Page 59 - 《中国药房》2026年3期

mRNAs in dorsal root ganglion （DRG） tissue. RESULTS After 28 days of drug administration， compared with the model group，
Xibining Ⅱ low- and high-dose groups exhibited significantly prolonged cold-stimulus paw withdrawal latency （P＜0.05）； the
number of positive responses in the acetone low-temperature test was significantly reduced （P＜0.05）； Mankin score and the
Osteoarthritis Research Society International score for knee joint tissue， as well as the levels of inflammatory factors and pain
mediators in the serum and their expression in DRG tissue were all significantly decreased （P＜0.05）； the protein expressions of
SETDB2 and H3K9me3 in DRG tissue were significantly increased （P＜0.05）. Intrathecal injection of SETDB2 siRNA reversed the
above effects of high-dose of Xibining Ⅱ （P＜0.05）. CONCLUSIONS Xibining Ⅱ may alleviate inflammatory and pain responses
by activating the SETDB2/H3K9me3 signaling axis， ultimately improving cold-stimulus pain sensitivity in rats with cold-damp
obstruction-type KOA.
KEYWORDS Xibining Ⅱ； knee osteoarthritis； cold-damp obstruction-type； pain sensitivity； SETDB2/H3K9me3 signaling axis

膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）是一种常见 宁Ⅱ方治疗寒湿痹阻型KOA的临床应用提供更充分的
的慢性退行性关节疾病，以关节炎症和软骨退化为主要 实验依据。
病理特征，常在疾病进展至终末期时导致膝关节结构破 1 材料
[1]
坏与功能障碍 。其中，反复发作的慢性疼痛是KOA最 1.1 主要仪器
常见的临床症状，也是导致患者就医的主要原因之一， 本研究所用的主要仪器包括：BME404 型行为学检
其不仅给患者带来身体上的痛苦，也给社会造成了沉重 测有机玻璃室（中国医学科学院生物医学工程研究所）、
[2]
的经济负担 。目前，以塞来昔布为代表的非甾体抗炎 35150-001 型大小鼠冷热盘痛觉测试仪（意大利 Ugo
药是临床缓解 KOA 慢性疼痛的常用药物，但长期使用 Basile 公司）、LAS 4000 型凝胶成像发光系统（美国 GE
[3]
易发生胃肠道、心血管及肾脏等相关不良反应 。相较 公司）、ABI 7500型实时荧光定量-聚合酶链式反应（RT-
于化学药，中药复方以整体观和辨证论治为指导，具有 PCR）仪（美国 ABI 公司）、170-3930 型凝胶电泳及转膜
多成分、多靶点的作用特点，在缓解关节疼痛、改善关节 仪（美国 Bio-Rad 公司）、ELX 800 型酶标仪（美国 Bio-
功能方面具有潜在优势。 Tek公司）等。
中医学将 KOA 归属于“痹证”范畴，并将其分为寒 1.2 主要药品与试剂
湿痹阻型、痰瘀痹阻型及肝肾亏虚型等证型。其中，寒 本研究所用的主要药品与试剂有：苏木精-伊红
湿痹阻型 KOA 最常见，其核心病理表现为“遇寒加重， （HE）染色试剂盒、番红-固绿染色试剂盒（北京索莱宝科
得热则缓”，因此降低冷刺激疼痛敏感性是此类KOA治 技有限公司，批号分别为G1120-100、G1371），兔源肿瘤
[4]
疗的关键，也是当前临床亟待攻克的难题 。膝痹宁Ⅱ方 坏死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介
是江苏省名中医王培民教授基于KOA“本虚标实”的病 素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、β-肌动蛋白（β-actin）一抗
因病机，并结合其多年治疗寒湿痹阻型 KOA 的临床经 （武汉三鹰生物技术有限公司，批号分别为29652-1-AP、
验所创立的中药复方，以温经活血类药物为核心组成， 26048-1-AP、20536-1-AP），SETDB2、H3K9me3、神经生
在改善 KOA 患者膝关节功能、缓解关节冷刺激疼痛等 长因子（nerve growth factor，NGF）、降钙素基因相关肽
方面疗效显著 ，但该方缓解寒湿痹阻型KOA冷刺激疼 （calcitonin gene-related peptide，CGRP）一抗（武汉爱博
[5]
痛敏感性的具体作用机制尚不明确。 泰克生物科技有限公司，批号分别为 A7391、A22295、
SET 域分叉组蛋白赖氨酸甲基转移酶 2（SET do‐ A14216、A5542），辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫
main bifurcated histone lysine methyltransferase 2， 球蛋白G（IgG）二抗（美国APExBIO公司，批号K1223），
SETDB2）主要通过催化组蛋白H3第9位赖氨酸三甲基 大 鼠 IL-1β、TNF- α、NGF、CGRP 酶 联 免 疫 吸 附 试 验
化修饰（histone H3 lysine 9 trimethylation，H3K9me3）发 （ELISA）试剂盒和 BCA 蛋白测定试剂盒（美国 Thermo
[6]
挥重要的细胞调节功能 。近期研究发现，H3K9me3 缺 Fisher Scientific 公 司 ，批 号 分 别 为 BMS630TEN、
失可激活内源性逆转录病毒，与骨关节炎（osteoarthritis， KRC3011、ERNGF、EEL226、A55864），RNA快速提取试
OA）的发生发展相关；而增强 H3K9me3 表达能够缓解 剂盒、无蛋白快速封闭液（武汉赛维尔生物科技有限公
[7]
OA 相关炎症 。另有研究表明，SETDB2/H3K9me3 信 司，批号分别为 G3607-50T、G2052），PCR 试剂盒（南京
号轴与代谢紊乱相关的无菌性炎症及组织修复过程密 诺唯赞生物科技股份有限公司，批号R222-01）。
切相关 [8―9] 。在 KOA 中，膝关节内的无菌性炎症是导致 SETDB2 的 小 干 扰 RNA（small interfering RNA，
[10]
疼痛和软骨损伤的核心环节 。因此，本研究基于 siRNA）（上游引物序列为 5′-GGAUCGAGACCUUAG-
SETDB2/H3K9me3 信号轴探讨膝痹宁Ⅱ方改善寒湿痹 UGUUTT-3′，下游引物序列为 5′-AACACUAAGGU-
阻型 KOA 冷刺激疼痛敏感性的作用机制，旨在为膝痹 CUCGAUCCTT-3′）及其等量的对照 siRNA（上游引物

中国药房 2026年第37卷第3期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 · 325 ·