Page 48 - 2019年9月第30卷第18期

HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量 Δ

田 萍 ，马 开 ，张 薇 ，张迪文 ，刘碧碧 ，郭晓燕 ，韩德恩 （1.河南省中医药研究院，郑州 450004；2.河
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南中医药大学药学院，郑州 450046）
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）18-2491-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.18.08
摘 要 目的：建立同时测定真武汤中5-羟甲基糠醛、（+）-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、
6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18，流动
相为乙腈-0.2％磷酸水溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为285 nm（4.4～7 min，5-羟甲基糠醛）、203 nm[7～12 min，
（+）-儿茶素]、233 nm（12～50 min，芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷）、200 nm（50～62.3 min，6-姜酚、8-
姜酚；62.9～90 min，6-姜烯酚、茯苓酸）、222 nm（62.3～62.9 min，白术内酯Ⅱ），柱温为 35 ℃，进样量为 20 µL。结果：5-羟甲基糠
醛、（+）-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸检测
质量浓度线性范围分别为 0.62～12.47 μg/mL（r＝0.999 6）、2.36～47.25 μg/mL（r＝0.999 7）、200.80～4 016 μg/mL（r＝0.999 7）、
4.45～89.04 μg/mL（r＝0.999 6）、4.28～85.54 μg/mL（r＝0.999 5）、5.16～103.13 μg/mL（r＝0.999 9）、5.53～110.66 μg/mL（r＝0.999 9）、
0.84～16.89 μg/mL（r＝0.999 8）、0.60～12.04 μg/mL（r＝0.999 9）、0.53～10.62 μg/mL（r＝0.999 5）、1.04～20.78 μg/mL（r＝0.999 7）；
定量限分别为 0.155、0.590、1.210、1.112、1.070、0.258、0.553、0.421、0.153、0.354、0.431 μg/mL，检测限分别为 0.047、0.179、0.134、
0.337、0.324、0.078、0.168、0.128、0.046、0.107、0.131 μg/mL，精密度、稳定性、重复性试验的 RSD 均小于 3％；加样回收率分别为
96.06％～103.01％（RSD＝2.64％，n＝6）、95.11％～101.57％（RSD＝2.58％，n＝6）、97.22％～102.11％（RSD＝1.93％，n＝6）、
96.43％～102.78％（RSD＝2.35％，n＝6）、96.42％～101.43％（RSD＝2.15％，n＝6）、96.86％～102.05％（RSD＝2.10％，n＝6）、
95.32％～100.55％（RSD＝1.87％，n＝6）、97.04％～103.25％（RSD＝2.22％，n＝6）、96.78％～103.22％（RSD＝2.62％，n＝6）、
97.04％～103.14％（RSD＝2.28％，n＝6）、97.08％～103.51％（RSD＝2.94％，n＝6）。结论：该方法准确、专属性好，可用于同时测
定真武汤中11种活性成分的含量。
关键词 真武汤；高效液相色谱法；5-羟甲基糠醛；（+）-儿茶素；芍药苷；苯甲酰乌头原碱；苯甲酰次乌头原碱；苯甲酰芍药苷；6-姜
酚；8-姜酚；白术内酯Ⅱ；6-姜烯酚；茯苓酸；含量测定

Simultaneous Determination of Eleven Active Constituents in Zhenwutang Decoction by HPLC
TIAN Ping ，MA Kai ，ZHANG Wei ，ZHANG Diwen ，LIU Bibi ，GUO Xiaoyan ，HAN De’en（1. Henan
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Province Institute of TCM Research，Zhengzhou 450004，China；2. College of Pharmacy，Henan University of
TCM，Zhengzhou 450046，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for simultaneous determination of eleven active constituents in Zhenwutang
decoction，such as 5-hydroxymethylfurfural，（+）-cianidanol，paeoniflorin，benzoylaconitine，benzoylhypacoitine，benzoylpaeoniflorin，
6-gingerol，8-gingerol，atractylenolide Ⅱ，6-shogaol and pachymic acid. METHODS：HPLC method was adopted. The separation
was performed on Phenomenex Kinetex C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2 ％ phosphoric acid solution
（gradient elution）at flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 285 nm（4.4-7 min，5-hydroxymethylfurfural），
203 nm [7-12 min，（+）-cianidanol]，233 nm （12-50 min，paeoniflorin，benzoylaconitine，benzoylhypacoitine，benzoylpaeoni-
florin），200 nm（50-62.3 min，6-gingerol，8-gingerol；62.9-90 min，6-shogaol，pachymic acid）and 222 nm（62.3-62.9 min，
atractylenolide Ⅱ）. The column temperature was set at 35 ℃，and the sample size was 20 µL. RESULTS：The linear ranges of
5-hydroxymethylfurfural，（+）-cianidanol，paeoniflorin，benzoylaconitine，benzoylhypacoitine，benzoylpaeoniflorin，6-gingerol，
8-gingerol，atractylenolide Ⅱ，6-shogaol，pachymic acid were 0.62-12.47 μg/mL（r＝0.999 6），2.36-47.25 μg/mL（r＝0.999 7），
200.80-4 016 μg/mL（r＝0.999 7），4.45-89.04 μg/mL（r＝0.999 6），4.28-85.54 μg/mL（r＝0.999 5），5.16-103.13 μg/mL（r＝0.999 9），
5.53-110.66 μg/mL（r＝0.999 9），0.84-16.89 μg/mL（r＝0.999 8），0.60-12.04 μg/mL（r＝0.999 9），0.53-10.62 μg/mL（r＝0.999 5），
1.04-20.78 μg/mL（r＝0.999 7），respectively. The limits of quantitation were 0.155，0.590，1.210，1.112，1.070，0.258，0.553，
0.421，0.153，0.354，0.431 μg/mL，respectively. The limits of
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81473368）；河南省
detection were 0.047，0.179，0.134，0.337，0.324，0.078，
中医药科学研究专项课题（No.2016ZY2020、2017ZY2036）
0.168，0.128，0.046，0.107，0.131 μg/mL，respectively. RSDs
＊助理研究员，硕士。研究方向：中药药效物质基础。电话：
0371-66331718。E-mail：tianping082@163.com of precision，stability and reproducibility tests were all lower
# 通信作者：讲师，博士。研究方向：药物代谢动力学和代谢组 than 3％ . The average recovery rates were 96.06％ -103.01％
学。电话：0371-65962746。E-mail：handn@163.com （RSD＝2.64％，n＝6），95.11％-101.57％（RSD＝2.58％，n＝

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