Page 54 - 2019年11月第30卷第21期
P. 54

1.0 mL/min;检测波长:322 nm;柱温:25 ℃;进样量:                      200 000
        10 μL。                                                   150 000
                                                                总数  100 000

                                                                 50 000
                                                                    0
                                                                       -140  -100  -60  -20  20  60  100
                                                                                  Zeta电位,mV
                                                                                   A. CSO-SA
                                                                 100 000
                                                                 80 000
                A. CSO-SA              B. PEG-CSO-SA             60 000
                                                                总数  40 000
                                                                 20 000
                                                                    0
                                                                       -140  -100  -60  -20  20  60  100
                                                                                  Zeta电位,mV
                                                                                  B. PEG-CSO-SA
                                                                 120 000
                                                                 100 000
                          C. FA-PEG-CSO-SA                       80 000
        图 3 CSO-SA、PEG-CSO-SA 和 FA-PEG-CSO-SA 的                 总数  60 000
                                                                 40 000
             透射电镜图(×80 000)                                      20 000
        Fig 3 TEM of CSO-SA,PEG-CSO-SA and FA-PEG-                  0  -140  -100  -60  -20  20  60  100
              CSO-SA(×80 000)                                                     Zeta电位,mV
                                                                                 C. FA-PEG-CSO-SA
              30
                                                           图 5   CSO-SA、PEG-CSO-SA、FA-PEG-CSO-SA 的 Ze-
             %  20                                               ta电位分布图
             数量占比,  10                                     Fig 5 Zeta potential distribution of CSO-SA,PEG-

                                                                  CSO-SA and FA-PEG-CSO-SA
               0
                0.1    1     10    100   1 000  10 000
                               粒径,nm                       标(x),绘制标准曲线。得标准曲线回归方程为 y=
                              A. CSO-SA                    25.03x-1.513(r=0.999),OST 质量浓度在 0.78~50.00
              30
                                                           μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,精密度试验
             %  20                                         的日内 RSD 为 1.05%(n=6),日间 RSD 为 1.62%(n=
             数量占比,  10                                     3),准确度试验的平均回收率为 99.6%,RSD 为 0.19%


               0                                           (n=6),稳定性(24 h)试验的RSD为1.05%(n=8)。
                0.1    1     10    100   1 000  10 000     2.6.3  测定方法与结果          称取适量 FA-PEG-CSO-SA/
                               粒径,nm                       OST 胶束,置于 10 mL 量瓶中,以适量甲醇超声(功率:
                             B. PEG-CSO-SA
                                                           400 W,工作2 s,停3 s ,200次)溶解破乳,再按“2.6.1”项
              30
                                                           下色谱条件进样,测定载药胶束中 OST 的浓度,计算包
             %  20                                         封率和载药量,包封率=OST的测得量/OST的加入量×
             数量占比,  10                                     100%,载药量=OST 的测得量/载药胶束总量×100%。

                                                           结果显示,FA-PEG-CSO-SA/OST 中 OST 的包封率为
               0
                0.1    1     10    100   1 000  10 000     (84.47±2.07)%(n=3),载 药 量 为(16.01±0.90)%
                               粒径,nm
                            C. FA-PEG-CSO-SA               (n=3)。
        图 4 CSO-SA、PEG-CSO-SA、FA-PEG-CSO-SA 的粒             2.7 体外抗肿瘤试验
             径分布图                                          2.7.1  细胞培养     取HepG2细胞,置于含有10%胎牛血
        Fig 4  Distribution of particle size of CSO-SA,PEG-  清的 DMEM 培养基中,于 37 ℃、5%CO2培养箱中连续
              CSO-SA and FA-PEG-CSO-SA                     孵育,并以胰酶消化传代。
        2.6.2  方法学考察      将 300 μg/mL 的 OST 对照品溶液,         2.7.2  细胞增殖检测        采用MTT法检测细胞增殖。取
        置于10 mL量瓶中,以流动相分别将其稀释成系列质量                         对数生长期的 HepG2 细胞,经胰酶消化,制成单细胞悬
                                                                                                       -1
                                                                                                   4
        浓度的 OST 对照品溶液。按照“2.6.1”项下色谱条件进                     液,以 DMEM 培养基稀释,按细胞密度为 5×10 mL 将
        样分析,以OST的峰面积为纵坐标(y)、质量浓度为横坐                        单细胞悬液接种于 96 孔培养板中,每孔 90 μL,置于

        中国药房    2019年第30卷第21期                                             China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 21  ·2929  ·
   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59