Page 76 - 《中国药房》2026年8期

3.5 TFRD 对 LPS 处理后 C28/I2 细胞中 Notch1/Hes1
XIAP 53 kDa
信号轴相关蛋白表达的影响
与正常对照组比较，模型组 C28/I2 细胞中 Notch1、
PARP1 116 kDa
Hes1 和 Prdx1 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。与
模型组比较，TFRD 组 C28/I2 细胞中 Notch1、Hes1 和
β-actin 42 kDa
Prdx1 蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。与 TFRD+
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：TFRD组；Ⅳ：TFRD+si-NC组； si-NC 组比较，TFRD+si-Prdx1 组 C28/I2 细胞中 Prdx1 蛋
Ⅴ：TFRD+si-Prdx1组。 白表达水平显著降低（P＜0.05），表明 Prdx 敲低成功。
图2 各组细胞中XIAP和PARP1蛋白表达的电泳图 结果见图5、表5。

表2 各组细胞凋亡率、凋亡细胞占比和 XIAP、PARP1 4 讨论
蛋白表达比较（x±s，n＝6） OA 的主要病理特征是关节软骨的持续性降解，其
组别 细胞凋亡率/% 凋亡细胞占比/% XIAP/β-actin PARP1/β-actin 发病机制涉及炎症反应、细胞外基质代谢失调以及软骨
正常对照组 5.12±0.45 7.65±0.11 0.84±0.07 0.12±0.02 [3]
模型组 33.19±3.05 a 40.12±4.06 a 0.21±0.02 a 0.87±0.05 a 细胞功能异常等多个环节 。本研究以LPS诱导C28/I2
TFRD组 11.26±1.36 b 15.82±1.26 b 0.59±0.04 b 0.20±0.03 b 细胞构建体外炎症损伤模型，模拟OA的临床发病过程，
TFRD+si-NC组 12.09±2.03 17.04±1.30 0.57±0.05 0.22±0.02 该模型已被广泛应用于软骨保护的多个药物筛选和研
TFRD+si-Prdx1组 20.16±2.12 c 28.67±2.45 c 0.40±0.03 c 0.56±0.04 c [9]
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与 究中 。本研究结果显示，LPS诱导后，软骨细胞凋亡率
TFRD+si-NC组比较，P＜0.05。 和凋亡细胞占比均显著升高，自噬标志物（如MDC荧光
3.3 TFRD 对 LPS 处理后 C28/I2 细胞自噬及其相关蛋 强度、Beclin-1及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达）显著增加，同时软
白表达的影响 骨基质分解代谢酶（MMP-13、ADAMTS5）水平亦显著
与正常对照组比较，模型组 C28/I2 细胞 MDC 荧光 升高而合成代谢标志物（COMP）水平显著降低。这些
强度和 Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、PINK1 蛋白表达水平均显 变化提示 OA 细胞模型构建成功，同时也提示在 LPS 诱
导的病理环境下，细胞自噬不足以完全清除损伤，进而
著升高（P＜0.05）。与模型组比较，TFRD组C28/I2细胞
触发凋亡程序以维持组织稳态，二者的动态平衡失衡可
MDC 荧光强度和 Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、PINK1 蛋白表达
能是软骨细胞损伤的关键病理基础。
水平均显著升高（P＜0.05）。与 TFRD+si-NC 组比较，
TFRD 是骨碎补的主要活性成分，可减轻 OA 软骨
TFRD+si-Prdx1 组 C28/I2 细胞 MDC 荧光强度和 Beclin-
[10]
退变和细胞凋亡 ，以及促进骨形成并抑制骨吸收，从
1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、PINK1 蛋白表达水平均显著降低（P＜
[11]
而改善骨质疏松 。本研究结果显示，TFRD 处理可降
0.05）。结果见图3、图4、表3。
低LPS诱导的C28/I2细胞凋亡率，同时增强细胞自噬水
3.4 TFRD 对 LPS 处理后 C28/I2 细胞软骨基质代谢相
平，其中凋亡被抑制的直观表现是 C28/I2 细胞凋亡率、
关因子水平的影响
凋亡细胞占比均显著降低，其次是 DNA 损伤修复调控
与正常对照组比较，模型组 C28/I2 细胞中 MMP-
蛋白 PARP1 表达水平显著降低，XIAP 表达水平显著升
13、ADAMTS5 含量均显著升高，COMP 含量显著降低 高。TFRD 可通过上调 MDC 荧光强度以及 Beclin-1、
（P＜0.05）。 与 模 型 组 比 较 ，TFRD 组 C28/I2 细 胞 中 LC3-Ⅱ/Ⅰ、PINK1自噬蛋白表达水平，有效增强软骨细
MMP-13、ADAMTS5含量均显著降低，COMP含量显著 胞的自噬水平。这一结果与研究中 β-羟基丁酸酯通过
升 高（P＜0.05）。 与 TFRD+si-NC 组 比 较 ，TFRD+si- 增强软骨细胞自噬抑制凋亡发挥 OA 保护作用相似 。
[12]
Prdx1组C28/I2细胞中MMP-13、ADAMTS5含量均显著 值得注意的是，本研究结果显示，TFRD干预后细胞自噬
升高，COMP含量显著降低（P＜0.05）。结果见表4。 增强伴随凋亡抑制，提示TFRD诱导的自噬可能并非导

A.正常对照组 B.模型组 C. TFRD组 D. TFRD+si-NC组 E. TFRD+si-Prdx1组
图3 各组细胞自噬体MDC染色的荧光图

· 1030 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 8 中国药房 2026年第37卷第8期