Page 52 - 2019年9月第30卷第18期

续表2 2.11 耐用性试验
Continued tab 2 取“2.2”项下样品（编号：S2）适量，按“2.3.2”项下方
法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件[分别以不
已知含量样品， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率， RSD，
待测成分
μg μg μg ％ ％ ％ 同流动相（B）体积比例（0.15％、0.20％、0.25％磷酸水溶
6-姜烯酚 5.01 5.74 10.93 103.14 液）、流速（0.9、1.0、1.1 mL/min）、柱温（30、35、40 ℃）]进
5.00 5.74 10.61 97.74 样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品中11种成
5.02 5.74 10.79 100.52
5.01 5.74 10.65 98.26 分的含量，结果见表3。结果表明，本方法可满足试验要
5.00 5.74 10.57 97.04 求，提示耐用性良好。
茯苓酸 22.21 22.24 45.23 103.51 100.23 2.94 2.12 样品含量测定
22.21 22.24 43.83 97.21 取“2.2”项下3批样品适量，按“2.3.2”项下方法制备
22.19 22.24 44.82 101.75
22.19 22.24 44.13 98.65 供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，平行操
22.20 22.24 45.15 103.19 作3次，记录峰面积并按标准曲线法计算样品中11种成
22.20 22.24 43.79 97.08 分的含量，结果见表4。

表3 耐用性试验结果（n＝3）
Tab 3 Results of durability tests（n＝3）
5-羟甲基糠醛 （+）-儿茶素 芍药苷 苯甲酰乌头原碱 苯甲酰次乌头原碱 苯甲酰芍药苷 6-姜酚 8-姜酚 白术内酯Ⅱ 6-姜烯酚 茯苓酸
试验条件 含量，RSD， 含量，RSD， 含量，RSD， 含量， RSD， 含量， RSD， 含量，RSD， 含量，RSD， 含量，RSD， 含量，RSD， 含量，RSD， 含量，RSD，
mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％ mg/g ％
流动相（B） 0.15％磷酸水溶液 9.68 1.96 43.51 1.60 3 456.41 1.89 72.26 1.30 71.37 1.30 79.66 1.53 87.07 0.51 13.43 2.21 5.04 1.09 3.11 2.99 14.68 0.68
0.20％磷酸水溶液 9.31 42.15 3 500.59 73.55 70.53 78.22 86.33 12.99 5.13 3.29 14.88
0.25％磷酸水溶液 9.47 42.98 3 589.31 74.12 72.38 80.63 86.27 13.55 5.03 3.26 14.76
流速，mL/min 0.9 9.31 1.00 43.91 2.14 3 569.28 1.18 74.05 0.77 70.69 0.91 81.14 0.44 86.11 0.33 13.07 1.03 5.28 2.53 3.15 2.86 14.73 0.95
1.0 9.29 42.19 3 521.37 73.79 71.41 80.87 86.67 12.86 5.17 3.28 15.01
1.1 9.14 53.65 3 605.04 74.88 70.12 80.43 86.43 13.11 5.02 3.33 14.85
柱温，℃ 30 9.53 1.69 43.22 1.35 3 550.14 1.03 74.12 1.00 72.18 0.89 79.11 0.67 86.18 0.70 12.97 2.48 4.94 1.60 3.06 2.60 14.44 2.39
35 9.32 42.07 3 498.95 73.28 71.43 79.54 87.37 12.87 5.01 3.17 14.59
40 9.22 42.56 3 569.77 72.66 70.92 80.17 86.54 12.38 5.10 3.22 15.11

表4 样品含量测定结果（n＝3，µg/mL）
Tab 4 Results of content determination of samples（n＝3，µg/mL）

编号 5-羟甲基糠醛 （+）-儿茶素 芍药苷 苯甲酰乌头原碱 苯甲酰次乌头原碱 苯甲酰芍药苷 6-姜酚 8-姜酚 白术内酯Ⅱ 6-姜烯酚 茯苓酸
S1 9.97 43.08 3 485.15 73.93 70.04 80.86 87.84 12.04 5.64 3.04 13.78
S2 9.39 42.13 3 498.22 72.36 69.89 79.54 86.99 13.13 5.37 3.61 14.94
S3 9.04 44.02 3 508.39 71.98 71.64 80.11 88.16 12.34 5.13 3.17 14.19
平均值 9.47 43.08 3 497.25 72.76 70.52 80.17 87.66 12.50 5.38 3.27 14.30
3 讨论 分分离度好，噪声小，故本研究将样品用甲醇进行处理
有研究认为，同时测定中药复方中多个成分时，因 后再进样分析。与此同时，本研究又比较了样品与不同
各成分的紫外最大吸收波长不同，因此需要采用波长切 体积比甲醇（1 ∶ 4、2 ∶ 3、1 ∶ 1、3 ∶ 2、4 ∶ 1）混匀后的色谱情
换法测定各成分的含量 。笔者参考相关文献 [14-16，18-20] ， 况。结果发现，不同体积比的色谱图中峰数未有明显变
[18]
在 190～400 nm 波长范围内对 11 种待测成分进行全波 化，但当样品与甲醇体积比为3 ∶ 2时待测成分峰面积最
长扫描，结果发现，在233 nm波长处芍药苷、苯甲酰乌头 大，且基线较平稳，故笔者将样品与甲醇按体积比3∶2混
原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷有较大吸收， 匀后，分别放置2、4、6、8、10、12、14、16 h后过滤进样，发
222 nm波长处白术内酯Ⅱ有最大吸收，285 nm波长处5- 现混匀后的样品在放置12 h后过滤，其滤液不会产生白
羟甲基糠醛有最大吸收，200 nm波长处茯苓酸有较大吸 色的粉状沉淀，且各成分含量变化不大。因此本研究采
收，200、227、280 nm波长处 6-姜酚、6-姜烯酚、8-姜酚有 用“2.3.2”项下方法处理样品。
吸收峰，203、279 nm 波长处（+）-儿茶素有吸收峰；考虑 此外，笔者比较了甲醇-水、乙腈-水等流动相系统。
到部分成分含量较低，因此在保证各待测成分检测灵敏 结果显示，乙腈的洗脱能力优于甲醇，色谱峰分离度较
度及基线分离的情况下，本研究采用“2.1”项下波长作为 好，但略有拖尾，在加入磷酸溶液后峰形和分离度均有
检测波长 。 所改善，故选择乙腈-磷酸水溶液为流动相。同时，本研
[21]
本研究将样品滤过后直接进样与经甲醇处理后进 究还比较了乙腈-磷酸水溶液中磷酸不同体积分数
样的色谱图进行比较。结果发现，经甲醇处理后，各成 （0.2％、0.3％、0.4％）对各成分与杂质峰分离度的影响。

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