Page 56 - 《中国药房》2026年3期
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进ROS生成及脂质过氧化发生。TfR1负责介导细胞外
               GPX4                               33 kDa
                                                              铁离子内流，其表达上调会增加细胞的铁负荷；FTH1则
               TfR1                               38 kDa
                                                              负责将游离铁离子贮存于铁蛋白中，其表达下调会导致
               FTH1                               12 kDa
                                                              游离铁离子释放量增加；上述蛋白的表达失衡会直接引
               β-actin                            42 kDa
                                                                                             [20]
                     Ⅰ    Ⅱ    Ⅲ    Ⅳ    Ⅴ     Ⅵ              发细胞内铁超载，进而诱发铁死亡 。本研究结果显
                             A.铁死亡相关蛋白
                                                              示，与 si-NC 组相比，si-GPX4 组细胞中总铁离子含量及
               MCU                                35 kDa
                                                              线粒体内超氧化物的表达水平均显著升高，同时 TfR1
                ANT                               33 kDa
                                                              蛋白表达显著上调，FTH1 蛋白表达显著下调；经中、高
               CypD                               38 kDa
                                                              浓度 DXQ 干预后，细胞中总铁离子含量及线粒体内超
               CytC                               12 kDa
               β-actin                            42 kDa      氧化物的表达水平均显著降低，TfR1 蛋白表达显著下
                     Ⅰ    Ⅱ    Ⅲ    Ⅳ    Ⅴ    Ⅵ               调，FTH1蛋白表达显著上调，提示癫痫清颗粒能通过调
                             B. MPTP相关蛋白
             Ⅰ：si-NC组；Ⅱ：si-GPX4组；Ⅲ：CsA组；Ⅳ：DXQ-H组；Ⅴ：DXQ-       控铁离子外流并增强铁蛋白贮存能力，降低细胞内铁负
          M组；Ⅵ：DXQ-L组。                                        荷，进而抑制细胞铁死亡。
          图4 各组细胞中铁死亡、MPTP相关蛋白表达的电泳图                              作为铁和氧化代谢的主要细胞器，线粒体对铁死亡

          型的坏死样改变（如细胞肿胀、质膜破裂），与以膜起泡                           具有明显影响。铁死亡会导致线粒体形态异常、三磷酸
          和收缩为特征的凋亡细胞形成鲜明对比；从生化机制层                            腺苷生成减少、线粒体膜电位变化、铁积累及脂质过氧
                                                                                [21]
          面看，铁死亡表现为致死剂量的铁依赖性脂质过氧                              化加重等一系列变化 。MPTP 是线粒体膜功能、铁死
            [16]
          化 。同时，有研究指出，在正常情况下，由铁离子-芬顿                          亡调控的关键结构，具有维持线粒体膜电位稳定、钙稳
          反应驱动的 ROS 爆发与以 GSH/GPX4 通路为核心的抗                     态及能量代谢平衡的作用；当 GPX4 表达下调或发生氧
          氧化系统处于动态平衡状态，从而维持细胞和生物体的                            化应激时，MPTP会过度开放，直接导致线粒体膜电位崩
          稳态；而当机体处于感染或炎症等病理环境时，这种微                            塌、基质成分泄漏、ROS大量生成，进而破坏细胞内铁离
                                                                                             [22]
                                                    [17]
          妙的平衡可能被打破，进而导致细胞发生铁死亡 。研                            子稳态，诱导小胶质细胞发生铁死亡 。此外，MPTP的
          究指出，GPX4在铁死亡过程中具有关键调控作用，其功                          开放受CypD、ANT、MCU、CytC等蛋白的协同调控。其
          能是将脂质过氧化物转化为无毒的脂质醇，从而抑制脂                            中 CypD 是 MPTP 的关键激活因子，其表达上调会促进
                                                                       [20]
          质过氧化反应 。最新研究表明，GPX4 可通过清除细                          MPTP开放 ；ANT是MPTP的结构核心，其表达下调会
                       [18]
                                                                                              [23]
          胞内过氧化物、维持细胞存活来预防铁死亡；GPX4缺失                          削弱线粒体对MPTP开放的抑制能力 ；MCU负责介导
          或功能障碍会导致细胞内过氧化物积累，最终引发铁死                            钙离子进入线粒体，其表达上调会导致线粒体钙超载，
                                                                           [24]
          亡；此外，作为抗氧化系统的关键组成部分，GSH/GPX4                        间接激活 MPTP ；CytC 的释放与 MPTP 的开放密切相
                                                                                                   [25]
          通路在防止脂质过氧化介导的铁死亡中具有重要意义，                            关，其表达上调意味着 MPTP 开放程度降低 。本研究
                                                 [19]
          其中 GPX4 可作为调控铁死亡的关键节点 。鉴于                           结果显示，与 si-NC 组相比，si-GPX4 组细胞 MPTP 开放
          GPX4在铁死亡中的重要作用及其在多种疾病生理病理                           程度显著升高——CypD 蛋白及其mRNA、MCU 蛋白表
          过程中的研究价值，本课题组采用小干扰 RNA 转染联                          达均显著上调，ANT、CytC蛋白表达均显著下调，线粒体
          合铁死亡诱导剂诱导构建小胶质细胞铁死亡模型，结果                            膜电位显著减低；经中、高浓度DXQ干预后，细胞MPTP
          显示，与 si-NC 组相比，si-GPX4 组细胞中 GPX4 mRNA               开放程度显著降低——CypD 蛋白及其mRNA、MCU 蛋
          及蛋白的表达均显著下调，同时细胞中GSH含量同步下                           白表达均显著下调，ANT、CytC蛋白（含DXQ-L组）表达

          降，且ROS表达水平显著升高。经中、高浓度DXQ干预                          均显著上调，线粒体膜电位显著升高。这提示癫痫清颗
          后，细胞中 GPX4 mRNA 及蛋白（Western blot 实验中的               粒可通过抑制MPTP开放来抑制小胶质细胞的铁死亡。
          DXQ-M 组除外）的表达均显著上调，GSH 含量显著升                            综上所述，DXQ 可通过激活 GSH/GPX4 通路以增
          高，ROS 表达水平显著降低，提示癫痫清颗粒可激活                           强细胞抗氧化能力，调控TfR1、FTH1蛋白表达以纠正铁
          GSH/GPX4通路，从而发挥抗氧化作用。                               离子稳态，抑制 MPTP 过度开放以改善线粒体功能，最
              在铁代谢调控方面，细胞内铁离子的过量蓄积是铁                          终抑制小胶质细胞铁死亡。但DXQ的具体活性成分及
          死亡的必要前提；蓄积的铁离子与超氧化物形成“氧化-                           其贡献程度，以及 GPX4 调控 MPTP 信号转导的具体途
          还原”闭环，持续再生催化型铁池，进而通过芬顿反应促                           径尚需后续研究深入探索。


          · 322 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 3                               中国药房  2026年第37卷第3期
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