Page 27 - 2019年1月第30卷第2期

The relative expression of NF-κB p65 and Cav-1 were increased significantly，while the relative expression of eNOS was decreased
significantly（P＜0.01）. Compared with model group，the serum levels of TC，TG and LDL-C in administration groups，the serum
levels of IL-6 and VCAM-1 in simvastatin group and TPHXP high-dose group were decreased significantly，while the serum levels
of HDL-C and NO were increased significantly in administration groups （P＜0.05 or P＜0.01）. In administration groups，the
plaques of thoracic aorta were reduced and the corrected plaque area was decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）；the relative
expression of NF-κB p65 and Cav-1 were decreased significantly，while the relative expression of eNOS was increased significantly
（P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：TPHXP can regulate the level of blood lipid，decrease the level of inflammatory factors
and inhibit the formation of AS plaque，the mechanism of which may be associated with inhibiting Cav-1/NF-κB pathway.
KEYWORDS Tiaopi huxin prescription；Atherosclerosis；Blood lipid；Inflammatory factor；Cav-1；NF-κB；Mice

动脉粥样硬化（AS）是众多心脑血管疾病共同的病 UV-6100S 型分光光度计（上海元析仪器有限公司）；
理基础，严重危害人类身体健康 [1-2] 。近年来，炎症学说 AL-204 型电子天平（德国 Sartorius 公司）；GT-10 型高速
的提出和建立为 AS 的研究指明了方向。Ross R 在其 离心机（北京时代北利离心机有限公司）；Ⅸ71型荧光倒
[3]
损伤反应学说的基础上指出，AS实为一种炎症性疾病， 置显微镜（日本 Olympus 公司）；WD-9413A 型凝胶成像
炎症始终贯穿于该症的发生、发展和演变过程中。目 仪（广州深华生物技术有限公司）。
前，临床AS常规治疗药物以他汀类为主，其能显著降低 1.2 药品与试剂
患者心血管事件的发生率，是临床防治这类疾病的重要 调脾护心方颗粒[广东省中医院自制，批号：20160512，
药物。然而现有研究发现，长期使用他汀类药物可能会 规格：1 g（含人参0.19 g、半夏0.09 g、橘红0.15 g、丹参0.19
增加肝酶升高和肌病发生的风险，导致 AS 患者的治疗 g、三七0.19 g、藿香0.19 g）]；辛伐他汀片[Merck Sharp &
[4]
效果欠佳 。临床实践证明，中医药在防治AS等疾病方 Dohme（Australia）Pty. Ltd.，，批号：20160623，规格：20
面具有毒副作用小、疗效显著等优势，同时还可显著降 mg]；白细胞介素6（IL-6）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）
[5]
低血脂水平、减少动脉斑块、抑制AS的进展 。因此，寻 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（英国 Abcam 公司，
求防治AS的中医药疗法、探究中医药抗AS机制具有重 批号分别为 20161101、20160613）；人抗鼠 NF-κB p65、
要意义。 Cav-1、eNOS 抗体和兔抗鼠二抗（美国 R&D Systems 公
小窝蛋白1（Cav-1）是位于小窝上的标志蛋白，在细 司，批号分别为20170113、20161203、20160314、20160413）；
[6]
胞信号转导过程中具有枢纽作用 。Cav-1 可通过影响 甘油醛-3-硫酸脱氢酶（GAPDH）抗体（内参）、5％牛血清
内皮一氧化氮合酶（eNOS）的活性来调控机体一氧化氮 蛋白（BSA）封闭液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐（TBST）
[7]
（NO）的合成，从而发挥对炎症信号转导的调节作用 。 溶液（上海钰博生物科技有限公司，批号分别为20170106、
NO 是血管保护的信号分子，其可通过抑制核因子κB 20161123、20161025）；免疫印迹化学发光（ECL）试剂盒
[8]
（NF-κB）这一炎症相关因子的活性来抑制AS的形成 。 （上海炎熙生物科技有限公司，批号：20161012）；血脂生
由此可见，AS的形成可能与Cav-1/NF-κB这一条炎症通 化检测试剂盒、NO（硝酸酶还原法）试剂盒（上海信裕生
路的激活有关。调脾护心方是根据邓铁涛教授以“心脾 物科技有限公司，批号分别为 20160825、20160524）；其
相关”核心理论为基础所创制的冠心病治疗经验方，含 余试剂均为分析纯，水为超纯水。
人参、半夏、橘红、丹参、三七、藿香等6味药材，具调脾护 1.3 动物与饲料
心、益气除痰之功效 。该方治疗 AS 的临床疗效较好， SPF 级雄性 ApoE－/－小鼠 40 只，2 月龄，体质量
[9]
[10]
可有效抑制 AS 合并糖代谢异常患者的炎症反应 ；此 20～25 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供
外，本课题组前期动物实验表明，调脾护心方可调节载 [动物生产许可证号：SCXK（京）2012-0001]。高脂饲料
脂蛋白基因敲除（ApoE－/－）小鼠血管内皮依赖性舒张 （含 3％胆固醇、1％胆盐、10％猪油、5％蛋黄粉、81％基
[11]
功能，降低其血管内皮脂肪的堆积，提高NO水平 。然 础饲料）由广东省医学实验动物中心提供。
而调脾护心方抗 AS 的作用机制及相关通路尚未明确。 2 方法
为此，本研究拟以Cav-1/NF-κB通路为突破口，初步探讨 2.1 分组、造模与给药
调脾护心方发挥抗 AS 炎症反应的可能机制，以期为该 将所有ApoE－/－小鼠适应性喂养7 d后，随机分为
方的临床应用提供参考。 5组，即空白组、模型组、辛伐他汀组（阳性对照，5 mg/kg，
1 材料 根据小鼠体表面积按人用临床剂量的10倍换算而得）以
1.1 仪器 及调脾护心方低、高剂量组（50、150 mg/kg，参照前期预
Filter Max F3 型全自动酶标仪（美国 Molecular De- 实验结果，并根据小鼠体表面积按人用临床剂量的5、15
vices 公司）；AU5800 型全自动生化分析仪（美国 Beck- 倍换算而得），每组8只。空白组小鼠给予普通饲料，其
man Coulter 公司）；402T 型电泳仪（美国 CBS 公司）； 余各组小鼠均给予高脂饲料以复制 AS 模型。造模后，

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