Page 77 - 《中国药房》2026年8期

表5 各组细胞中 Notch1、Hes1 和 Prdx1 蛋白表达比较
Beclin-1 60 kDa
（x±s，n＝6）
组别 Notch1/β-actin Hes1/β-actin Prdx1/β-actin
16 kDa
LC3-Ⅱ/Ⅰ 正常对照组 0.82±0.07 0.78±0.06 0.88±0.07
14 kDa
模型组 0.21±0.03 a 0.17±0.03 a 0.15±0.02 a
TFRD组 0.56±0.06 b 0.58±0.05 b 0.54±0.04 b
PINK1 66 kDa
TFRD+si-NC组 0.52±0.05 0.59±0.05 0.51±0.05
TFRD+si-Prdx1组 0.54±0.03 0.61±0.06 0.33±0.04 c
β-actin 42 kDa a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与
TFRD+si-NC组比较，P＜0.05。
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 胞死亡 [13—14] 。故而笔者推测TFRD可能通过特异性调控
Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：TFRD组；Ⅳ：TFRD+si-NC组；
Ⅴ：TFRD+si-Prdx1组。 Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ等自噬关键节点，将LPS诱导的异常
图4 各组细胞 Beclin-1、LC3-ⅡⅡ/ⅠⅠ和 PINK1 蛋白表达 自噬引导或转化为一种促生存型的保护性自噬流，从而
的电泳图 有效清除细胞内毒性物质，进而抑制凋亡进程。此外，
表3 各组细胞 MDC 荧光强度和 Beclin-1、LC3-ⅡⅡ/ⅠⅠ、 本研究结果进一步表明，TFRD 通过下调软骨代谢中关
PINK1蛋白表达比较（x±s，n＝6） 键分解代谢酶 MMP-13 和 ADAMTS5，上调软骨细胞合
组别 MDC荧光强度 Beclin-1/β-actin LC3-Ⅱ/Ⅰ/β-actin PINK1/β-actin 成蛋白 COMP 抑制软骨破坏、促进软骨合成修复，进而
正常对照组 87.16±15.23 0.23±0.03 0.12±0.02 0.35±0.04
模型组 225.33±25.16 a 0.57±0.05 a 0.31±0.03 a 0.52±0.05 a 改善软骨代谢稳态。另外，本研究的剂量筛选实验表
TFRD组 387.36±25.39 b 0.88±0.06 b 0.62±0.04 b 0.89±0.07 b 明，所选用的 200 μg/mL TFRD 对正常软骨细胞活性无
TFRD+si-NC组 405.78±27.69 0.91±0.05 0.65±0.06 0.94±0.06 负面影响，排除了其非特异性作用对实验结果解读的干
TFRD+si-Prdx1组 305.26±21.45 c 0.71±0.06 c 0.43±0.04 c 0.74±0.05 c
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与 扰，从而证实TFRD对自噬与凋亡的调控作用主要是在
TFRD+si-NC组比较，P＜0.05。 LPS诱导的病理状态下特异性触发的。

表4 各组细胞中MMP-13、ADAMTS5、COMP含量比 研究证实，Notch1/Hes1 信号轴影响骨髓间充质干
较（x±s，n＝6） 细胞的成骨分化，从而对骨质疏松症等骨代谢相关疾病
组别 MMP-13/（pg/mL） ADAMTS5/（pg/mL） COMP/（ng/mL） 发挥调控作用 [6―7] 。该信号轴下游分子Prdx是细胞内重
正常对照组 50.32±5.12 38.65±3.15 168.39±11.39
模型组 204.36±18.45 a 157.69±11.36 a 45.36±5.12 a 要的氧化还原信号调控通路，作为重要的抗氧化蛋白，
TFRD组 95.36±8.62 b 70.36±5.12 b 120.36±10.12 b Prdx1 可通过清除过氧化氢等活性氧，维持线粒体膜电
TFRD+si-NC组 99.64±7.39 74.28±6.19 115.69±8.12 位稳定，减少氧化应激损伤，在上游Notch1/Hes1信号与
TFRD+si-Prdx1组 158.61±12.16 c 110.39±9.67 c 78.19±6.15 c
下游自噬/凋亡之间起到了关键的桥梁作用 [15―16] 。本研
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与
TFRD+si-NC组比较，P＜0.05。 究以 Notch1/Hes1 信号轴及其下游分子 Prdx1 作为探讨
TFRD 发挥 OA 治疗潜力的主要研究方向，结果显示，
Notch1 120 kDa
LPS 处理后 C28/I2 细胞中 Notch1、Hes1 和 Prdx1 蛋白表
达水平均显著降低，提示在 OA 发展过程中，Notch1/
Hes1 30 kDa
Hes1 信号轴及其下游分子 Prdx1 活性被抑制。值得注
意的是，这一抑制作用与文献报道中 Notch1/Hes1 信号
Prdx1 22 kDa
轴在骨髓间充质干细胞中促进成骨分化的作用 [6―7] 及
Prdx1依赖BMP信号影响软骨细胞肥大的作用 有所不
[17]
β-actin 42 kDa
同。这种差异提示，Notch1/Hes1/Prdx1信号轴的功能可
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：TFRD组；Ⅳ：TFRD+si-NC组； 能具有细胞类型特异性，其在软骨退变中的作用值得深
Ⅴ：TFRD+si-Prdx1组。 入探讨。本研究中，TFRD 干预显著逆转了 LPS 引起的
图5 各组细胞中 Notch1、Hes1 和 Prdx1 蛋白表达的电 Notch1、Hes1和Prdx1蛋白表达下调，证明TFRD能够在
泳图 软骨细胞中激活 Notch1/Hes1 信号轴及其下游分子

致细胞死亡的类型，而是发挥了保护作用。结合文献报 Prdx1，这可能是其发挥软骨保护作用的关键机制。为
道，自噬在细胞过程中具有双重作用，适度的保护性自 了进一步证实该机制，本研究设计了 Prdx 基因敲除实
噬可通过清除受损的细胞器和错误折叠的蛋白质来维 验，结果显示，Prdx1敲除后，TFRD的保护作用明显被削
持细胞稳态，而过度或失调的自噬则可能引发自噬性细 弱的同时，并未影响 Notch1 和 Hes1 表达，表明 Prdx1 位

中国药房 2026年第37卷第8期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 8 · 1031 ·