Page 46 - 《中国药房》2026年9期
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泳,再电转移至 PVDF 膜;将膜置于 5% 脱脂奶粉溶液 b b b
b b b
中,室温封闭 1.5 h,然后滴加 NCOA4、FTH1、ATG8、 25 a b 800 a b 100 a b
SLC7A11、GPX4、β-tubulin一抗(稀释比例均为1∶1 000) ( mmol/L ) 20 ( U/L ) 600 ( ng/L ) 80
15
60
于4 ℃孵育过夜。次日,加入二抗(稀释比例为1∶10 000) 10 LDH/ 400 CK-MB/ 40
孵育1 h,最后通过ECL化学发光系统显影。所有Western FBG/ 5 200 20
0 0 0
blot 实验均进行 3 次独立生物学重复,所得免疫印迹条 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
A. FBG B. LDH水平 C. CK-MB水平
带采用 Image J 软件进行分析,以目标蛋白与内参蛋白
Ⅰ:对照组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:DMDD低剂量组;Ⅳ:DMDD中剂量
(β-tubulin)条带灰度值的比值表示目标蛋白的表达 组;Ⅴ:DMDD高剂量组;a:与对照组比较,P<0.001;b:与模型组比
水平。 较,P<0.001。
2.10 统计学方法 图1 各组小鼠 FBG 及血清中 LDH、CK-MB 水平比较
采用 SPSS 22.0 统计软件进行分析,所有计量资料 (x±s,n=6)
均满足正态分布,以 x±s 表示,多组间比较采用单因素
化;与对照组比较,模型组小鼠心肌组织可见散在的蓝
方差分析,进一步两两比较采用 LSD-t 检验。检验水准
色胶原纤维沉积;与模型组比较,DMDD 各剂量组小鼠
α=0.05。
心肌纤维化程度得到明显改善。结果见图2。
3 结果
3.3 DMDD对小鼠心肌细胞超微结构的影响
3.1 DMDD对小鼠FBG及心肌损伤指标的影响
对照组小鼠心肌细胞超微结构完整,线粒体形态正
与对照组比较,模型组小鼠 FBG 及血清中 LDH、
常、嵴结构清晰,核膜光滑,未见明显病理改变;与对照
CK-MB 水平均显著升高(P<0.001);与模型组比较,
DMDD各剂量组小鼠FBG及血清中LDH、CK-MB水平 组比较,模型组小鼠心肌细胞核膜皱缩,线粒体排列紊
均显著降低(P<0.001)。结果见图1。 乱,部分线粒体肿胀、变性,线粒体嵴结构紊乱;与模型
3.2 DMDD对小鼠心肌病理变化及纤维化程度的影响 组比较,DMDD各剂量组小鼠心肌细胞超微结构均有不
HE染色结果显示,对照组小鼠心肌组织形态正常, 同程度改善。结果见图3。
细胞染色均匀;与对照组比较,模型组小鼠心肌细胞着 3.4 DMDD对小鼠心肌细胞死亡的影响
色不均,可见明显断裂、损伤及大量炎症细胞浸润;与模 与对照组比较,模型组小鼠心肌细胞死亡指数显著
型组比较,DMDD 各剂量组小鼠心肌组织损伤减轻,细 升高(P<0.001);与模型组比较,DMDD 各剂量组小鼠
胞着色趋于均匀。Masson染色结果显示,对照组小鼠心 心肌细胞死亡指数均显著降低(P<0.001)。结果见图
肌组织结构完整,肌纤维排列紧密有序,未见明显纤维 4、图5。
HE染色
Masson染色
对照组 模型组 DMDD低剂量组 DMDD中剂量组 DMDD高剂量组
图2 各组小鼠心肌组织HE和Masson染色的显微图(标尺:100 μm)
对照组 模型组 DMDD低剂量组 DMDD中剂量组 DMDD高剂量组
图3 各组小鼠心肌细胞超微结构透射电镜显微图(标尺:5 μm)
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