Page 57 - 2019年11月第30卷第21期

Effects of Bezafibrate and Fenofibrate on the Proliferation of Lung Adenocarcinoma PC-9 Cells and the
Expression of c-myc
WANG Guiping ，LIANG Jiecong ，LI Zhibin ，ZHANG Yantao （1.Dept. of Pharmacy，Guangzhou Health
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Science College，Guangzhou 510180，China；2.Dept. of Surgery，Guangzhou Women and Children’s Medical
Center，Guangzhou 510623，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of bezafibrate （BEZ） and fenofibrate （FEN） on the proliferation of lung
adenocarcinoma PC-9 cells and the expression of c-myc. METHODS：The effects of BEZ and FEN（12.5，25，50，100，200
µmol/L）on the survival rate of PC-9 cells were detected by CCK8 method. PC-9 cells were divided into administration group and
control group. Administration group was given low，medium and high concentration（25，50，100 µmol/L）of BEZ and FEN；
control group was treated with dimethyl sulfoxide for 48 h. Cell cycle distribution and apoptosis were detected by flow cytometry.
qRT-PCR was used to detect mRNA relative expression of c-myc in cells. The protein relative expression of c-myc in cells were
detected by Western blot assay. RESULTS：The survival rates of PC-9 cells were（80.76±3.2）％，（74.35±5.06）％，（62.8±
1.23）％，（59.03±1.55）％，（39.8±1.01）％ under the action of above concentration of BEZ；and the survival rates of PC-9 cells
were （74.46 ± 1.30）％ ，（61.91 ± 4.77）％ ，（48.95 ± 2.8）％ ，（37.05 ± 1.55）％ ，（32.49 ± 1.36）％ under the action of FEN.
Compared with control group，G1 phase cell ratio increased significantly in medium and high concentration groups of BEZ and
FEN；the apoptotic rate of PC-9 cells was increased significantly in low，medium and high concentration groups of BEZ and FEN；
mRNA and protein relative expression of c-myc were decreased significantly， with statistical significance （P＜0.05）.
CONCLUSIONS：BEZ and FEN can inhibit the proliferation of PC-9 cells，and down-regulate c-myc expression.
KEYWORDS Bezafibrate；Fenofibrate；Lung adenocarcinoma PC-9 cell；Half inhibitory concentration；c-myc；Inhibitory effect

肺腺癌（Lung adenocarcinoma）属于非小细胞肺癌 （德国Eppendorf公司）。
（NSCLC），占所有肺癌的30％～40％，由于70％～80％ 1.2 药品与试剂
的肺癌发现时已进展为晚期，故化疗仍是绝大多数肺癌 苯扎贝特对照品和非诺贝特对照品（美国 Sigma 公
[1]
患者主要的治疗手段 。但目前绝大多数肺癌患者化疗 司，批号：B7273、F6020，纯度：＞98％、＞99％）；Cell
预后并不理想，总体 5 年生存率仅为 10％～15％，肺癌 Counting Kit8（CCK8）试剂盒（上海碧云天生物技术有限
的治疗药物主要包括铂类药物、第三代细胞毒药物（吉 公司，批号：C0038）；兔抗人 c-myc 单克隆抗体（英国
西他滨、紫杉醇、培美曲塞等）、表皮生长因子受体（EG- Abcam公司，批号：32072）；辣根过氧化物（HRP）标记的
FR）酪氨酸激酶抑制剂及 EGFR 单抗等 [2-3] 。因此，发现 鼠抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）抗体（上海康成生
新的、更有效的、更安全的化疗药物，对延长肺癌患者的 物工程有限公司，批号：KC-5G5）；HRP标记山羊抗兔免
生存时间及降低死亡率有着迫切的临床需要。 疫球蛋白G（IgG）二抗（经小鼠、人免疫球蛋白吸附）（美
贝特类药物如苯扎贝特（Bezafibrate）、非诺贝特 国Southern Biotech公司，批号：4050-05）；96孔聚苯乙烯
（Fenofibrate）等具有降低三酰甘油、防止血液凝固、促进 酶标板（美国 Corning 公司）；胎牛血清、RPMI1640 培养
血栓溶解、减少动脉粥样硬化性炎症等作用，常用于动 基及青链霉素（美国 Hyclone 公司，批号：SH30087.01、
脉粥样硬化的预防和治疗 。近年来研究发现，贝特类 SH30809.01B、SH30010）；聚偏二氟乙烯（PVDF）膜（美
[4]
药物也具有良好的抗肿瘤作用，如非诺贝特被报道对乳 国Millipore公司）；其余试剂均为分析纯。
腺癌、肝癌、神经胶质瘤、前列腺癌等多种人类肿瘤具有 1.3 细胞
良好的抗肿瘤作用 [4-7] ；苯扎贝特被报道对白血病等肿瘤 人肺腺癌细胞株PC-9购自中山大学细胞库，培养于
具有良好的抗肿瘤作用 [8-9] 。然而，目前有关苯扎贝特和 含有 10％胎牛血清的 RPMI1640 培养基中，并在 37 ℃、
非诺贝特抗肺癌的研究很少，本文主要研究苯扎贝特和 5％ CO2培养箱中培养，0.25％胰蛋白酶消化，传代备用。
非诺贝特对肺腺癌细胞PC-9增殖和c-myc表达的影响， 2 方法
为贝特类药物在肿瘤治疗中的应用提供依据。 2.1 细胞增殖的检测
1 材料 参考文献[10]方法，采用CCK8法检测细胞存活率，
1.1 仪器 具体操作按说明书进行。取对数生长期PC-9细胞，以含
HERACELL150i 型 CO2 培养箱、MK3 型酶标仪和 10％胎牛血清的 RPMI1640 培养基制备单细胞悬液，接
7500 型荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）仪（赛默飞 种于 96 孔培养板，细胞密度为 5×10 L ，每孔 200 µL，
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世尔仪器有限公司）；Tanon-1600型凝胶成像系统（上海 试验设对照组、苯扎贝特组和非诺贝特组。将苯扎贝特
天能科技有限公司）；22331 Hamburg型核酸蛋白测定仪 和非诺贝特溶解于二甲基亚砜（DMSO）溶液（体积比为

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