Page 63 - 《中国药房》2026年3期

表6 各 组 大 鼠 DRG 组 织 中 SETDB2、H3K9me3、 SETDB2 82 kDa
NGF、CGRP的荧光强度比较（x±s，n＝5）
H3K9me3 15 kDa
组别 SETDB2 H3K9me3 NGF CGRP
对照组 7.86±0.55 6.07±0.30 0.97±0.10 0.38±0.12 CGRP 14 kDa
模型组 1.08±0.18 a 0.85±0.13 a 7.78±0.21 a 6.94±0.32 a
膝痹宁Ⅱ方低剂量组 3.95±0.18 b 3.24±0.31 b 5.16±0.21 b 3.34±0.39 b TNF-α 17 kDa
膝痹宁Ⅱ方高剂量组 6.03±0.23 bc 4.95±0.27 bc 2.12±0.19 bc 1.45±0.17 bc
膝痹宁Ⅱ方高剂量+siRNA组 3.16±0.20 d 2.16±0.19 d 5.07±0.22 d 4.45±0.44 d NGF 27 kDa
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与膝痹宁 IL-1β 31 kDa
Ⅱ方低剂量组比较，P＜0.05；d：与膝痹宁Ⅱ方高剂量组比较，P＜0.05。
0.05），且膝痹宁Ⅱ方高剂量组大鼠 DRG 组织中上述 β-actin 42 kDa
A B C D E
mRNA 的表达水平均显著低于膝痹宁Ⅱ方低剂量组
A：对照组；B：模型组；C：膝痹宁Ⅱ方低剂量组；D：膝痹宁Ⅱ方高
（P＜0.05）；与膝痹宁Ⅱ方高剂量组比较，膝痹宁Ⅱ方高 剂量组；E：膝痹宁Ⅱ方高剂量+siRNA组。
剂量+siRNA 组大鼠 DRG 组织中上述 mRNA 的表达水 图2 各组大鼠DRG组织中SETDB2/H3K9me3信号轴
平均显著升高（P＜0.05）。结果见表7。 及炎症因子和疼痛介质相关蛋白表达的电泳图
表7 各组大鼠 DRG 组织中炎症因子和疼痛介质的 表8 各组大鼠DRG组织中SETDB2/H3K9me3信号轴
mRNA表达水平比较（x±s，n＝5） 及炎症因子和疼痛介质相关蛋白表达水平比较
组别 TNF-α mRNA IL-1β mRNA NGF mRNA CGRP mRNA （x±s，n＝5）
对照组 1.00±0.07 1.00±0.07 1.00±0.05 1.00±0.08
模型组 2.97±0.20 a 2.30±0.08 a 2.74±0.28 a 2.30±0.14 a 组别 SETDB2/ H3K9me3/ TNF-α/ IL-1β/ NGF/ CGRP/
膝痹宁Ⅱ方低剂量组 1.97±0.09 b 1.61±0.11 b 1.84±0.05 b 1.76±0.17 b β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin
对照组 1.01±0.06 0.85±0.06 0.40±0.05 0.37±0.06 0.29±0.06 0.37±0.04
膝痹宁Ⅱ方高剂量组 1.37±0.08 bc 1.27±0.03 bc 1.27±0.12 bc 1.26±0.05 bc a a a a a a
膝痹宁Ⅱ方高剂量+siRNA组 1.74±0.14 d 1.57±0.11 d 1.71±0.07 d 1.55±0.10 d 模型组 0.29±0.01 0.22±0.02 1.06±0.13 1.07±0.07 0.91±0.03 0.96±0.03
b
b
膝痹宁Ⅱ方低剂量组 0.56±0.03 0.44±0.05 0.78±0.06 0.82±0.04 0.68±0.03 0.68±0.02 b
b
b
b
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与膝痹宁
