Page 81 - 2019年2月第30卷第4期

identified according to physicochemical properties and spectrum （mass spectrum，hydrogen spectrum，carbon spectrum） data.
Using human cervical cancer HeLa cells as objects，5-FU as positive control，MTT assay was used to detect the inhibitory rate of
HeLa cells pretreated with different doses of compounds（6.25，12.5，25，50，100，200 µg/mL）；IC50 was calculated to screen
active monomers. Scratch test was used to investigate the effects of above active monomers（all 50 µg/mL）on the migration ability
of HeLa cells. Kim’s formula was used to evaluate the effects of 5-FU separately combined with above active monomers [（3.125+
6.25），（6.25+12.5），（12.5+25），（25+50）µg/mL]. RESULTS：Six compounds were isolated from the n-butanol extract part of A.
sparsifolia and identified as butin （ Ⅰ ）， 3′，4′，7-trihydroxyisoflavone （ Ⅱ ）， p-methoxyphenylacetic acid （ Ⅲ ），
4-hydroxyacetophenone（Ⅳ），aurantiamide acetate（Ⅴ），protocatechualdehydea（Ⅵ）. Compared with blank control group，5-FU
and each compound（5-FU：6.25-200 µg/mL，compound Ⅰ：12.5-200 µg/mL；compound Ⅱ：25，50，200 µg/mL；compound
Ⅲ：6.25，100，200 µg/mL；compound Ⅳ：50，100，200 µg/mL；compound Ⅴ：12.5，25，200 µg/mL；compound Ⅵ：6.25-200
µg/mL）could significantly increase the cell inhibition rate. IC50 of compound Ⅰ，Ⅴ，Ⅵ were decreased significantly（P＜0.05 or
P＜0.01），and those of compound Ⅰ and Ⅵ were lower relatively. The migration distance of cells in 5-FU and compound Ⅰ and
Ⅵgroups were decreased significantly，compared with blank control group（P＜0.05 or P＜0.01）. 5-FU separately combined with
compound Ⅰ and Ⅵ showed additive and enhanced inhibitory effects on the proliferation of HeLa cells（synergistic index＞0.9）.
CONCLUSIONS：Compounds Ⅰ - Ⅵ are isolated from Alhagi for the first time. Butin and protocatechualdehydea are active
monomers of its n-butanol extract part. Above two monomers can inhibit the proliferation and migration of human cervical cancer
Hela cells，with strong inhibitory effect in vitro，and stronger inhibitory effect combined with 5-FU than any compound alone.
KEYWORDS Alhagi sparsifolia；n-butanol extract part；Monomeric compounds；Antitumor activity；Proliferation；Migration；
Drug combination；Human cervical cancer HeLa cells

骆驼刺（Alhagi sparsifolia Shap.）为豆科骆驼刺属植 谱仪（美国Nicolet公司）；ZF-6型三用紫外线分析仪（上
[1]
物 ，是新疆干旱沙漠地区特有的一种落叶灌木，也是沙 海嘉鹏科技有限公司）；SPD-20A型高效液相色谱仪（日
漠戈壁“三宝”之一，具有开通阻滞、止咳祛痰、清除异常 本 Shimadzu 公司）；Eclipse Ts2 型倒置显微镜（日本
黏液质等功效，是治疗腹痛腹胀、痢疾腹泻、风湿病以及滋 Nikon公司）；DZF-2B型电热真空干燥箱（北京市永光明
补强壮、平衡体液、改善异常胆液质的常用药材 [2-3] 。宫颈 医疗仪器有限公司）；V-100型旋转蒸发仪、CCA-1111型
癌是最常见的妇科恶性肿瘤，全球每年约有新发病例50 冷却水循环装置（上海爱朗仪器有限公司）；RE-5210A
万，并呈逐年递增和年轻化的趋势，严重威胁女性的生 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHB-Ⅲ型循环水
[4]
命健康 。我国是宫颈癌高发国家，每年新发病例约 式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；SW-CJ-2F
13.5万，约占全球每年宫颈癌新发病例总量的1/3 。目 型洁净工作台（苏州尚田洁净技术有限公司）；Mikro
[5]
前，新型放化疗综合治疗手段虽有助于提高中晚期和复 220R 型冷冻离心机（德国 Hettich 公司）；UPT-I-5T/L 型
发转移宫颈癌患者的治疗效果，但由于毒副作用较大等 优普超纯水机（成都超纯科技有限公司）；THZ-02 型台
[6]
原因，其临床应用受到了一定的限制 。因此，学者一直 式恒温振荡器（中国科学院新疆分院科学仪器厂）。
致力于探索恶性肿瘤细胞增殖、转移等相关机制，以寻 1.2 药材、药品与试剂
[7]
求更好的治疗药物 。本课题组前期研究发现，骆驼刺 骆驼刺采自新疆吐鲁番地区，经新疆维吾尔自治区
正丁醇萃取部位抗肿瘤（尤其是宫颈癌）和免疫调节的 中药民族药研究所王果平研究员鉴定为豆科骆驼刺属
作用最强 [8-11] 。故本研究在此基础上，对骆驼刺的正丁 植物骆驼刺（A. sparsifolia Shap.）的地上部分。
醇萃取部位进行分离、纯化及结构鉴定；同时，以体外培 5-氟尿嘧啶（5-FU）原料药（上海旭东海普药业有限
养人宫颈癌HeLa细胞为对象，对其活性单体进行筛选， 公司，批号：FA161012；临用前以相应培养基稀释至0.25
并对活性单体的协同作用进行初探，以期为骆驼刺活性 g/10 mL）；DMEM高糖培养基（批号：L0T20170511-0135）、
成分治疗宫颈癌的后续研究提供实验依据。 胎牛血清（FBS，批号：TBD0110HYT）、0.25％胰蛋白酶
1 材料 （批号：L0T20170612-0085）、青霉素-链霉素双抗（PS，批
1.1 仪器 号：L0T20170310-0146）均购自天津灏洋华科生物制品
BC-J80S 型 CO2培养箱（上海博迅实业有限公司医 科技有限公司；磷酸盐缓冲溶液（PBS，美国Boster公司，
疗设备厂）；ELx800 型全自动酶标仪（美国 BioTek 公 批号：11D16B30，pH 7.2）；四甲基偶氮唑盐（MTT，美国
司）；ARX-300 型核磁共振仪、AV-600 型核磁共振仪（德 Sigma 公司，批号：1212U0516）；硅胶 G 薄层板、硅胶
国 Bruker 公 司）；API 2000 型 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 GF254 薄层板（青岛海洋化工有限公司）；RyC18色谱柱
（LC-MS/MS）仪（美国 Sciex 公司）；FTIR6700 型红外光 （250 mm×4.6 mm，5 µm，大连江申分离科学技术公司）；

中国药房 2019年第30卷第4期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 4 ·507 ·