Page 56 - 《中国药房》2026年1期
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disc degeneration in LDH rats， and its mechanism may be related to the activation of the FOXO3/Sirt1 pathway.
          KEYWORDS     quercetin； lumbar intervertebral disc herniation； FOXO3； Sirt1； apoptosis


              腰椎间盘突出症（lumbar intervertebral disc hernia‐      1.2 主要药品与试剂
          tion，LDH）是一种多发于成年人的椎间盘退行性疾病，                            本研究所用的主要药品与试剂有：QUE 对照品（上
          主要是由于椎间盘的髓核通过纤维环移位对神经元造                             海睿安生物科技有限公司，批号 Q4951，纯度≥95%），
          成压迫，进而出现下背痛、臀腿疼痛、神经功能障碍等症                           Sirt1 抑制剂 EX-527 对照品（美国 MedChemExpress 公
                                  [1]
          状，严重影响患者生活质量 。目前，临床针对 LDH 主                         司，批号 HY-15452，纯度 99.85%），肿瘤坏死因子 α（tu‐
          要以药物治疗、物理因子治疗、牵引、针灸及运动康复疗                           mor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素 1β（interleu‐
          法等非手术治疗为主。多数患者经规范化非手术治疗                             kin-1β，IL-1β）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（上海
          后症状可得到缓解，但对症状持续进展甚至出现神经功                            酶研生物科技有限公司，批号分别为 EK-R38696、EK-
          能障碍的患者，则需进一步采取手术干预。然而，由于                            R30172），转化生长因子 β1 （transforming growth factor-
          患者对治疗响应程度不同，整体治疗效果仍有待进一步                            β1，TGF-β1 ）、IL-10 ELISA试剂盒（上海酶联生物科技有
              [2]
          提高 。因此，深入阐明 LDH 病理进展机制，筛选可靠                         限公司，批号分别为ml002856、ml037371），TUNEL染色
          靶点并制定更加有效的干预策略，已成为当前骨科与脊                            试剂盒、苏木精-伊红（HE）染色试剂盒、RIPA裂解液（上
          柱外科领域研究重点。                                          海 碧 云 天 生 物 技 术 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 C1086、
              椎间盘退变是LDH的核心病理特征，而髓核细胞凋                         C0105M、P0013B），兔抗 B 细胞淋巴瘤 2（B-cell lym‐
                                    [3]
          亡是椎间盘退变的重要诱因 。叉头框蛋白 O3（fork‐                        phoma-2，Bcl-2）、Bcl-2 相关 X 蛋白（Bcl-2 associated X
          head box protein O3，FOXO3）/沉默信息调节因子 1（si‐           protein，BAX）、基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase-
          lent information regulator 1，Sirt1）通路参与调控炎症、氧       3，MMP-3）、FOXO3、Sirt1多克隆抗体（武汉菲恩生物科
          化应激、凋亡、自噬、代谢等多种生物学进程，在包括神                           技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 FNab00839、FNab00809、
          经退行性疾病在内的多种疾病的发展进程中发挥重要                             FNab05244、FNab03202、FNab07877），鼠抗磷脂酶 A2
          作用，激活FOXO3/Sirt1通路可抑制髓核细胞凋亡、减缓                     （phospholipase A2，PLA2）单克隆抗体（英国 Abcam 公
                        [4]
          椎间盘退变进展 。这提示，有效调控该通路可能有助                            司，批号ab180469），辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊
          于改善该类患者治疗结局。                                        抗兔、山羊抗鼠免疫球蛋白 G（IgG）二抗（美国 Cell Sig‐
              槲皮素（quercetin，QUE）作为天然黄酮类化合物，具                  naling Technology公司，批号分别为7074、7076）。
          有抗炎、抗氧化、抗凋亡、保护神经等多种生物活性；近                           1.3 动物
          年来研究发现，其可通过抑制髓核细胞炎症反应维持细                                本研究所用动物为 7～8 周龄、体重 180～220 g 的
                                         [5]
          胞外基质稳态，减缓椎间盘退变进展 。另有研究显示，                           SPF级健康SD雄性大鼠，共62只，购自武汉万千佳兴生
          QUE 可通过激活 Sirt1 途径抑制氧化应激、减少炎症反                      物科技有限公司，动物生产许可证号为SCXK（鄂）2021-
                           [6]
          应、恢复线粒体功能 。以上研究提示，QUE可能通过激                          0011。将大鼠置于标准SPF级饲养环境中适应性饲养1
          活FOXO3/Sirt1通路，发挥抑制髓核细胞凋亡、改善椎间                      周后用于实验研究。本研究已获得武汉万千佳兴生物
          盘退变的作用。基于此，本研究构建LDH大鼠模型，从                           科 技 有 限 公 司 动 物 伦 理 委 员 会 审 批（批 号 为
          炎症反应、细胞凋亡及信号通路调控角度出发，基于                             2024121504）。
          FOXO3/Sirt1 通路探讨 QUE 对 LDH 大鼠椎间盘退变的                 2 方法
          保护作用及机制，为进一步明确 QUE 在 LDH 中的应用                       2.1 LDH大鼠模型构建
          前景及分子机制提供参考。                                            将 50 只 SPF 级健康 SD 雄性大鼠适应性饲养 1 周
          1 材料                                                后，参考相关文献 ，采用自体髓核移植法构建 LDH 模
                                                                             [7]
          1.1 主要仪器                                            型。具体操作如下：以戊巴比妥钠将大鼠麻醉，按俯卧
              Velocity 18R Plus 型离心机购自天美仪拓实验室设                位固定，腰背部备皮消毒，暴露 L5 和 L6 神经根，再将大
          备（上海）有限公司；DYCZ-24EN 型蛋白电泳仪购自北                       鼠尾部纵向切开，刀尖横向插入纤维环取出尾椎髓核，
          京六一仪器厂；EnVision型酶标仪购自瑞孚迪生物医学                        并将其置于 L5 和 L6 神经根形成机械压迫，然后填入适
         （上海）有限公司；TGel Image System型凝胶成像系统购                   量的吸收性明胶海绵，缝合伤口，红外灯照射1 h促进伤
          自天根生化科技（北京）有限公司；LSM880 型共聚焦显                        口愈合。另取 12 只大鼠作为对照组（Control 组），行假
          微镜、JUNG CM1800 型切片机均购自德国 Zeiss 公司；                  手术，即仅暴露L5、L6神经根，切除尾部髓核不移植，其
          YD-6D 型包埋机购自金华市益迪医疗设备有限公司；                          余操作同造模大鼠。若造模大鼠出现跛行、瘫痪、足外
          TS-Q50型脱水机购自湖北泰禾医用仪器有限公司。                           翻等运动障碍症状，而且后足疼痛阈值（检测方法同


          · 50 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 1                                中国药房  2026年第37卷第1期
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