Page 46 - 《中国药房》2026年9期
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泳,再电转移至 PVDF 膜;将膜置于 5% 脱脂奶粉溶液                                 b               b               b
                                                                      b                b               b
          中,室温封闭 1.5 h,然后滴加 NCOA4、FTH1、ATG8、                   25  a  b         800  a  b       100  a  b
          SLC7A11、GPX4、β-tubulin一抗(稀释比例均为1∶1 000)              ( mmol/L )  20  ( U/L )  600    ( ng/L )  80
                                                               15
                                                                                                60
          于4 ℃孵育过夜。次日,加入二抗(稀释比例为1∶10 000)                      10              LDH/  400       CK-MB/  40
          孵育1 h,最后通过ECL化学发光系统显影。所有Western                      FBG/  5          200             20
                                                                0                0               0
          blot 实验均进行 3 次独立生物学重复,所得免疫印迹条                           Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ    Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ   Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ
                                                                     A. FBG         B. LDH水平       C. CK-MB水平
          带采用 Image J 软件进行分析,以目标蛋白与内参蛋白
                                                                 Ⅰ:对照组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:DMDD低剂量组;Ⅳ:DMDD中剂量
         (β-tubulin)条带灰度值的比值表示目标蛋白的表达                         组;Ⅴ:DMDD高剂量组;a:与对照组比较,P<0.001;b:与模型组比
          水平。                                                 较,P<0.001。
          2.10 统计学方法                                          图1 各组小鼠 FBG 及血清中 LDH、CK-MB 水平比较
              采用 SPSS 22.0 统计软件进行分析,所有计量资料                        (x±s,n=6)
          均满足正态分布,以 x±s 表示,多组间比较采用单因素
                                                              化;与对照组比较,模型组小鼠心肌组织可见散在的蓝
          方差分析,进一步两两比较采用 LSD-t 检验。检验水准
                                                              色胶原纤维沉积;与模型组比较,DMDD 各剂量组小鼠
          α=0.05。
                                                              心肌纤维化程度得到明显改善。结果见图2。
          3 结果
                                                              3.3 DMDD对小鼠心肌细胞超微结构的影响
          3.1 DMDD对小鼠FBG及心肌损伤指标的影响
                                                                  对照组小鼠心肌细胞超微结构完整,线粒体形态正
              与对照组比较,模型组小鼠 FBG 及血清中 LDH、
                                                              常、嵴结构清晰,核膜光滑,未见明显病理改变;与对照
          CK-MB 水平均显著升高(P<0.001);与模型组比较,
          DMDD各剂量组小鼠FBG及血清中LDH、CK-MB水平                        组比较,模型组小鼠心肌细胞核膜皱缩,线粒体排列紊
          均显著降低(P<0.001)。结果见图1。                               乱,部分线粒体肿胀、变性,线粒体嵴结构紊乱;与模型
          3.2 DMDD对小鼠心肌病理变化及纤维化程度的影响                          组比较,DMDD各剂量组小鼠心肌细胞超微结构均有不
              HE染色结果显示,对照组小鼠心肌组织形态正常,                         同程度改善。结果见图3。
          细胞染色均匀;与对照组比较,模型组小鼠心肌细胞着                            3.4 DMDD对小鼠心肌细胞死亡的影响
          色不均,可见明显断裂、损伤及大量炎症细胞浸润;与模                               与对照组比较,模型组小鼠心肌细胞死亡指数显著
          型组比较,DMDD 各剂量组小鼠心肌组织损伤减轻,细                          升高(P<0.001);与模型组比较,DMDD 各剂量组小鼠
          胞着色趋于均匀。Masson染色结果显示,对照组小鼠心                         心肌细胞死亡指数均显著降低(P<0.001)。结果见图
          肌组织结构完整,肌纤维排列紧密有序,未见明显纤维                            4、图5。



            HE染色







            Masson染色




                    对照组                模型组              DMDD低剂量组           DMDD中剂量组            DMDD高剂量组
                              图2 各组小鼠心肌组织HE和Masson染色的显微图(标尺:100 μm)










                  对照组                 模型组              DMDD低剂量组            DMDD中剂量组            DMDD高剂量组
                                图3 各组小鼠心肌细胞超微结构透射电镜显微图(标尺:5 μm)


          · 1144 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 9                              中国药房  2026年第37卷第9期
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