm，5
caria sinensis（Oliv.）Havil.]或无柄果钩藤（Uncaria ses- μm）；Agilent HC- C18 （美国Agilent Technologies公司，柱
silifructus Roxb.）的干燥带钩茎枝，多于秋、冬二季采收， 号：538639，250 mm×4.6 mm，5 μm）；MS105DU 十万分
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去叶，切段，晒干 。钩藤，原名“钓藤”，始载于《名医别 之一天平（瑞士Mettler tolerdo公司）；KQ-250DB数控超
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录》 ，主要用于肝风内动、惊痫抽搐、高热惊厥、感冒夹 声 波 清 洗 器（江 苏 省 昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司）；
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惊、小儿惊啼、妊娠子痫、头痛眩晕 。其主要化学成分 PHS-25 PH 计（上海霄盛仪器制造有限公司）；FY-1H 旋
有生物碱、三萜、木脂素、黄酮等成分 [3-4] ，尤以生物碱在 片式真空泵（浙江飞越机电有限公司）；103B 200 g高速
钩藤中含量较多 [5-7] ，其中钩藤碱（Rhynchophylline）含量 中药粉碎机（浙江省瑞安市永历制药机械有限公司）。
占总碱的 28％～50％，异钩藤碱（Isorhynchophylline）含 1.2 药品与试剂
量约占总碱的 15％，二者具有显著的降压、镇静、安眠、 试验用药材采收于江西省的安义、资溪、黎川、宁都
解痉等作用 [8-10] ，因此，笔者选择以钩藤碱和异钩藤碱作 4个县，每个县各采了2批，安义县批号：181205、181206，
为钩藤质量评价指标能较有效地控制其药材质量。 资 溪 县 批 号 ：181208、181209，黎 川 县 批 号 ：181211、
目前，在分析并测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含 181212，宁都县批号：181214、181215，上述各药材均为野
量时，主要采用高效液相色谱（HPLC）法和超高效液相 生，采收时间为2018年12月，经江西省中医药研究院虞
色谱（UPLC）法 [11-12] ，但由于二者结构中碱性氮原子与固 金宝研究员鉴定为钩藤；钩藤碱对照品（批号：B20453，
定相中未键合的酸性硅醇基易发生相互作用，使得该方 纯度：≥98％）、异钩藤碱对照品（批号：B21526，纯度：≥
法存在色谱峰的展宽拖尾、漂移、对称性和重现性差、分 98％）、C4mimCl（批号：S50839，纯度：≥97％），均购于上
离效能低、分析时间长等缺点 。为了解决这些问题， 海源叶生物科技有限公司；乙腈和甲醇均为色谱纯，磷
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一般会在流动相中加入三乙胺或醋酸铵等添加剂 [11-12] ， 酸、三乙胺、氢氧化钠、乙醇均为分析纯，水为娃哈哈纯
虽然峰形可以得到一定的改善，但可致色谱柱不可逆 净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。
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转的损害 。离子液体（Ionic liquids，ILs）是近年来发展 2 方法与结果
起来的一种由有机阳离子和无机阴离子组成的一种绿 2.1 色谱条件
色溶剂，已被广泛应用于现代医药化工领域 。已有报 色谱柱：Dikmatech Diamonsil Plus C18 （250 mm×
[15]
[16]
道 ，当离子液体作为钩藤中钩藤碱和异钩藤碱液相色 4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-缓冲液（0.1％磷酸+
谱分离的流动相添加剂时，能显著提高二者的分离效 3.0 mmol/L C4mimCl 或 3.0 mol/L 三乙胺）（B），pH 约为
果、缩短分析时间、抑制碱性分析物的拖尾，且对色谱柱 2.3；检测波长：245 nm；流速：1 mL/min；柱温：25 ℃；进
损伤也更小。本试验以咪唑类离子液体1-丁基 -3-甲基 样量：10 μL；梯度洗脱（0～15 min，8％→35％A；15～17
咪唑氯化盐（C4mimCl）为流动相添加剂，筛选其最优浓 min，35％→43％A；17～19 min，43％→44％A；19～30
度，采用HPLC法测定江西省不同产地钩藤药材中钩藤 min，44％→90％）。
碱和异钩藤碱的含量，为更快、更准确地控制钩藤药材 2.2 混合对照品溶液的制备
及其制剂的质量提供依据。 精密称取钩藤碱 12.16 mg 和异钩藤碱 9.92 mg，分
钩藤碱和异钩藤碱的化学结构式见图1。 别置于10 mL量瓶中，加乙醇溶解并定容，摇匀，得钩藤
碱对照品贮备液和异钩藤碱对照品贮备液。再精密吸
取钩藤碱对照品贮备液1 mL和异钩藤碱对照品贮备液
2 mL 置于 100 mL 量瓶中，加 60％甲醇稀释至刻度，摇
匀，制成每1 mL分别含钩藤碱12.16 μg、异钩藤碱19.84
μg的混合对照品溶液。
A.钩藤碱 B.异钩藤碱 2.3 供试品溶液的制备
图1 钩藤碱和异钩藤碱的化学结构式
分别取过 3 号筛的钩藤粉末约 0.5 g，精密称定，置
Fig 1 Chemical structures of rhynchophylline and iso-
于具塞锥形瓶中，精密加入60％甲醇50 mL，称定质量，
rhynchophylline
室温浸泡1 h；然后超声提取30 min（功率：250 W，频率：
1 材料 40 kHz），放冷，再称定质量，用 60％甲醇补足减失的质
1.1 仪器 量，摇匀，滤过，取续滤液，0.22 μm 微孔滤膜过滤，得供
Agilent 1260 HPLC 仪（美国 Agilent 公司）；Shimad- 试品溶液。
zu LC-20AT HPLC 仪（日本岛津公司）；Waters e26953 2.4 流动相添加剂的选择
HPLC 仪（美国 Waters 公司）；Dikmatech Diamonsil Plus 2.4.1 离子液体 C4mimCl 与三乙胺的比较 按照“2.1”

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