Page 47 - 2019年1月第30卷第2期
P. 47

3.3 BV涂膜剂对大鼠脑组织病理学变化和神经细胞存                          形成脑栓塞；Zhang Z等 从大鼠ECA逆行插管至ICA，
                                                                                [19]
        活数的影响                                               在大脑中动脉起始部注入凝血酶诱导血栓形成。目前
            镜下观察可见，假手术组大鼠脑细胞排列整齐，核                          所报道的各种脑血栓动物模型均有其各自的优缺点，其
        仁清晰、核圆形，胞膜完整；模型组大鼠脑组织神经细胞                           中血栓栓塞法制作局灶性脑梗死动物模型更接近人类
        及间质细胞水肿明显，细胞胞体皱缩、变形，细胞及血管                           缺血性卒中病理过程，且不需开颅、创伤小、制作简单、
        周围间隙增大，胞核浓缩着色较深，有神经细胞自溶及                            缺血效果可靠 。脑血栓不是通过单一途径形成的，而
                                                                        [20]
        坏死现象；尼莫地平组大鼠脑组织细胞核清晰，未见明                            是由血管内皮损伤与血管收缩、血小板聚集与释放、纤
        显坏死现象；BV 涂膜剂各剂量组大鼠脑组织细胞核仁                           维蛋白凝固等多种途径共同诱发形成 。研究证实，
                                                                                              [21]
        清晰，胞膜完整，神经细胞及间质细胞仅有轻微水肿。                            ADP可诱导血小板聚集，使小血管及毛细血管通透性升
        存活神经细胞计数结果显示，与假手术比较，模型组大                            高，破坏血脑屏障 ；凝血酶易使血液中的纤维蛋白原
                                                                            [22]
        鼠脑组织存活神经细胞数显著减少，差异有统计学意义                            转变成纤维蛋白，促使血液凝固 ；肾上腺素能促使血
                                                                                        [23]
        （P＜0.01）；与模型组比较，尼莫地平组和 BV 涂膜剂各                      管收缩，增强 ADP 和凝血酶激活血小板的作用，有助于
        剂量组大鼠脑组织神经细胞数均显著增加，差异均有统                            血栓形成 。因此，本课题组综合上述文献方法，采用
                                                                    [24]
        计学意义（P＜0.01）。各组大鼠缺血侧脑组织病理学显                         ADP、凝血酶和肾上腺素作为复合诱导剂，通过结扎
        微图见图3，存活神经细胞数检测结果见表5。                               ECA和PPA、从ICA注射该诱导剂和小血栓子从而诱导

                                                            血栓形成，该造模方法操作简单、缺血效果可靠，能更好
                                                            地模拟人体脑血栓发病的病理生理过程。
                                                                尼莫地平作为一种双氢吡啶类钙离子拮抗剂 ，可
                                                                                                       [25]
                                                            选 择 性 地 作 用 于 脑 血 管 平 滑 肌 ，易 通 过 血 脑 屏 障
            A.假手术组            B.模型组         C.尼莫地平组        （BBB），与中枢神经的特异性受体结合，从而扩张脑血
                                                            管，增加脑血流量，减轻脑水肿，降低血液流变学各项指
                                                            标 [26-27] 。因此本研究选择尼莫地平作为阳性药物进行灌
                                                            胃给药，用以验证模型是否成功建立。
                                                                BBB是一种高度选择性渗透屏障，脑缺血性损伤过
         D.BV涂膜剂低剂量组      E.BV涂膜剂中剂量组     F.BV涂膜剂高剂量组                                 [28]
        图 3   各组大鼠缺血侧脑组织病理学显微图（HE 染色，                       程中 BBB 表现为通透性破坏 。EB 作为一种荧光染
                                                            料，在 BBB 被破坏后易进入脑组织。同时，缺血后脑组
              40×10）
                                                            织缺血缺氧，可使 BBB 的通透性升高，进而引起脑水
        Fig 3  Histopathological micrographs of brain tissue
                                                            肿。因此，通过测定脑组织中 EB 含量可反映脑血管的
               in ischemic side of rats in each group（HE stain-
                                                            通透性，测定右脑/左脑湿质量比可反映脑组织水肿程
               ing，40×10）
                                                            度。本研究结果显示，建立大鼠脑血栓模型后，模型组
        表5    各组大鼠缺血侧脑组织存活神经细胞数检测结果
                                                            大鼠的右脑/左脑湿质量比显著高于假手术组，表明模型
             （x±±s）
                                                            组大鼠右侧脑组织发生明显水肿；注射EB后，模型组大
        Tab 5  Results of the number of alive neuron cells of
                                                            鼠右侧脑组织染成蓝色，颅底颜色较深，而左侧脑组织
               brain tissue in ischemic side of rats in each
                                                            未见蓝染，且模型组大鼠右脑中 EB 含量明显高于左脑
               group（x±±s）
                                                            并高于假手术组同侧组织。这表明在本研究条件下，大
        组别             n        剂量，mg/kg   存活神经细胞数，个/mm 2
        假手术组           8                     214.00±24.64   鼠右侧脑梗死模型成功建立。而给予不同剂量的BV涂
        模型组            6                      83.75±15.80 ＊＊  膜剂进行干预后，大鼠右脑/左脑湿质量比和右脑组织中
        尼莫地平组          8          4.00       130.75±10.02 ##  的 EB 含量都较模型组显著降低，且肉眼观察可见其右
        BV涂膜剂低剂量组      8          1.67       121.25±14.40 ##  侧脑组织蓝染面积明显缩小。这提示BV涂膜剂能抑制
        BV涂膜剂中剂量组      8          3.33       122.63±4.34 ##
        BV涂膜剂高剂量组      6          6.67       123.25±15.42 ##  复合诱导剂诱导的大鼠脑血栓形成，减轻脑水肿并抑制
                                            ##
                          ＊＊
            注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.01                 脑血管通透性的增加。
                                  ＊
                                                     ##
            Note：vs. sham operation group， P＜0.05；vs. model group，P＜  血栓形成后会导致血液循环障碍，使全身或局部的
        0.01
                                                            血流速度减慢，在局部形成涡流，并使血液凝血功能异
                                                                                      [29]
        4 讨论                                                常、血液流变学各项指标异常 。本研究结果显示，与
            血栓性疾病严重危害着人类健康和生命，而对于血                          假手术组比较，模型组大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细
        栓性疾病的研究，有效的动物模型是必不可少的。例如                            胞聚集指数、卡松黏度和 FIB 含量均显著升高，PT 明显
                 [18]
        Kudo M等 采用颈内动脉注入自体血栓凝块诱导动物                          缩短，表明脑血栓模型大鼠的血液呈现高黏稠状态。而
        ·186  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2                                   中国药房    2019年第30卷第2期
   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52