膝痹宁Ⅱ方高剂量组 0.83±0.03 0.66±0.03 0.54±0.03 0.61±0.06 0.46±0.03 0.44±0.03 bc
bc
bc
bc
bc
bc
Ⅱ方低剂量组比较，P＜0.05；d：与膝痹宁Ⅱ方高剂量组比较，P＜0.05。 d d d d d d
膝痹宁Ⅱ方高剂量+siRNA组 0.43±0.01 0.45±0.08 0.74±0.01 0.81±0.05 0.59±0.01 0.61±0.08
3.6 大鼠 DRG 组织中 SETDB2/H3K9me3 信号轴及炎 a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：膝痹宁Ⅱ
症因子和疼痛介质相关蛋白表达检测结果 方低剂量组比较，P＜0.05；d：与膝痹宁Ⅱ方高剂量组比较，P＜0.05。
与对照组比较，模型组大鼠 DRG 组织中 SETDB2、 中药组成，具有外祛寒湿、内温肝肾之效。方中淡附片、
H3K9me3 蛋白表达均显著下调（P＜0.05），TNF-α、IL- 桂枝为君药，温阳散寒、宣通痹阻；山萸肉、巴戟天、制狗
1β、NGF、CGRP蛋白表达均显著上调（P＜0.05）；与模型 脊及独一味为臣药，滋补肝肾、填精生髓；佐以炒白芍、
组比较，膝痹宁Ⅱ方低、高剂量组大鼠 DRG 组织中 生薏苡仁与川牛膝，活血消肿、缓急止痛，既补益肝肾，
SETDB2、H3K9me3 蛋白表达均显著上调（P＜0.05）， 又引药下行；生甘草调和诸药、缓急止痛。诸药合用，共
TNF-α、IL-1β、NGF、CGRP 蛋白表达均显著下调（P＜ 奏温经通络、益肾养肝、活血止痛之效。
0.05），且膝痹宁Ⅱ方高剂量组大鼠 DRG 组织中上述指 本研究冷刺激疼痛敏感性行为学检测结果显示，膝
标的变化较膝痹宁Ⅱ方低剂量组更显著（P＜0.05）；与 痹宁Ⅱ方可有效延长模型大鼠冷刺激缩足潜伏期，并减
膝痹宁Ⅱ方高剂量组比较，膝痹宁Ⅱ方高剂量+siRNA 少丙酮低温实验阳性次数。此外，HE染色与番红-固绿
组大鼠 DRG 组织中 SETDB2、H3K9me3 蛋白表达均显 染色结果显示，膝痹宁Ⅱ方能够有效缓解寒湿痹阻型
著下调（P＜0.05），TNF-α、IL-1β、NGF、CGRP 蛋白表达 KOA所致的软骨损伤与软骨基质退化。已有研究表明，
均显著上调（P＜0.05）。结果见图2、表8。 KOA疼痛敏感性升高与关节组织持续性低度炎症密切
4 讨论 相关——TNF-α、IL-1β 等促炎细胞因子可直接激活
KOA 是临床常见的慢性退行性疾病。寒湿痹阻作 DRG 组织中的感觉神经元，并上调 NGF、CGRP 等疼痛
为 KOA 的常见证型之一，其“遇寒加重”的临床表现提 介质表达，共同介导外周及中枢敏化，进而导致疼痛敏
[17]
示局部炎症反应与疼痛敏化在病情发展中发挥关键作 感性阈值降低 。本研究ELISA检测结果显示，膝痹宁
用。因此，探索契合寒湿痹阻证特点，既能缓解冷刺激 Ⅱ方可显著降低模型大鼠血清中炎症因子（TNF-α、IL-
疼痛敏感性又具有良好安全性的治疗策略，对 KOA 的 1β）与疼痛介质（NGF、CGRP）含量。进一步的免疫荧光
临床治疗具有重要意义。 染色及Western blot、RT-PCR检测结果证实，膝痹宁Ⅱ方
江苏省名中医王培民教授针对寒湿痹阻型KOA的 干预后，大鼠 DRG 组织中上述指标表达同步降低。这
病因病机与临床表现，以“温经活血、补益肝肾”为治疗 提示膝痹宁Ⅱ方可能是通过降低大鼠DRG组织中炎症
大法，创立了“以痛为枢”的诊疗思路，并据此创制了膝 因子与疼痛介质含量，进而降低寒湿痹阻型 KOA 大鼠
痹宁Ⅱ方。该方由淡附片、山萸肉、桂枝、川牛膝等10味 的冷刺激疼痛敏感性。

中国药房 2026年第37卷第3期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 · 329 ·