Page 54 - 2019年11月第30卷第21期
P. 54
1.0 mL/min;检测波长:322 nm;柱温:25 ℃;进样量: 200 000
10 μL。 150 000
总数 100 000
50 000
0
-140 -100 -60 -20 20 60 100
Zeta电位,mV
A. CSO-SA
100 000
80 000
A. CSO-SA B. PEG-CSO-SA 60 000
总数 40 000
20 000
0
-140 -100 -60 -20 20 60 100
Zeta电位,mV
B. PEG-CSO-SA
120 000
100 000
C. FA-PEG-CSO-SA 80 000
图 3 CSO-SA、PEG-CSO-SA 和 FA-PEG-CSO-SA 的 总数 60 000
40 000
透射电镜图(×80 000) 20 000
Fig 3 TEM of CSO-SA,PEG-CSO-SA and FA-PEG- 0 -140 -100 -60 -20 20 60 100
CSO-SA(×80 000) Zeta电位,mV
C. FA-PEG-CSO-SA
30
图 5 CSO-SA、PEG-CSO-SA、FA-PEG-CSO-SA 的 Ze-
% 20 ta电位分布图
数量占比, 10 Fig 5 Zeta potential distribution of CSO-SA,PEG-
CSO-SA and FA-PEG-CSO-SA
0
0.1 1 10 100 1 000 10 000
粒径,nm 标(x),绘制标准曲线。得标准曲线回归方程为 y=
A. CSO-SA 25.03x-1.513(r=0.999),OST 质量浓度在 0.78~50.00
30
μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,精密度试验
% 20 的日内 RSD 为 1.05%(n=6),日间 RSD 为 1.62%(n=
数量占比, 10 3),准确度试验的平均回收率为 99.6%,RSD 为 0.19%
0 (n=6),稳定性(24 h)试验的RSD为1.05%(n=8)。
0.1 1 10 100 1 000 10 000 2.6.3 测定方法与结果 称取适量 FA-PEG-CSO-SA/
粒径,nm OST 胶束,置于 10 mL 量瓶中,以适量甲醇超声(功率:
B. PEG-CSO-SA
400 W,工作2 s,停3 s ,200次)溶解破乳,再按“2.6.1”项
30
下色谱条件进样,测定载药胶束中 OST 的浓度,计算包
% 20 封率和载药量,包封率=OST的测得量/OST的加入量×
数量占比, 10 100%,载药量=OST 的测得量/载药胶束总量×100%。
结果显示,FA-PEG-CSO-SA/OST 中 OST 的包封率为
0
0.1 1 10 100 1 000 10 000 (84.47±2.07)%(n=3),载 药 量 为(16.01±0.90)%
粒径,nm
C. FA-PEG-CSO-SA (n=3)。
图 4 CSO-SA、PEG-CSO-SA、FA-PEG-CSO-SA 的粒 2.7 体外抗肿瘤试验
径分布图 2.7.1 细胞培养 取HepG2细胞,置于含有10%胎牛血
Fig 4 Distribution of particle size of CSO-SA,PEG- 清的 DMEM 培养基中,于 37 ℃、5%CO2培养箱中连续
CSO-SA and FA-PEG-CSO-SA 孵育,并以胰酶消化传代。
2.6.2 方法学考察 将 300 μg/mL 的 OST 对照品溶液, 2.7.2 细胞增殖检测 采用MTT法检测细胞增殖。取
置于10 mL量瓶中,以流动相分别将其稀释成系列质量 对数生长期的 HepG2 细胞,经胰酶消化,制成单细胞悬
-1
4
浓度的 OST 对照品溶液。按照“2.6.1”项下色谱条件进 液,以 DMEM 培养基稀释,按细胞密度为 5×10 mL 将
样分析,以OST的峰面积为纵坐标(y)、质量浓度为横坐 单细胞悬液接种于 96 孔培养板中,每孔 90 μL,置于
中国药房 2019年第30卷第21期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 21 ·2929 ·