Page 50 - 2019年1月第30卷第2期
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1.1 仪器                                             果，15个共有峰相对保留时间的RSD均小于0.15％（n＝
            LC-2040C CN 型 HPLC 仪，包括二极管阵列检测                 6），相对峰面积的 RSD 均小于 1.70％（n＝6），表明本方
        器、Labsolutions 工作站（日本 Shimadzu 公司）；PGJ-10/         法精密度良好。
        20-AS 型超纯水仪（武汉品冠仪器设备有限公司）；                         2.3.2  稳定性试验       取“2.2.2”项下供试品溶液（批号：
        UA800-DH型超声波清洗仪（上海欧河机械设备有限公                        170101）适量，分别于室温下放置 0、2.5、5、7.5、10、12.5、
        司）；ME203E 型千分之一电子天平、ME104E 型万分之
                                                           24 h 时按“2.1”项下色谱条件进样测定，以 11-羰基-β-乙
        一电子天平、CP225D型十万分之一电子天平[梅特勒-托
                                                           酰乳香酸峰的保留时间和峰面积为参照，记录各共有峰
        利多仪器（上海）有限公司]。
                                                           的相对保留时间和相对峰面积。结果，15个共有峰相对
        1.2 药品与试剂
                                                           保留时间的 RSD 均小于 0.50％（n＝7），相对峰面积的
            穗花杉双黄酮对照品（批号：111902-201603，纯度：
                                                           RSD均小于1.60％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放
        97.7％）、11-羰基-β-乙酰乳香酸对照品（批号：111760-
        201502，纯度：99.3％）、槲皮素对照品（批号：100081-                 置24 h内基本稳定。
        201610，纯度：99.8％）均购自中国食品药品检定研究院；                    2.3.3  重复性试验       取小金胶囊（批号：170101）内容物
        小金胶囊（健民药业集团股份有限公司，批号：160601、                       适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，共 6 份，再按
        170101、170102、170107、170117、170121、170123、170124、 “2.1”项下色谱条件进样测定，以11-羰基-β-乙酰乳香酸
        170329、170334、170336、170544、170554、170868、171126，  峰的保留时间和峰面积为参照，记录各共有峰的相对保
        编号：S1～S15，规格：0.35 g/粒）；乙腈、甲醇为色谱纯，                  留时间和相对峰面积。结果，15个共有峰相对保留时间
        其余试剂均为分析纯，水为纯化水。                                   的RSD均小于0.19％（n＝6），相对峰面积的RSD均小于
        2 方法与结果                                            2.50％（n＝6），表明本方法重复性良好。
        2.1  色谱条件                                          2.4  HPLC指纹图谱的生成与相似度评价、共有峰的指
            色谱柱：Agilent TC-C18 （2）（250 mm×4.6 mm，5 μm）；    认及相关分析
        流动相：乙腈（A）-0.2％磷酸溶液（B），梯度洗脱（洗脱程
                                                           2.4.1 HPLC 指纹图谱的生成           取 15 批小金胶囊内容
        序见表 1）；流速：1.0 mL/min；检测波长：240 nm；柱温：
                                                           物适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”
        25 ℃；进样量：20 µL。
                                                           项下色谱条件进样测定，采用《中药色谱指纹图谱相似
                       表1   梯度洗脱程序
                                                           度评价系统》（2004 A版）对15批样品的HPLC图谱进行
                 Tab 1  Gradient elution procedure
                                                           分析，得HPLC指纹图谱，详见图1、图2。
        t，min              A，％                  B，％
         0                   10                  90
        30                   30                  70          2 635.59
        40                   35                  65                                                    S15
                                                                                                       S14
        70                   65                  35                                                    S13
        95                   72                  28          1 757.78                                  S12
                                                                                                       S11
        110～135             100                   0         mAU                                        S10
                                                                                                       S9
        136～140              10                  90                                                    S8 S7
                                                              879.97
                                                                                                       S6
        2.2  溶液的制备                                                                                     S5 S4
                                                                                                       S3
        2.2.1  对照品溶液       精密称取穗花杉双黄酮、11-羰                                                             S2
                                                               2.16                                    S1
                                                                  0    20   40    60   80   100  120   140
        基-β-乙酰乳香酸、槲皮素对照品适量，分别加甲醇制
                                                                                    t，min
        成穗花杉双黄酮 50 µg/mL、11-羰基-β-乙酰乳香酸 50                         图1 15批样品的HPLC叠加指纹图谱
        µg/mL、槲皮素50 µg/mL的单一对照品溶液。                         Fig 1 HPLC superposed fingerprints of 15 batches of
        2.2.2  供试品溶液      取小金胶囊内容物适量，研细，精                         samples
        密称定 2 g，置于具塞锥形瓶中，加甲醇 25 mL，称定质
        量，水温25 ℃以下超声（功率：300 W，频率：40 Hz）处理                    879.92
        30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇
        匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。                            mAU  441.04
        2.3 方法学考察
        2.3.1  精密度试验      取“2.2.2”项下供试品溶液（批号：                 2.16
                                                                 0    20   40    60   80   100   120  140
        170101）适量，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，                                            t，min
        以 11-羰基-β-乙酰乳香酸峰的保留时间和峰面积为参                                  图2 样品的HPLC对照指纹图谱
        照，记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结                                  Fig 2 HPLC control fingerprint of sample


        中国药房    2019年第30卷第2期                                               China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2  ·189  ·
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