Page 78 - 2019年2月第30卷第4期

10 5 10 5 表6 Ibr、Ibr-7对Capan-2细胞线粒体凋亡相关蛋白表
达的影响（x±±s，n＝3）
10 4 10 4
PE-A 10 3 PE-A 10 3 Tab 6 Effects of Ibr and Ibr-7 on the protein expres-

7.5％ 7.5％ sion of apoptosis-related proteins in mitochon-
10 2 10 2
0 0 dria of Capan-2 cells（x±±s，n＝3）
组别 PARP Noxa Bax Bcl-2 Mcl-1 Bcl-xL
0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5
FITC-A FITC-A 空白对照组 1.00±0.10 1.00±0.16 1.00±0.12 1.00±0.15 1.00±0.11 1.00±0.17
A.空白对照组 B. 2 μmol/L Ibr-7组 2 μmol/L Ibr-7组 1.00±0.06 1.52±0.23 ＊ 1.11±0.19 0.81±0.09 0.63±0.06 ＊＊ 0.90±0.21
4 μmol/L Ibr-7组 1.01±0.09 3.02±0.37 ＊＊ 1.24±0.23 0.67±0.04 0.56±0.06 ＊＊ 1.05±0.23
＊
10 5 10 5
8 μmol/L Ibr-7组 0.80±0.04 1.98±0.22 ＊＊## 1.63±0.28 ＊# 0.80±0.08 0.61±0.07 ＊＊# 0.93±0.15
＊
＊
10 4 10 4 8 μmol/L Ibr组 0.81±0.06 1.08±0.17 0.94±0.17 0.94±0.05 0.20±0.01 ＊＊ 1.00±0.17
PE-A 10 3 PE-A 10 3 8 μmol/L吉西他滨组 0.68±0.08 1.07±0.20 0.80±0.12 1.14±0.05 0.36±0.04 ＊＊ 0.85±0.25
＊
＊
＊＊
11.7％ 18.9％ 注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01；与同剂量 Ibr 组比
10 2 10 2 较，P＜0.05，P＜0.01
##
#
0 0
Note：vs. blank control group， P＜0.05， P＜0.01；vs. same-dose
＊＊
＊
0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5 # ##
FITC-A FITC-A Ibr group，P＜0.05，P＜0.01
C. 4 μmol/L Ibr-7组 D. 8 μmol/L Ibr-7组 的作用。故在此基础上，本研究采用 CCK-8 法检测了
10 5 10 5
Ibr、Ibr-7 对细胞增殖活性和药物敏感性的影响。结果
10 4 10 4 显示，经不同剂量 Ibr、Ibr-7（1～8 μmol/L）作用 48 h 后，
PE-A 10 3 PE-A 10 3 Capan-2 细胞的存活率均较空白对照组显著降低，且
6.2％ 9.0％ Ibr-7的IC50值显著低于Ibr。这提示这两种化合物对Ca-
10 2 10 2
0 0 pan-2细胞的体外增殖均有一定的抑制作用，且Ibr-7的作
0 10 2 10 3 10 4 10 5 0 10 2 10 3 10 4 10 5 用明显强于Ibr。同时本研究结果还显示，联用1 μmol/L
FITC-A FITC-A 的 Ibr 或 Ibr-7 后，吉西他滨和紫杉醇对 Capan-2 细胞增
E. 8 μmol/L Ibr组 F. 8 μmol/L吉西他滨组
殖的抑制作用均显著增强（联用组细胞的存活率均显著
图4 Ibr、Ibr-7对Capan-2细胞线粒体膜电位的影响
低于同剂量吉西他滨、紫杉醇单用组）；且与联用 Ibr 相
Fig 4 Effects of Ibr and Ibr-7 on mitochondrial trans-
比，联用 Ibr-7 后抑制作用增强更为明显。这提示 Ibr-7
membrane potential of Capan-2 cells
可更明显地提高 Capan-2 细胞对吉西他滨、紫杉醇的敏
感性，但具体的增敏机制仍有待后续研究进一步探讨。
PARP
克隆形成试验结果显示，经不同剂量（根据增殖试
验和药物敏感性试验结果，将剂量确定为1～4 μmol/L）
Noxa
Ibr、Ibr-7 作用 48 h 后，Capan-2 细胞的克隆形成受到明
显抑制，其细胞集落形成数量均较空白对照组显著降
Bax 低，且Ibr-7组显著低于同剂量Ibr组，差异均有统计学意
义。这提示这两种化合物对Capan-2细胞的克隆形成具
Bcl-2 有一定的抑制作用，且Ibr-7的抑制作用强于Ibr。
线粒体膜电位下降是细胞早期凋亡的重要标志之
[9]
Mcl-1 一 。JC-1是一种阳离子染料，当线粒体膜电位较高时，
其可聚集至细胞基质中，形成复合物而发出红色荧光；
Bcl-xL 而当线粒体膜电位降低时，JC-1 则无法聚集，以单体形
式存在而发出绿色荧光，故可根据荧光的变化来检测细
胞线粒体膜电位的改变情况 。本研究对细胞凋亡和线
[9]
β-actin
粒体膜电位的检测结果显示，经不同剂量 Ibr-7 作用
空白对 2 μmol/L 4 μmol/L 8 μmol/L 8 μmol/L 8 μmol/L吉
照组 Ibr-7组 Ibr-7组 Ibr-7组 Ibr组 西他滨组 后，Capan-2 细胞的总凋亡率（2、4、8 μmol/L 组）和线粒
图5 Ibr、Ibr-7对Capan-2细胞线粒体凋亡相关蛋白影 体膜电位下降比例（8 μmol/L 组）均较空白对照组显著
响的电泳图 上升，且 8 μmol/L Ibr-7组显著高于同剂量Ibr组，差异均
Fig 5 Electrophoresis of the effects of Ibr and Ibr-7 有统计学意义。这提示与 Ibr 相比，Ibr-7 可更明显地促
on the apoptosis-related proteins in mitochon- 进Capan-2细胞的凋亡、降低其线粒体膜电位。
dria of Capan-2 cells 肿瘤细胞凋亡过程中，Bcl-2 家族蛋白可通过与其

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