Page 49 - 《中国药房》2026年3期

3.3 转染实验中细胞 miRNA-204/NUAK1/Hippo 信号 Collagen Ⅰ 130 kDa
轴活性考察结果 α-SMA 42 kDa
3.3.1 基因层面考察结果
GAPDH 36 kDa
与miRNA-204模拟物阴性对照组比较，miRNA-204 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
模 拟 物 组 细 胞 中 α -SMA、Collagen Ⅰ 、NUAK1、YAP A. Collagen Ⅰ、α-SMA蛋白
NUAK1 74 kDa
mRNA 表达水平均显著降低（P＜0.05），LATS1、MST1
GAPDH 36 kDa
mRNA表达水平均显著升高（P＜0.05）。与miRNA-204
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
抑制剂阴性对照组比较，miRNA-204 抑制剂组细胞中 B. NUAK1蛋白
α-SMA、Collagen Ⅰ、NUAK1、MST1、YAP mRNA 表达 LATS1 127 kDa
水平均显著升高（P＜0.05）。结果见图5。 MST1 56 kDa
YAP
56 kDa
2.5
1.5
1.5
α-SMA mRNA表达水平 1.0 Collagen Ⅰ mRNA表达水平 1.0 NUAK1 mRNA表达水平 2.0 Ⅰ：miRNA-204模拟物组；Ⅱ：miRNA-204模拟物阴性对照组；Ⅲ：
36 kDa
GAPDH
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
1.5
Ⅳ
C. LATS1、MST1、YAP蛋白
1.0
0.5
0.5
0.5
0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ miRNA-204抑制剂组；Ⅳ：miRNA-204抑制剂阴性对照组。
图6 转 染 实 验 中 各 组 细 胞 α -SMA、Collagen Ⅰ 、
A. α-SMA mRNA 8 B. Collagen Ⅰ mRNA 2.5 C. NUAK1 mRNA NUAK1、MST1、LATS1、YAP蛋白表达的电泳图
4
LATS1 mRNA表达水平 3 2 1 MST1 mRNA表达水平 6 4 2 YAP mRNA表达水平 2.0 1.5 Collagen Ⅰ蛋白表达水平 1.5 1.5
1.5
1.0
1.0
1.0
1.0
0.5
0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ α-SMA蛋白表达水平 0.5 0.5 NUAK1蛋白表达水平 0.5
D. LATS1 mRNA E. MST1 mRNA F. YAP mRNA
0 0 0
Ⅰ：miRNA-204模拟物组；Ⅱ：miRNA-204模拟物阴性对照组；Ⅲ： Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
A. α-SMA蛋白 B. Collagen Ⅰ蛋白 C. NUAK1蛋白
miRNA-204 抑 制 剂 组 ；Ⅳ ：miRNA-204 抑 制 剂 阴 性 对 照 组 ；a：与
2.0 1.5 2.0
miRNA-204模拟物阴性对照组比较，P＜0.05；b：与miRNA-204抑制剂 1.5 1.5
阴性对照组比较，P＜0.05。 1.0
图5 转 染 实 验 中 各 组 细 胞 α -SMA、Collagen Ⅰ 、 LATS1蛋白表达水平 1.0 MST1蛋白表达水平 0.5 YAP蛋白表达水平 1.0
NUAK1、MST1、LATS1、YAP mRNA 表达水平比 0.5 0.5
较（x±s，n＝3） 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
D. LATS1蛋白 E. MST1蛋白 F. YAP蛋白
3.3.2 蛋白层面考察结果 Ⅰ：miRNA-204模拟物组；Ⅱ：miRNA-204模拟物阴性对照组；Ⅲ：
与miRNA-204模拟物阴性对照组比较，miRNA-204 miRNA-204 抑 制 剂 组 ；Ⅳ ：miRNA-204 抑 制 剂 阴 性 对 照 组 ；a：与
模拟物组细胞中 α-SMA、Collagen Ⅰ、NUAK1、YAP 蛋 miRNA-204模拟物阴性对照组比较，P＜0.05；b：与miRNA-204抑制剂
白表达水平均显著降低（P＜0.05），LATS1、MST1 蛋白 阴性对照组比较，P＜0.05。
表达水平均显著升高（P＜0.05）。与miRNA-204抑制剂 图7 转 染 实 验 中 各 组 细 胞 α -SMA、Collagen Ⅰ 、
阴性对照组比较，miRNA-204 抑制剂组细胞中 α-SMA、 NUAK1、LATS1、MST1、YAP 蛋白表达水平比较
Collagen Ⅰ、NUAK1、YAP 蛋白表达水平均显著升高 （x±s，n＝3）
（P＜0.05），LATS1、MST1 蛋白表达水平均显著降低 调，并且 HSC 将进行异常增殖和分泌过量Ⅰ型胶原 α1
（P＜0.05）。结果见图6、图7。 链等 ECM 。这个病理进程受到复杂的细胞因子网络
[17]
4 讨论 调控，其中 TGF-β 可通过自分泌和旁分泌双重作用机
[18]
肝纤维化是一种以ECM异常沉积为特征的病理性 制，形成促纤维化信号的正反馈循环 。基于此，本研
修复过程，其作为多种慢性肝损伤的共同终末期病理结 究采用TGF-β构建HSC活化模型。
[15]
局，可能会发展为肝硬化或肝癌 。该疾病的致病机制 本课题组前期预实验发现，TFCTL 可通过调节
涉及多因素相互作用，目前已被证实的主要诱因包括胆 Hippo/YAP 通路发挥抗肝纤维化作用，本研究进一步通
汁淤积性肝损伤以及酒精性肝病的进行性肝损伤等 。 过体外实验证明 TFCTL 可通过抑制 Hippo/YAP 通路活
[16]
作为肝纤维化病理进程的核心效应细胞，HSC在生理稳 性，进而抑制 HSC 活化，并进一步对其上游调控网络进
态下维持静止表型，当肝脏微环境遭到破坏时，HSC 会 行探析。miRNA是一种短链、非编码小RNA，在细胞分
被激活，从静止表型转变为激活表型，并转化为肌成纤 化、增殖、周期调控及凋亡等生物学过程中扮演着重要
维细胞；同时 HSC 的活化标志物 α-SMA 的表达显著上 角色。相关研究发现，多种 miRNA 均可通过调节肝纤

中国药房 2026年第37卷第3期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 · 315 ·