Page 51 - 《中国药房》2026年5期
P. 51
2 方法 述细胞数均显著减少(P<0.05)。
2.1 QDP的制备
准确称量冬青叶480 g、丹参320 g、北沙参320 g、甘
草 160 g、沙棘 160 g、苦杏仁 160 g、天竺黄 80 g,混合后
用10倍量80%乙醇煎煮1 h,过滤;滤渣再用8倍量80%
乙醇煎煮1 h,过滤;合并2次滤液,减压浓缩得七味冬青
叶散浸膏(得率为12.33%)。 A.空白组 B.模型组 C. QDP低剂量组
2.2 分组、造模、给药与取材
将84只小鼠适应性饲养7 d后,随机分为空白组、模
[13]
型组、地塞米松组(阳性对照,2 mg/kg )和QDP低、中、
高剂量组(200、400、800 mg/kg,以生药量计,剂量分别相
当于临床等效剂量的0.5、1、2倍),每组14只。除空白组
外,其余各组小鼠于第 1 天和第 14 天腹腔注射 0.2 mL D. QDP中剂量组 E. QDP高剂量组 F.地塞米松组
注:黑色箭头所指为淋巴细胞;蓝色箭头所指为巨噬细胞;红色箭
OVA 致敏液(将 100 mg OVA、2 mg 氢氧化铝溶于 200
头所指为中性粒细胞。
mL生理盐水中制备而成)致敏;再于第27天至第34天, 图1 小鼠BALF中的细胞染色观察结果(瑞氏-吉姆萨
将小鼠置于含有1% OVA(将500 mg OVA溶于50 mL生 染色)
理盐水制备而成)的超声雾化器中气道刺激 30 min,以
表1 小鼠 BALF 中不同细胞数量比较(x±s,n=8,
[13]
此复制支气管哮喘模型 。空白组则同步腹腔注射与
×10 mL )
4
-1
雾化吸入等体积的生理盐水。若气道刺激过程中造模
组别 总细胞数 淋巴细胞 中性粒细胞 巨噬细胞数
小鼠出现搔鼻、腹部惊厥等症状,则表明造模成功。造
空白组 5.11±0.58 3.13±0.58 1.01±0.24 0.97±0.30
模同时,于第21天至第34天,QDP各剂量组小鼠灌胃相 模型组 17.41±0.54 a 7.30±0.74 a 5.32±0.45 a 4.79±0.51 a
应药液;地塞米松组小鼠腹腔注射相应药液,空白组和 QDP低剂量组 11.38±1.09 b 5.34±0.82 b 3.22±0.55 b 2.82±0.52 b
QDP中剂量组 7.71±0.92 b 4.36±0.41 b 2.12±0.32 b 1.23±0.37 b
模型组小鼠灌胃和注射等体积生理盐水;每天给药1次。
QDP高剂量组 6.02±0.64 b 3.66±0.25 b 1.26±0.36 b 1.11±0.13 b
整个过程中,模型组死亡3只小鼠,QDP低剂量组死亡2 地塞米松组 6.13±0.65 b 4.02±0.31 b 1.18±0.48 b 0.93±0.11 b
只小鼠,地塞米松组死亡1只小鼠,其余组无死亡。 a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
末次给药后次日,麻醉各组小鼠,尾静脉采血并制 2.4.2 气管和肺组织的病理学形态观察
备血清。取血完成后,暴露小鼠颈部气管,经气管向肺 取“2.2”项下固定于 4% 多聚甲醛中的气管和肺组
部注射0.4 mL生理盐水,重复3次,收集到1 mL肺泡灌 织(每组取6只小鼠的气管和肺组织)适量,经脱水处理
洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF);然后处死小
后包埋于石蜡中,再进行切片(厚度为5 μm);取部分切
鼠,剖取气管和肺组织,取部分气管和肺组织以4%多聚
片(剩余切片进行免疫组化染色)进行苏木素-伊红(HE)
甲醛固定 24 h,用于病理学形态观察,剩余肺组织置于
染色,再置于显微镜下观察气管和肺组织的病理损伤及
液氮中保存备用。 炎症细胞浸润情况。结果(图2)显示,与空白组相比,模
2.3 统计学方法
型组小鼠肺组织细胞排列紊乱,伴随大量炎症细胞浸
采用 GraphPad Prism 9.5 软件进行统计学分析,数
润;肺部血管和气管壁明显增厚,支气管单层柱状上皮
据以 x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一
细胞脱落增多;与模型组相比,QDP 各剂量组和地塞米
步两两比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
2.4 常规指标检测和肺组织、气管病理学形态观察 松组小鼠肺组织细胞排列趋于正常,炎症细胞浸润减
轻,支气管单层柱状上皮细胞脱落减少。
2.4.1 BALF中的细胞观察
2.4.3 肺组织中MDA、NO、T-SOD、GSH-Px水平检测
各组分别取 8 只小鼠的 BALF 适量,于 4 ℃条件下
各组取 8 只小鼠的肺组织适量,加入适量生理盐水
以 3 000 r/min 离心 10 min;取沉淀物用生理盐水重悬,
用组织研磨机研磨,得肺组织匀浆;于 4 ℃下以 3 500
吸取10 μL混悬液置于显微镜下观察并进行BALF中总
细胞计数。另吸取20 μL混悬液均匀涂于载玻片上,根 r/min 离心 10 min,取上清液;根据相应试剂盒说明书方
据试剂盒说明书方法操作进行瑞氏-吉姆萨染色,然后 法操作,检测小鼠肺组织中 MDA、NO、T-SOD、GSH-Px
置于显微镜下观察,对细胞(包括中性粒细胞、淋巴细 水平。结果(表2)显示,与空白组比较,模型组小鼠肺组
胞、巨噬细胞)进行分类并计数。结果(图1、表1)显示, 织中 MDA、NO 水平均显著升高,T-SOD、GSH-Px 水平
与空白组比较,模型组 BALF 中总细胞数、中性粒细胞 均显著降低(P<0.05);与模型组比较,QDP 中、高剂量
数、淋巴细胞数和巨噬细胞数均显著增加(P<0.05)。 组和地塞米松组小鼠肺组织中MDA、NO水平均显著降
与模型组比较,QDP各剂量组和地塞米松组BALF中上 低,T-SOD、GSH-Px水平均显著升高(P<0.05)。
中国药房 2026年第37卷第5期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 5 · 597 ·

