Page 49 - 2019年9月第30卷第18期
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6），97.22％-102.11％（RSD＝1.93％，n＝6），96.43％-102.78％（RSD＝2.35％，n＝6），96.42％-101.43％（RSD＝2.15％，n＝6），
        96.86％ -102.05％（RSD＝2.10％ ，n＝6），95.32％ -100.55％（RSD＝1.87％ ，n＝6），97.04％ -103.25％（RSD＝2.22％ ，n＝6），
        96.78％ -103.22％（RSD＝2.62％ ，n＝6），97.04％ -103.14％（RSD＝2.28％ ，n＝6），97.08％ -103.51％（RSD＝2.94％ ，n＝6），
        respectively. CONCLUSIONS：The method is accurate and specific，and suitable for simultaneous determination 11 active
        components of Zhenwutang decoction.
        KEYWORDS      Zhenwutang decoction； HPLC； 5-hydroxymethylfurfural；（ + ）-cianidanol； Paeoniflorin； Benzoylaconitine；
        Benzoylhypacoitine； Benzoylpaeoniflorin； 6-gingerol； 8-gingerol； Atractylenolide Ⅱ ； 6-shogaol； Pachymic acid； Content
        determination



                                                      [1]
            真武汤是张仲景《伤寒论》中温阳利水的代表方 ，                         号：wkq16060503，纯度：＞98％）均购自四川维克奇生物
        由白芍、茯苓、白术、附子、生姜等5味中药组成，主要用                          科技有限公司；（+）-儿茶素对照品（批号：MUST- 16030812，
                   [2]
                             [3]
        于治疗肾病 、心力衰竭 等症，疗效显著。白芍中芍药                           纯度：＞98％）、5-羟甲基糠醛对照品（批号：MUST-
        苷、苯甲酰芍药苷具有抗炎、抗应激、调节免疫等作用，可                          15051212，纯度：＞98％）、苯甲酰乌头原碱对照品（批号：
        用于糖尿病肾病、肾病综合征、慢性肾小球肾炎等多种肾                           MUST-17022805，纯度：＞98％）、苯甲酰次乌头原碱对
                     [4]
                                                      [5]
        脏疾病的治疗 ；其酚类成分儿茶素具有肾保护作用 。                           照品（批号：MUST-17022807，纯度：＞98％）均购自成都
        茯苓酸是茯苓的主要有效活性成分之一，具有改善脓毒                            曼 斯 特 生 物 科 技 有 限 公 司 ；6- 姜 酚 对 照 品（批 号 ：
                                 [6]
        症引起的急性肾损伤的作用 。白术中白术内酯Ⅱ能显                            20171206）、6-姜烯酚对照品（批号：20171222）、8-姜酚对
                                            [7]
        著抑制炎症介质和炎症细胞因子的产生 ；5-羟甲基糠                           照品（批号：20180408）均由河南省中医药研究院马开实
        醛对链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病模型大鼠具有肾保                             验室自制，采用面积归一化法检测纯度均大于 98％；乙
        护作用，但有基因和细胞毒性             [8-9] 。附子水煎剂可改善微          腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。
                                      [10]
        小病变肾病模型大鼠的肾脏损伤 ，苯甲酰乌头原碱、                            1.3  药材
        苯甲酰次乌头原碱等单酯型生物碱既是其有效成分，                                 白术饮片（批号：170605CP0175，产地：浙江）、白芍
                     [11]
        也是毒性成分 。生姜中6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚对急                        饮片（批号：171102，产地：安徽）、附子饮片（黑顺片，批
        性肾损伤和糖尿病肾损伤均具有保护作用                   [12-13] 。以上成   号：17050202，产地：四川）、茯苓饮片（批号：170602，产
        分均为真武汤中具有肾保护作用的活性成分。目前关                             地：安徽）均购自河南本草国药馆；生姜购自郑州市家辉
        于真武汤的研究，主要为测定方中一味或多味药材所含的                           超市，经河南省中医药研究院刘杰研究员鉴定分别为菊
        有效成分    [14-16] ，尚未涵盖方中所有药材有效成分或指标                  科植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）的干燥
        成分含量。而中药复方通过多成分、多靶点而发挥协同                            根茎、毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥
        增效的作用，因此对其中单一或几种成分进行含量测                             根、毛茛科植物乌头（Aconitum carmichaelii Debx.）的子
        定，难以全面体现其整体质量。为此，本研究采用高效                            根加工品、多孔菌科真菌茯苓[Poria cocos（Schw.）Wolf]
        液相色谱法（HPLC）测定了真武汤中 5-羟甲基糠醛、                         的干燥菌核、姜科植物姜（Zingiber officinale Rosc.）的新
        （+）-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原                         鲜根茎。
        碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯                       2 方法与结果
        酚、茯苓酸等11种活性成分的含量，旨在为完善其质量                           2.1  色谱条件
        标准提供参考。                                                 色谱柱：Phenomenex Kinetex C18 （250 mm×4.6 mm，
        1 材料                                                5 µm）；流动相：乙腈（A）-0.2％磷酸水溶液（B），梯度洗
        1.1 仪器                                              脱（0～25 min，8％ A→17％ A；25～70 min，17％ A→
            2695 型 HPLC 仪，包括二极管阵列检测器、Empow-                 65％A；70～75 min，65％A；75～76 min，65％A→ 90％
        er 2-Build 2154 色谱工作站（美国 Waters 公司）；AE240           A；76～90 min，90％A；90～95 min，90％A→ 8％A）；流
        型十万分之一分析天平（瑞士 Mettler-Toledo 公司）；LI-                速：1.0 mL/min；检测波长：285 nm（4.4～7 min，5-羟甲基
        BROR-160DPT型万分之一电子分析天平（日本Shimadzu                   糠醛）、203 nm[7～12 min，（+）-儿茶素]、233 nm（12～50
        公司）；ULUP- IV-10T型超纯水器（四川优普超纯科技有                     min，芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲
        限公司）。                                               酰 芍 药 苷）；200 nm（50～62.3 min，6- 姜 酚、8- 姜 酚 ；
        1.2 药品与试剂                                           62.9～90 min，6-姜烯酚、茯苓酸）、222 nm（62.3～62.9
            芍药苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：                          min，白术内酯Ⅱ）；柱温：35 ℃；进样量：20 µL。
        110736-201640，纯度：＞99.0％）；苯甲酰芍药苷对照品                  2.2 真武汤的制备
        （批号：wkq16122906，纯度：＞98％）、茯苓酸对照品（批                       按《伤寒论》和《方剂学》（7版）中真武汤的处方量                [1，17] ，
        号：wkq16071903，纯度：＞98％）、白术内酯Ⅱ对照品（批                   精密称取白芍9 g、茯苓9 g、白术 6 g、生姜 9 g、附子（黑


        ·2492  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18                                中国药房    2019年第30卷第18期
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