Page 55 - 2019年1月第30卷第2期

1.40 1 表1 加样回收率试验结果（n＝6）
1.20
1.00 Tab 1 Results of recovery tests（n＝6）
AU 0.80
0.60
0.40 样品含量，mg 加入量，mg 测得量，mg 加样回收率，％ 平均加样回收率，％ RSD，％
0.20
0 1.248 1.230 2.440 96.91 98.97 2.06
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 1.236 1.230 2.446 98.37
t，min
A.对照品溶液 1.228 1.230 2.483 102.03
1.242 1.230 2.432 96.75
0.25 1 1.236 1.230 2.461 99.59
0.20
0.15 1.231 1.230 2.463 100.16
AU 0.10
0.05 2.2 挥发油提取工艺优化
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 2.2.1 挥发油提取与分离 按处方比例称取川芎、白
t，min
B.供试品溶液 术、川椒、细辛 4 味药材，浸泡 15 min 后按 2015 年版《中
[7]
0.070 国药典》（四部）挥发油测定法（甲法） 提取挥发油至挥
0.060
0.050
AU 0.040 发油测定器内体积无变化，静置过夜，用乙醚萃取3次至
0.030
0.020 水层无色，合并乙醚液，加无水硫酸钠脱水，挥发至无乙
0.010
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 醚味，滤过，称定质量，密闭保存。挥发油得率＝挥发油
t，min 质量/药材质量×100％。
C.阴性样品溶液
注：1.藁本内酯 2.2.2 单因素试验 以对病症具有疗效的物质为评价
Note：1. ligustilide 原则，结合各指标的理化性质，选择藁本内酯含量、挥发
图1 高效液相色谱图 油得率为指标，确定浸泡时间（A）、加水量（B）、提取时
Fig 1 HPLC chromatograms 间（C）3个因素的试验范围，结果见表2、表3。
液 5、10、20、30、50 μL，按“2.1.1”项下色谱条件进样测 表2 单因素试验因素与水平
定，记录峰面积。以藁本内酯进样量（x，μg）为横坐标、 Tab 2 Factors and levels of single factor tests
峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得藁本内酯回归方 因素
水平
程为 y＝2×10 x－547.25（r＝0.999 9）。结果表明，藁本 A，min B，倍（mL/g） C，h
6
内酯进样量线性范围为0.4～4 μg。 1 0 8 2
2 15 10 4
2.1.7 精密度试验 取“2.1.2”项下对照品溶液适量，按 3 30 12 6
“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。 4 45 14 8
结果，藁本内酯峰面积的 RSD 为 1.26％（n＝6），表明仪 5 60 16 10
器精密度良好。 表3 单因素试验结果
2.1.8 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液适量，分 Tab 3 Results of single factor tests
别于室温下放置 0、4、8、12、18、24 h 时按“2.1.1”项下色 因素
谱条件进样测定，记录峰面积。结果，藁本内酯峰面积 A B C
水平
的RSD为1.48％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 藁本内酯含 挥发油得 藁本内酯含 挥发油得 藁本内酯含 挥发油得
量，mg/g 率，％ 量，mg/g 率，％ 量，mg/g 率，％
24 h内基本稳定。 1 0.381 2 0.358 2 0.213 2 0.345 5 0.287 9 0.296 2
2.1.9 重复性试验 取各味药材样品适量，共6份，分别 2 0.434 8 0.446 1 0.386 8 0.365 8 0.361 4 0.408 1
按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色 3 0.456 5 0.455 6 0.456 9 0.454 7 0.382 6 0.480 3
4 0.468 7 0.454 3 0.464 3 0.476 3 0.506 7 0.523 7
谱条件进样测定，记录峰面积并计算样品含量。结果，
5 0.485 5 0.451 1 0.385 1 0.401 6 0.480 9 0.421 1
藁本内酯的平均含量为 0.674 0 mg/g，RSD 为 1.82％
由表3可确定3个因素的3个水平依次为：浸泡时间
（n＝6），表明本方法重复性良好。
15、30、45 min，加水量 10、12、14 倍（mL/g），提取时间 4、
2.1.10 加样回收率试验 精密称取已知含量的各味药
6、8 h。
材样品 1.25 mg，共 6 份，分别加入藁本内酯对照品溶液
2.2.3 正交试验设计优化挥发油提取工艺 在单因素
15.38 mL，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按
“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样 试验的基础上，以浸泡时间（A）、加水量（B）、提取时间
回收率，结果见表1。 （C）为考察因素，每个因素取3个不同水平，以藁本内酯
4
2.1.11 样 品 含 量 测 定 取 各 味 药 材 样 品 适 量 ，按 含量、挥发油得率为指标，按L9 （3）正交试验设计进行试
“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱 验，因素与水平见表4，正交试验设计与结果见表5，方差
条件进样测定，平行测定9次，记录峰面积并计算样品含 分析结果见表6（综合评分＝藁本内酯含量/最大藁本内
量。结果，藁本内酯含量范围为0.300 9～1.576 7 mg/g。 酯含量×70％+挥发油得率/最大挥发油得率×30％）。

·194 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2 中国药房 2019年第30卷第2期