Page 68 - 2019年9月第30卷第17期

sil C18 （200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2％甲 0.98％、0.91％（n＝6）；在复方样品中，二者平均含量分
酸溶液，梯度洗脱；流速为 1.0 mL/min；检测波长为 278 别为5.70、0.84 mg/g，RSD分别为1.53％、0.88％（n＝6），
nm；柱温为30 ℃；进样量为10或20 μL。梯度洗脱程序 表明本方法重复性良好。
见表1。 0.15
表1 梯度洗脱程序 AU 0.10 连翘酯苷A 连翘苷
0.05
Tab 1 Gradient elution procedure 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
时间，min 乙腈，％ 0.2％甲酸溶液，％ t，min
0～30 14.5 85.5 A.混合对照品贮备溶液
30～35 14.5→19.0 85.5→81.0 0.15
35～60 19.0 81.0 AU 0.10 连翘酯苷A
0.05
60～70 19.0→14.0 81.0→86.0 0 连翘苷
70～75 14.0→14.5 86.0→85.5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
75～80 14.5 85.5 t，min
B.供试品溶液Ⅰ
精密吸取混合对照品贮备溶液 10 μL，供试品溶液
0.15
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及阴性样品溶液Ⅰ、Ⅱ和双阴性样品溶液各 AU 0.10 连翘酯苷A
20 μL，注入液相色谱仪中，结果阴性样品溶液对主要成 0.05 连翘苷
0
分峰均未见干扰。理论板数按连翘酯苷A、连翘苷峰计 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
t，min
应分别不低于5 000、3 000。色谱图见图1。 C.供试品溶液Ⅱ
2.2.5 线性关系考察 精密吸取“2.2.1”项下的混合对 0.15
照品贮备溶液0.2、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0 mL，置于5 mL量 AU 0.10 连翘酯苷A 连翘苷
0.05
0
瓶中，分别制备成连翘酯苷A为0.061 0、0.152 5、0.244 0、 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
0.305 0、0.457 5、0.610 0 mg/mL，连 翘 苷 为 0.024 6、 t，min
D.供试品溶液Ⅲ
0.061 5、0.098 4、0.123 0、0.184 5、0.246 0 mg/mL 的对照
0.15
品溶液。分别吸取上述对照品溶液各 10 μL，注入液相 AU 0.10
色谱仪中，测定并记录其峰面积。以连翘酯苷 A（A）和 0.05
0
连翘苷（B）进样量（μg）为横坐标（x）、峰面积为纵坐标 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
t，min
（y），绘制标准曲线，得回归方程分别为 yA＝856 479xA+ E.阴性样品溶液Ⅰ
103 552、yB＝71 392xB +12 997，相关系数分别为 rA＝ 0.15
0.999 7、rB＝0.999 9，表明连翘酯苷A进样量线性范围为 AU 0.10
0.05
0
0.61～6.1 μg，连翘苷进样量线性范围为0.246～2.46 μg。 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
2.2.6 精密度试验 精密吸取混合对照品贮备溶液 10 t，min
F.阴性样品溶液Ⅱ
μL，重复进样6次，记录峰面积。结果，连翘酯苷A和连
0.20
翘苷峰面积的 RSD 分别为 0.47％、1.45％（n＝6），表明 AU 0.15
0.10
仪器精密度良好。 0.05
0
2.2.7 稳定性试验 取供试品溶液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分别在0、 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
t，min
4、8、12、16、20 h进样，分别测定，记录峰面积。结果，供 G.双阴性样品溶液
试品溶液Ⅰ中的连翘酯苷 A 和连翘苷峰面积的 RSD 分 图1 高效液相色谱图
别为0.72％、0.56％（n＝6）；供试品溶液Ⅱ中二者的峰面 Fig 1 HPLC chromatograms
积的 RSD 分别为 0.33％、1.73％（n＝6），供试品溶液Ⅲ
2.2.9 加样回收率试验 取连翘单药样品粉末 0.15 g、
中二者的峰面积的 RSD 分别为 0.88％、0.51％（n＝6），
连翘-姜半夏配伍样品粉末 0.5 g、门氏护胃方复方样品
表明供试品溶液中连翘酯苷 A 和连翘苷在 20 h 内稳定
粉末1.5 g，各6份，精密称定，分别加入连翘酯苷A和连
性良好。
2.2.8 重复性试验 取连翘单药样品粉末 0.3 g，连翘- 翘苷对照品适量，按照供试品溶液Ⅰ制备方法制备，依
姜半夏配伍样品粉末 1.0 g，门氏护胃方复方样品粉末 法测定连翘酯苷A和连翘苷的含量。结果，二者的平均
3.0 g，各6份，精密称定，分别按供试品溶液Ⅰ制备方法 回收率为 96.10％～99.37％（RSD≤2.36％，n＝6），准确
制备，测定，计算含量。结果，连翘酯苷A和连翘苷在连 度较好，详见表2。
翘单药样品中平均含量分别为54.95、7.72 mg/g，RSD分 2.2.10 样品含量测定 取连翘单药样品粉末 0.3 g、连
别为1.04％、0.40％（n＝6）；在连翘-姜半夏配伍样品中， 翘-姜半夏配伍样品粉末 1.0 g、门氏护胃方复方样品粉
二者的平均含量分别为 17.86、1.97 mg/g，RSD 分别为 末3.0 g，各3份，精密称定，分别按供试品溶液Ⅰ制备方

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