Page 33 - 《中国药房》2026年4期
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serum  of  the  Qingre  huatan  huoxue  decoction  at  concentrations  of  10,  50,  and  100  μg/mL,  along  with  atorvastatin,  significantly
          reduced apoptosis rates, CD86 fluorescence intensity, and TNF-α and IL-1β levels in RAW264.7 cells, while markedly enhancing
          CD206  fluorescence  intensity (P<0.05).  Animal  experiment  results  showed  that,  compared  with  the  model  group,  all  dosage
          groups of Qingre huatan huoxue decoction and the atorvastatin group showed significantly reduced/down-regulated levels of TNF-α
          and IL-1β in serum, along with decreased aortic total and root plaque percentages, CD86 expression, and iNOS protein expression.
          CD206 expression and Arg-1, p-AMPK/AMPK, PPAR-γ protein expression were significantly up-regulated (P<0.05). Pathological
          morphology  of  the  aorta  showed  varying  degrees  of  improvement.  CONCLUSIONS  The  formula  of  Qingre  huatan  huoxue
          decoction  exerts  its  anti-AS  effects  by  regulating  macrophage  polarization,  increasing  the  proportion  of  M2  macrophages,  thereby
          effectively inhibiting AS plaque formation and reducing inflammatory responses.
          KEYWORDS    Qingre huatan huoxue decoction; macrophage polarization; atherosclerosis; AMPK/PPAR-γ signaling pathway


              动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种由多因素              1.2 主要药品与试剂
          参与、发病机制复杂的慢性炎症性动脉疾病,其病理特                               金银花、蒲公英、连翘、瓜蒌、川芎、丹参、红花、赤芍
          征主要为脂质沉积在血管内壁形成 AS 斑块,是多种心                         饮片均购自江西九州堂中药饮片有限公司,批号分别为
                                [1]
          血管疾病的主要病理基础 。目前临床针对 AS 的治疗                         230115、220427、230225、230701、220111、220801、230402、
          手段虽可在一定程度上改善患者症状,但总体疗效仍不                           220211,均由赣南医科大学第一附属医院药学部副主任
          理想。AS 属于中医学“胸痹心痛”“痰瘀”等范畴,病机                        中药师李德平博士鉴定为真品;10%胎牛血清、0.25%胰
          常因气滞、血瘀、痰凝等实邪阻滞,导致热毒内蕴、灼伤                          酶、DMEM 培养基(货号分别为 26010074、2472358、
                                                  [2]
          脉络,以致络脉拘挛不通、五脏虚损,故发此病 。基于                          C11995500BT)均购自美国 Gibco 公司;磷酸盐缓冲液
          此,临床常采用清热解毒、活血化瘀法治疗AS。清热化                         (phosphate-buffered saline,PBS)和肿瘤坏死因子 α(tu‐
                                [3]
          痰活血方是参考相关文献 报道的方剂改良而来,由金                           mor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 1β(interleu‐
          银花、蒲公英、连翘、瓜蒌、川芎、丹参、红花、赤芍8味中                        kin-1β,IL-1β)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(批号
          药组成,且该文献报道,该方具有解毒清热、活血化瘀的                          分别为C0221a、PT512、PI301)均购自上海碧云天生物技
          功效,能够显著改善冠心病支架术后患者的临床症状并                           术股份有限公司;CCK-8试剂盒(批号TR688)购自日本
          减轻其炎症反应,提升临床治疗效果,但具体作用机制                           Dojindo 公 司 ;Annexin  Ⅴ/PI 凋 亡 检 测 试 剂 盒(批 号
          尚未明确。                                              1271578)和 CD86、CD206 荧 光 抗 体(批 号 分 别 为
              巨噬细胞作为 AS 进程中主要参与的免疫细胞,与                       2389535、2365408)均购自美国 BD 公司;CD86 抗体、
          其发生发展关系密切 。巨噬细胞的 M1/M2 极化具有                        CD206抗体及辣根过氧化物酶标记的二抗(批号分别为
                            [4]
          动态可塑性,二者在 AS 不同阶段可相互转化,是调控                         DF6332、DF4149、DF6171)均购自美国 eBiosciences 公
          AS 进展的关键机制之一 。诱导型一氧化氮合酶(in‐                        司;iNOS、Arg-1、AMPK、磷酸化 AMPK(phosphorylated
                               [5]
          ducible nitric oxide synthase,iNOS)是 M1 型巨噬细胞极     AMPK,p-AMPK)、PPAR-γ、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gly-
          化的重要标志性因子,精氨酸酶 1(arginase-1,Arg-1)是                ceraldehyde-3-phosphate  dehydrogenase,GAPDH)抗 体
          M2型巨噬细胞的标志性因子 。巨噬细胞极化受AMP                         (货号分别为 ab178945、ab60176、ab32382、ab133448、
                                   [6]
          激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/过        ab68206、ab9485)及辣根过氧化物酶标记的二抗(货号
          氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-              ab6721)均购自英国Abcam公司。
          activated receptor γ,PPAR-γ)等多种信号通路的调控,并           1.3 细胞与动物
          参与缓解炎症性疾病 。本文在此基础上,基于巨噬细                               巨噬细胞系RAW264.7购自北京ATCC细胞库。20
                            [7]
          胞极化探究清热化痰活血方抗 AS 的作用机制,旨在为                         只SPF级体重180~220 g的雄性Wistar大鼠,50只6~8
          AS的治疗提供参考依据。                                       周龄、体重 20~23 g 的雄性载脂蛋白 e 基因缺乏(apoli‐
          1 材料                                               poprotein E-deficient,ApoE )小鼠,以及10只同标准雄
                                                                                    -/-
          1.1 主要仪器                                           性 C57BL/6J 小鼠,均购自湖南斯莱克景达实验动物有
              本研究所用主要仪器包括BD115型CO2培养箱(德                      限公司,生产许可证号为SCXK(湘)2024-0009。
          国Binder公司)、MC-101型倒置显微镜和SYNERGYH1                  2 方法
          型酶标仪(美国 BioTek 公司)、FACSCalibur 型流式细胞               2.1 清热化痰活血方药液制备
          仪(美国 BD 公司)、Megafuge8R 型高速冷冻离心机(美                      按清热化痰活血方的处方量称取金银花10 g、蒲公
          国 Thermo Fisher Scientific 公司)、VORTEX2S025 型涡      英 12 g、连翘 10 g、瓜蒌 12 g、川芎 12 g、丹参 10 g、红花
          旋振荡器(德国 IKA 公司)、Mini-PROTEAN Tetra 型蛋              10 g、赤芍10 g,由赣南医科大学第一附属医院中药房代
          白电泳系统(美国Bio-Rad公司)。                                煎浓缩成2 g/mL(以生药量计,下同)的药液。


          中国药房  2026年第37卷第4期                                                 China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 4    · 439 ·
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