Page 81 - 《中国药房》2026年5期

2.2.4 小鼠肿瘤组织中上皮间质转化和 MAPK 信号通 2.4.2 柴芪益肝颗粒对小鼠肿瘤组织中Ki-67蛋白表达
路相关蛋白表达检测 的影响
取“2.2.2”项下各组 3 只小鼠的肿瘤组织 50 mg，加 与模型组比较，索拉非尼组和柴芪益肝颗粒各剂量
入预冷的 RIPA 裂解液以及蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑 组小鼠肿瘤组织中Ki-67蛋白表达水平均显著降低（P＜
制剂进行超声裂解，提取总蛋白；采用 BCA 法检测蛋 0.05）。结果见图3。
白浓度，并将蛋白进行变性处理；取变性后蛋白进行十
二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，经转膜、封闭
后 ，加 入 N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、MMP7、p-
p38 MAPK、p38 MAPK、JNK、p-JNK、ERK1/2、p-ERK1/
2、GAPDH 一抗（稀释度均为 1∶1 000），于 4 ℃孵育过
夜；以 TBST 洗涤后加入相应二抗（稀释度为 1∶3 000）， A.模型组 B.索拉非尼组 C.柴芪益肝颗粒低剂量组
60
室温孵育 1 h；以 TBST 洗涤后，加入 ECL 试剂进行显 40
影，经凝胶成像系统成像后，采用 Image J 软件分析蛋 阳性面积占比/% 20 a a a a
白灰度值。以目的蛋白与内参蛋白（GAPDH）的灰度 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
值比值表示目的蛋白的表达水平；以 p-p38 MAPK 与 F.各组小鼠肿瘤组织中
Ki-67蛋白表达水平
p38 MAPK、p-JNK 与 JNK、p-ERK1/2 与 ERK1/2 的表达 D.柴芪益肝颗粒中剂量组 E.柴芪益肝颗粒高剂量组 （x±s，n＝3）
水平比值，表示 p38 MAPK、JNK、ERK1/2 蛋白的磷酸 Ⅰ：模型组；Ⅱ：索拉非尼组；Ⅲ：柴芪益肝颗粒低剂量组；Ⅳ：柴芪
益肝颗粒中剂量组；Ⅴ：柴芪益肝颗粒高剂量组；a：与模型组比较，P＜
化水平。
0.05。
2.3 统计学方法
图3 各组小鼠肿瘤组织中Ki-67蛋白的表达情况
采用SPSS 26.0软件进行统计分析。数据服从正态
分布时以 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析， 2.4.3 柴芪益肝颗粒对小鼠肿瘤组织中 MAPK 信号通
方差齐时组间两两比较采用 LSD-t 检验，方差不齐时组 路相关蛋白表达的影响
间两两比较采用Dunnett’s T3检验。检验水准α＝0.05。 与模型组比较，索拉非尼组和柴芪益肝颗粒高剂量
2.4 结果 组小鼠肿瘤组织中 ERK1/2、JNK 蛋白磷酸化水平均显
2.4.1 柴芪益肝颗粒对小鼠肿瘤组织病理学形态的 著降低（P＜0.05）；索拉非尼组和柴芪益肝颗粒各剂量
影响 组小鼠肿瘤组织中p38 MAPK蛋白磷酸化水平均升高，
模型组小鼠肿瘤组织中肿瘤细胞密集，形态相对 但差异无统计学意义（P＞0.05）。结果见图4。
一致，核大深染，未见明显坏死区域，提示肿瘤细胞较
p-p38 MAPK 38 kDa 2.0
为活跃，生长状态旺盛。与模型组相比，索拉非尼组 p38 MAPK 38 kDa 1.5
p-ERK1/2 39 kDa
和柴芪益肝颗粒各剂量组小鼠肿瘤组织中肿瘤细胞
ERK1/2 39 kDa p-p38 MAPK/p38 MAPK 1.0
密 度 降 低 ，坏 死 区 域 逐 渐 增 多 且 范 围 扩 大 。 结 果 p-JNK 46 kDa 0.5
见图 2。 JNK 44 kDa
GAPDH 37 kDa 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ B. p38 MAPK蛋白磷酸化
A.蛋白表达电泳图 0.5 水平（x±s，n＝3）
1.5
（ ERK1/2 ） / 1.0 a 0.4 a a
0.3
（ p-ERK1/2 ） 0.5 a p-JNK/JNK 0.2
A.模型组 B.索拉非尼组 C.柴芪益肝颗粒低剂量组 0.1
0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
C. ERK1/2蛋白磷酸化 D. JNK蛋白磷酸化水平
水平（x±s，n＝3） （x±s，n＝3）
Ⅰ：模型组；Ⅱ：索拉非尼组；Ⅲ：柴芪益肝颗粒低剂量组；Ⅳ：柴芪
益肝颗粒中剂量组；Ⅴ：柴芪益肝颗粒高剂量组；a：与模型组比较，P＜
D.柴芪益肝颗粒中剂量组 E.柴芪益肝颗粒高剂量组 0.05。
图2 各组小鼠肿瘤组织的病理学形态观察结果（HE 图4 各组小鼠肿瘤组织中 MAPK 信号通路相关蛋白
染色） 的表达情况

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