Page 46 - 《中国药房》2026年5期
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法操作,采用酶标仪分别于450、550 nm波长处检测线粒                       长/增加(P<0.05)。结果见图2。
          体呼吸酶Ⅱ(即琥珀酸脱氢酶)及Ⅳ(即细胞色素C氧化
          酶)的吸光度,计算相应酶活性。实验重复4次。
          2.2.5 细胞中Drp1磷酸化水平检测
              取HT22细胞,按“2.2.2”项下方法分组、造模与给药
          干预;干预48 h后收集细胞,加入裂解液裂解后,于4 ℃
          条件下以12 000 r/min离心10 min,收集上清液,提取总                       正常对照组            模型组           艾塞那肽组
                                                                               A.第5天游泳轨迹图
          蛋白;采用BCA法测定蛋白浓度,再将蛋白进行变性处                            100
          理。取变性后蛋白样品,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯                              80                        25
          酰胺凝胶电泳,再转膜至PVDF膜上,以5%脱脂牛奶封                            60                       ( cm/s )  20
          闭 2 h;加入 p-Drp1、Drp1、β-actin 一抗(稀释度分别为               逃避潜伏期/s  40                15
                                                                                          10
          1∶1 000、1∶1 000、1∶5 000),于 4 ℃孵育过夜;以 TBST             20   正常对照组               游泳速度/  5
                                                                     模型组
                                                                     艾塞那肽组
          洗膜后,加入相应二抗(稀释度为1∶8 000)室温孵育1 h;                                                  0
                                                                0                            正常对   模型组  艾塞那
                                                                  第1天       第2天     第3天        第4天  照组   肽组
          以 TBST 洗膜后,采用 ECL 试剂显色,经凝胶成像系统
                                                                       B.逃避潜伏期                   C.游泳速度
          成像后,采用Image J软件分析蛋白灰度值,以目的蛋白                          6                         50
          与内参蛋白(β-actin)的灰度值比值表示目的蛋白的表达                         4                         40
          水平,以 p-Drp1 与 Drp1 的表达水平比值表示 Drp1 的磷                 穿越目标平台次数/次                目标象限停留时间/s  30
                                                                                          20
          酸化水平。实验重复4次。                                          2                         10
          2.3 统计学方法                                             0                          0
                                                                  正常对   模型组  艾塞那             正常对   模型组  艾塞那
                                                                   照组         肽组              照组         肽组
              采用SPSS 20.0软件进行统计分析,实验数据以x±s
                                                                   D.穿越目标平台次数                 E.目标象限停留时间
          表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步组间两                               a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
          两比较采用SNK-q检验。检验水准α=0.05。                               图2 各组小鼠认知功能考察结果(x±s,n=8)
          3 结果
                                                              3.1.3 艾塞那肽对db/db小鼠海马组织中氧化应激指标
          3.1 动物实验结果
                                                              的影响
          3.1.1 艾塞那肽对db/db小鼠体重及血糖的影响                              与正常对照组比较,模型组小鼠海马组织中 MDA
              与正常对照组比较,模型组小鼠在实验周期内体重                          水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH 水平均显著降低
          和空腹血糖水平均显著升高(P<0.05),呈现典型的糖                        (P<0.05);与模型组比较,艾塞那肽组小鼠海马组织中
          尿病表型。艾塞那肽干预8周后,与模型组比较,艾塞那                           MDA 水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH 水平均显著
          肽组小鼠体重和空腹血糖水平均显著降低(P<0.05)。                         升高(P<0.05)。结果见表1。
          结果见图1。                                              表1 各组小鼠海马组织中MDA、GSH、SOD 水平比较

            60                       40                           (x±s,n=6)
                                                                                         GSH/nmol
                                                                                                      SOD/U
            40                      ( mmol/L )  30            组别            MDA/nmol     4.55±1.05  463.17±58.66
                                                                            7.08±0.81
                                                              正常对照组
           体重/g                      20  正常对照组                模型组           9.55±1.30 a  2.82±0.69 a  298.33±60.69 a
            20                      空腹血糖/  模型组                艾塞那肽组         7.69±1.14 b  4.97±0.76 b  411.67±83.34 b
                          正常对照组      10  艾塞那肽组
                          模型组                                    a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
                          艾塞那肽组
            0                        0                        3.1.4 艾塞那肽对 db/db 小鼠海马组织中 cAMP、PKA
              第0周    第2周  第4周    第6周     第8周  第0周    第2周  第4周    第6周     第8周
                    A.体重变化                 B.空腹血糖变化           水平的影响
             a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。                   与正常对照组比较,模型组小鼠海马组织中cAMP、
            图1 各组小鼠血糖和体重的检测结果(x±s,n=8)
                                                              PKA水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,艾塞那
          3.1.2 艾塞那肽对db/db小鼠认知功能的影响                           肽组小鼠海马组织中cAMP、PKA水平均显著升高(P<
              与正常对照组比较,模型组小鼠的逃避潜伏期显著                          0.05)。结果见表2。
          延长(P<0.05),游泳速度、目标象限停留时间和穿越目                        3.2 细胞实验结果
          标平台次数均显著减慢/缩短/减少(P<0.05);与模型组                       3.2.1 艾塞那肽对细胞中氧化应激指标和 cAMP、PKA
          比较,艾塞那肽组小鼠的逃避潜伏期显著缩短(P<                             水平的影响
          0.05),目标象限停留时间和穿越目标平台次数均显著延                             与对照组比较,高糖组细胞中MDA水平显著升高,


          · 592 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 5                               中国药房  2026年第37卷第5期
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