Page 46 - 《中国药房》2026年5期
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法操作,采用酶标仪分别于450、550 nm波长处检测线粒 长/增加(P<0.05)。结果见图2。
体呼吸酶Ⅱ(即琥珀酸脱氢酶)及Ⅳ(即细胞色素C氧化
酶)的吸光度,计算相应酶活性。实验重复4次。
2.2.5 细胞中Drp1磷酸化水平检测
取HT22细胞,按“2.2.2”项下方法分组、造模与给药
干预;干预48 h后收集细胞,加入裂解液裂解后,于4 ℃
条件下以12 000 r/min离心10 min,收集上清液,提取总 正常对照组 模型组 艾塞那肽组
A.第5天游泳轨迹图
蛋白;采用BCA法测定蛋白浓度,再将蛋白进行变性处 100
理。取变性后蛋白样品,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯 80 25
酰胺凝胶电泳,再转膜至PVDF膜上,以5%脱脂牛奶封 60 ( cm/s ) 20
闭 2 h;加入 p-Drp1、Drp1、β-actin 一抗(稀释度分别为 逃避潜伏期/s 40 15
10
1∶1 000、1∶1 000、1∶5 000),于 4 ℃孵育过夜;以 TBST 20 正常对照组 游泳速度/ 5
模型组
艾塞那肽组
洗膜后,加入相应二抗(稀释度为1∶8 000)室温孵育1 h; 0
0 正常对 模型组 艾塞那
第1天 第2天 第3天 第4天 照组 肽组
以 TBST 洗膜后,采用 ECL 试剂显色,经凝胶成像系统
B.逃避潜伏期 C.游泳速度
成像后,采用Image J软件分析蛋白灰度值,以目的蛋白 6 50
与内参蛋白(β-actin)的灰度值比值表示目的蛋白的表达 4 40
水平,以 p-Drp1 与 Drp1 的表达水平比值表示 Drp1 的磷 穿越目标平台次数/次 目标象限停留时间/s 30
20
酸化水平。实验重复4次。 2 10
2.3 统计学方法 0 0
正常对 模型组 艾塞那 正常对 模型组 艾塞那
照组 肽组 照组 肽组
采用SPSS 20.0软件进行统计分析,实验数据以x±s
D.穿越目标平台次数 E.目标象限停留时间
表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步组间两 a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
两比较采用SNK-q检验。检验水准α=0.05。 图2 各组小鼠认知功能考察结果(x±s,n=8)
3 结果
3.1.3 艾塞那肽对db/db小鼠海马组织中氧化应激指标
3.1 动物实验结果
的影响
3.1.1 艾塞那肽对db/db小鼠体重及血糖的影响 与正常对照组比较,模型组小鼠海马组织中 MDA
与正常对照组比较,模型组小鼠在实验周期内体重 水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH 水平均显著降低
和空腹血糖水平均显著升高(P<0.05),呈现典型的糖 (P<0.05);与模型组比较,艾塞那肽组小鼠海马组织中
尿病表型。艾塞那肽干预8周后,与模型组比较,艾塞那 MDA 水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH 水平均显著
肽组小鼠体重和空腹血糖水平均显著降低(P<0.05)。 升高(P<0.05)。结果见表1。
结果见图1。 表1 各组小鼠海马组织中MDA、GSH、SOD 水平比较
60 40 (x±s,n=6)
GSH/nmol
SOD/U
40 ( mmol/L ) 30 组别 MDA/nmol 4.55±1.05 463.17±58.66
7.08±0.81
正常对照组
体重/g 20 正常对照组 模型组 9.55±1.30 a 2.82±0.69 a 298.33±60.69 a
20 空腹血糖/ 模型组 艾塞那肽组 7.69±1.14 b 4.97±0.76 b 411.67±83.34 b
正常对照组 10 艾塞那肽组
模型组 a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
艾塞那肽组
0 0 3.1.4 艾塞那肽对 db/db 小鼠海马组织中 cAMP、PKA
第0周 第2周 第4周 第6周 第8周 第0周 第2周 第4周 第6周 第8周
A.体重变化 B.空腹血糖变化 水平的影响
a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 与正常对照组比较,模型组小鼠海马组织中cAMP、
图1 各组小鼠血糖和体重的检测结果(x±s,n=8)
PKA水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,艾塞那
3.1.2 艾塞那肽对db/db小鼠认知功能的影响 肽组小鼠海马组织中cAMP、PKA水平均显著升高(P<
与正常对照组比较,模型组小鼠的逃避潜伏期显著 0.05)。结果见表2。
延长(P<0.05),游泳速度、目标象限停留时间和穿越目 3.2 细胞实验结果
标平台次数均显著减慢/缩短/减少(P<0.05);与模型组 3.2.1 艾塞那肽对细胞中氧化应激指标和 cAMP、PKA
比较,艾塞那肽组小鼠的逃避潜伏期显著缩短(P< 水平的影响
0.05),目标象限停留时间和穿越目标平台次数均显著延 与对照组比较,高糖组细胞中MDA水平显著升高,
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