Page 32 - 2019年1月第30卷第2期

range of piperitylmagnolol was 3.91-500.00 ng/mL. The limit of quantitation was 3.91 ng/mL. RSDs of intra-day and inter-day were
less than 10％ . The accuracy ranged 87.40％ -103.75％ . Matrix effect didn’t affect the determination of the substance to be
measured. The piperitylmagnolol was metabolized significantly in human，rat，mouse and dog liver microsomes，but not in monkey
liver microsomes. After incubating for 30 min，residual percentage of piperitylmagnolol kept stable in different species of liver
microsomes. The t1/2 of piperitylmagnolol were 12.07，17.68，17.59，216.56 and 61.88 min in human，rat，mouse，monkey and
dog liver microsomes；CLint were 0.115，0.078，0.079，0.006，0.022 mL/（min·mg），respectively. Inhibitory rates of CYP2A6，
CYP2D6，CYP2C19，CYP3A4，CYP2C9，CYP2E1 and CYP1A2 to compound metabolism were 55.76％，93.94％，96.01％，
93.69％，71.81％，23.25％，28.04％，respectively. Quasi-molecular ion peaks of the two main metabolites of piperitylmagnolol in
+
human liver microsomes were m/z 441.2（[M+Na]）and m/z 337.2（[M+H]），respectively. CONCLUSIONS：Established UPLC-MS/
+
MS method is simple，rapid and specific，and can be used for the determination of piperitylmagnolol concentration in the
incubation system of liver microsomes and pharmacokinetic study. The metabolic characteristics of the compound are different
among liver microsomes of human，rat，mouse，monkey and dog. Its metabolism process may be associated with CYP2D6，
CYP2C19，CYP3A4，CYP2C9，etc.
KEYWORDS Piperitylmagnolol； Different species； Liver microsomes； Metabolic stability in vitro； Metabolic enzyme；
Metabolites

木脂素类（Lignans）化合物由于其多样的结构和生 与其代谢的主要同工酶和主要代谢产物，旨在获取辣薄
物活性一直是目前研究的热点领域之一 。相关研究指 荷基厚朴酚的体外代谢特征，为其后续研究提供参考。
[1]
出，该类化合物具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、保肝及抑制 1 材料
血小板活化因子等药理作用 。辣薄荷基厚朴酚（Piperi- 1.1 仪器
[2]
tylmagnolol，化学结构式见图1）最早被发现于木兰科植 UPLC 系统，含 SIL-30AC 型自动进样器、LC-30AD
物厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils.）的干燥干皮、 型色谱仪、CBM-20A型系统控制器、CTO-20AC型柱温箱
[4]
[3]
枝皮及根皮中 ，具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化等活性 ，属 （日本Shimadzu公司）；SCIEX QTRAP 5500型三重四级
于木脂素中的新木脂素类化合物。Youn UJ 等 研究发 杆MS仪（美国AB公司）；AL204型电子天平[梅特勒-托
[5]
现，辣薄荷基厚朴酚对宫颈癌细胞HeLa、慢性髓系白血
利多仪器（上海）有限公司]；Heraeus Fresco 17型高速离
病细胞 K562、非小细胞肺癌细胞 A549 和结肠癌细胞
心机（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）；S0200-230 型
HCT116 等多种人肿瘤细胞具有一定的体外抑制活性，
涡旋混合仪（上海迪奥生物科技有限公司）；Milli Q型超
[6]
其半数抑制浓度（IC50 ）为 7.7～9.5 μg/mL；Syu WJ 等 研
纯水系统（美国Merck Millipore公司）。
究表明，辣薄荷基厚朴酚和厚朴酚对耐万古霉素肠球菌
1.2 药品与试剂
（VRE）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）等耐药
辣薄荷基厚朴酚对照品（批号：20170323，纯度：＞
菌株均有一定的体外抑制作用，其最低抑制浓度（MIC）
99％）、厚朴酚对照品（内标，批号：20161103，纯度：＞99％）
为 6.25～25 μg/mL，且辣薄荷基厚朴酚的抑菌效果更
均由四川大学生物治疗国家重点实验室提供；人肝微粒
好。由此可见，该化合物具有一定的开发价值。
体（批号：M10001-2017002，质量浓度：20 mg/mL）、大鼠
肝微粒体（批号：M10011-2017002，质量浓度：20 mg/mL）、
小鼠肝微粒体（批号：M10017-2017002，质量浓度：20
OH HO
mg/mL）、猴肝微粒体（批号：M10005-2017002，质量浓
度：20 mg/mL）、犬肝微粒体（批号：M10007- 2017002，质
量浓度：20 mg/mL）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
（NADPH）孵育系统{含 A 液[β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
图1 辣薄荷基厚朴酚的化学结构式 磷酸钠盐、葡萄糖-6-磷酸、氯化镁水溶液，批号：NRS
Fig 1 Chemical structure of piperitylmagnolol （A）2017001]、B 液[葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、柠檬酸钠溶

与体内代谢研究相比，体外代谢研究具有操作简单 液，批号：NRS（B）2017001]}均购自武汉普莱特生物医
方便、经济高效、检测多样化的特点，更适用于新药代谢 药 技 术 有 限 公 司 ；硝 酸 毛 果 芸 香 碱 对 照 品（批 号 ：
[7]
特征的早期评价 。目前，国内外对于辣薄荷基厚朴酚 100157-200201，纯度：供含量测定用）、盐酸噻氯匹定对
的相关研究尚少，为进一步明确其开发价值，本研究以 照品（批号：100542-201002，纯度：＞99.7％）均由中国食
超高效液相色谱-串联质谱技术（UPLC-MS/MS）为检测 品药品检定研究院提供；奎尼丁对照品[梯希爱（上海）
手段，初步考察了该化合物在5个不同种属（人、大鼠、小 化成工业发展有限公司，批号：KVZTE-LQ，纯度：＞
鼠、猴、犬）肝微粒体中的体外代谢稳定性，并预测了参 98％]；酮康唑对照品（德国 Dr Ehrenstorfer 公司，批号：

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