Page 55 - 《中国药房》2026年3期

3.3 DXQ对细胞线粒体膜电位及MPTP开放程度的影响 3.5 DXQ对细胞中铁死亡、MPTP相关蛋白表达的影响
与si-NC组相比，si-GPX4组细胞线粒体膜电位显著 免疫荧光实验结果显示，CypD 主要分布在线粒体
降低（P＜0.01）；与 si-GPX4 组相比，CsA 组、DXQ-H 组、 中，呈绿色荧光；GPX4 主要分布在细胞质中，呈红色荧
DXQ-M 组细胞线粒体膜电位均显著升高（P＜0.01）。 光。与si-NC组相比，si-GPX4组细胞中CypD蛋白表达
与si-NC组相比，si-GPX4组细胞MPTP开放程度显著增 显著上调（P＜0.01），GPX4 蛋白表达显著下调（P＜
高（P＜0.01）；与 si-GPX4 组相比，CsA 组、DXQ-H 组、 0.01）。与 si-GPX4 组相比，CsA 组、DXQ-H 组、DXQ-M
DXQ-M 组细胞 MPTP 开放程度均显著降低（P＜0.01）。 组细胞中 CypD 蛋白表达均显著下调（P＜0.01），GPX4
结果见表2（限于篇幅，线粒体膜电位及MPTP开放程度 蛋白表达均显著上调（P＜0.01）。结果见表 3（限于篇
相关显微图可通过扫描本文首页二维码查看“增强出 幅，免疫荧光染色结果可扫描本文首页二维码查看“增
版”板块中的附图2）。 强出版”板块中的附图3）。
Western blot 实验结果显示，与 si-NC 组相比，si-
表2 各组细胞线粒体膜电位及 MPTP 开放程度比较
GPX4 组细胞中 GPX4、FTH1、ANT、CytC 蛋白表达均显
（x±s，n＝3）
著下调（P＜0.01），TfR1、MCU、CypD蛋白表达均显著上
组别 JC-1聚合物 JC-1单体 MPTP开放程度
si-NC组 129.28±2.08 12.42±2.09 214.43±4.04 调（P＜0.01）；与si-GPX4组相比，CsA组、DXQ-H、DXQ-
si-GPX4组 32.19±3.00 a 107.48±2.52 a 75.83±3.22 a M 组细胞中 GPX4（DXQ-M 组除外）、FTH1、ANT、CytC
CsA组 111.60±2.52 b 17.71±3.21 b 197.78±3.61 b
DXQ-H组 107.82±2.08 b 18.19±2.65 b 171.71±2.52 b 蛋白和 DXQ-L 组细胞中 CytC 蛋白表达均显著上调
DXQ-M组 49.69±2.64 b 44.91±2.08 b 124.40±5.51 b （P＜0.01），CsA 组、DXQ-H、DXQ-M 组细胞中 TfR1、
DXQ-L组 34.03±3.79 104.52±3.06 76.11±4.04
MCU（DXQ-M 组除外）、CypD（DXQ-M 组除外）蛋白表
a：与si-NC组相比，P＜0.01；b：与si-GPX4组相比，P＜0.01。
达均显著下调（P＜0.01或P＜0.05）。结果见表3、图4。
3.4 DXQ对细胞中GPX4、CypD mRNA表达的影响
4 讨论
与si-NC组相比，si-GPX4组细胞中GPX4 mRNA的
癫痫清颗粒由 10 味常用中药组成，其中熟地黄、制
表达显著下调（P＜0.01），CypD mRNA的表达显著上调
何首乌可补肾填精益髓，芍药（白芍）可养血补血，柴胡
（P＜0.01）；与 si-GPX4 组相比，CsA 组、DXQ-H 组细胞
可行气，知母可清热泻火，郁金、石菖蒲、胆南星主化痰，
中 GPX4 mRNA 的表达均显著上调（P＜0.01），CypD
红花、水蛭主散瘀；诸药合用，在补肾补血的同时可调畅
mRNA的表达均显著下调（P＜0.01）。结果见图3。
[10]
气机，助精血调达周身 。现代药理学研究显示，癫痫
1.5 2.0 清颗粒具有抗炎、抗氧化的作用，方中郁金的活性成分
a b 姜黄醇可抑制神经元铁死亡 ；芍药（白芍）中的白芍总
GPX4 mRNA表达水平 1.0 a b b GypD mRNA表达水平 1.0 b 苷可通过抑制细胞铁死亡来改善肠缺血再灌注损伤 ；
[11]
1.5
[12]
知母中的知母皂苷元具有减轻氧糖剥夺/复糖复氧小鼠
0.5
0.5
[13]
海马神经元铁死亡的作用 ；柴胡中的柴胡皂苷A可通
过白细胞介素/蛋白激酶B/胞外信号调节激酶通路来抑
0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 制神经元铁死亡 。可见，该药具备抑制细胞铁死亡的
[14]
A. GPX4 mRNA B. GypD mRNA
Ⅰ：si-NC组；Ⅱ：si-GPX4组；Ⅲ：CsA组；Ⅳ：DXQ-H组；Ⅴ：DXQ-M组； 物质基础。
Ⅵ：DXQ-L组；a：与si-NC组相比，P＜0.01；b：与si-GPX4组相比，P＜0.01。 铁死亡作为一种铁依赖性非凋亡性细胞死亡形式，
图3 各组细胞中 GPX4、CypD mRNA 表达水平比较 与坏死性凋亡、凋亡及自噬等其他程序性细胞死亡模式
[15]
（x±s，n＝3） 存在明显差异 。从形态学特征看，铁死亡细胞呈现典
表3 各组细胞中铁死亡、MPTP相关蛋白表达水平比较（x±s，n＝3）
免疫荧光法 Western blot法
组别
GPX4 CypD GPX4/β-actin TfR1/β-actin FTH1/β-actin MCU/β-actin ANT/β-actin CypD/β-actin CytC/β-actin
si-NC组 59.10±1.53 6.51±1.49 1.59±0.07 0.05±0.01 1.55±0.07 0.27±0.01 1.32±0.06 0.18±0.01 1.14±0.05
si-GPX4组 14.01±1.53 a 52.79±1.31 a 0.83±0.04 a 1.12±0.05 a 0.65±0.03 a 1.23±0.06 a 0.03±0.01 a 0.97±0.05 a 0.15±0.01 a
CsA组 39.96±2.00 b 17.94±1.32 b 1.28±0.05 b 0.31±0.01 b 1.61±0.07 b 0.64±0.03 b 1.06±0.05 b 0.78±0.04 b 0.95±0.04 b
DXQ-H组 40.76±2.08 b 17.84±1.40 b 1.32±0.06 b 0.57±0.02 b 1.56±0.07 b 0.68±0.03 b 1.16±0.05 b 0.72±0.03 b 1.08±0.05 b
DXQ-M组 32.45±2.09 b 26.64±1.45 b 0.92±0.03 0.85±0.04 b 0.93±0.04 b 1.16±0.05 0.32±0.01 b 0.93±0.01 0.45±0.02 b
DXQ-L组 15.21±2.08 51.86±1.10 0.88±0.02 1.07±0.02 0.72±0.02 1.21±0.07 0.06±0.01 0.94±0.02 0.26±0.01 c
a：与si-NC组相比，P＜0.01；b：与si-GPX4组相比，P＜0.01；c：与si-GPX4组相比，P＜0.05。

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