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表4 各组斑马鱼体内中枢神经递质水平比较(x±s,
n=60)
5-HT/ GABA/ Glu/ DA/ NE/
组别
(pg/mL) (μmol/L) (mg/L) (pg/mL) (ng/mL)
空白对照组 2 237.86±5.05 6.52±0.92 25.38±3.96 58.12±5.88 4.90±0.52
A.空白对照组 B.模型组 C.阳性对照组
模型组 1 010.24±21.93 a 4.31±0.52 a 44.85±4.11 a 104.08±11.14 a 7.46±0.86 a
阳性对照组 1 873.62±9.79 b 6.37±0.77 b 30.54±3.74 b 52.20±7.98 b 4.88±0.65 b
LRME低剂量组 1 454.46±14.97 b 5.74±1.02 b 33.11±4.99 b 68.14±8.17 b 5.99±0.79 b
LRME中剂量组 1 650.40±10.58 b 5.90±0.46 b 32.63±8.83 b 53.48±7.78 b 5.88±0.97 b
LRME高剂量组 1 755.68±14.08 b 6.44±0.54 b 30.30±3.34 b 50.96±8.75 b 5.54±0.52 b
D. LRME低剂量组 E. LRME中剂量组 F. LRME高剂量组 a:与空白对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
注:黑色箭头所指为尼氏小体;红色箭头所指为神经元水肿所致 3.2.6 黑果枸杞对斑马鱼体内核心靶点蛋白表达水平
的空泡现象。 的影响
图2 各组斑马鱼脑部神经元观察结果
与空白对照组比较,模型组斑马鱼体内 AKT1、p-
3.2.3 黑果枸杞对斑马鱼体内炎症因子的影响
AKT1、EGFR、SRC、HSP90AA1 蛋白表达水平均显著升
与空白对照组比较,模型组斑马鱼体内IL-6、IL-1β、
高(P<0.05),Bcl-2 蛋白表达水平显著降低(P<0.05);
TNF-α 水平均显著升高(P<0.05),IL-10 水平显著降低
(P<0.05);与模型组比较,LRME低、中、高剂量组和阳性 与模型组比较,LRME低、中、高剂量组和阳性对照组斑
马鱼体内 AKT1、p-AKT1、EGFR、SRC、HSP90AA1 蛋白
对照组斑马鱼体内 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平均显著降低
表达水平均显著降低(P<0.05),Bcl-2 蛋白表达水平均
(P<0.05),IL-10水平均显著升高(P<0.05)。结果见表2。
显著升高(P<0.05)。结果见图3、表5。
表2 各组斑马鱼体内炎症因子水平比较(x±s,n=60,
pg/mL) AKT1 56 kDa
组别 IL-10 IL-6 IL-1β TNF-α p-AKT1 56 kDa
空白对照组 501.28±1.36 35.65±7.65 25.54±10.15 219.38±6.72
EGFR 175 kDa
模型组 148.68±34.70 a 151.56±6.54 a 87.73±7.79 a 674.35±7.47 a
阳性对照组 377.06±6.53 b 65.98±9.95 b 39.22±7.25 b 400.10±19.68 b SRC 60 kDa
LRME低剂量组 206.45±17.43 b 124.05±5.80 b 78.06±6.85 b 578.95±10.81 b
HSP90AA1 85 kDa
LRME中剂量组 283.43±19.01 b 109.30±12.16 b 70.13±10.48 b 443.73±16.11 b
LRME高剂量组 329.26±4.73 b 77.92±8.53 b 54.81±9.07 b 405.53±9.26 b Bcl-2 26 kDa
a:与空白对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 β-actin 42 kDa
3.2.4 黑果枸杞对斑马鱼体内氧化应激指标的影响 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
Ⅰ:空白对照组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:LRME低剂量
与空白对照组比较,模型组斑马鱼体内 MDA 水平
组;Ⅴ:LRME中剂量组;Ⅵ:LRME高剂量组。
显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px、CAT水平均显著降低
图3 各组斑马鱼体内核心靶点蛋白的电泳图
(P<0.05);与模型组比较,LRME中、高剂量组和阳性对照
组斑马鱼体内 MDA 水平均显著降低(P<0.05),SOD、 表5 各组斑马鱼核心靶点蛋白表达水平比较(x±s,
n=30)
GSH-Px、CAT水平均显著升高(P<0.05)。结果见表3。
AKT1/ p-AKT1/ EGFR/ SRC/ HSP90AA1/ Bcl-2/
表3 各组斑马鱼体内氧化应激指标水平比较(x±s, 组别 β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin
n=60) 空白对照组 0.97±0.10 0.29±0.03 0.43±0.02 0.89±0.09 0.71±0.07 1.06±0.08
组别 SOD/(U/mL) MDA/(nmol/mL) GSH-Px/(U/L) CAT/(U/mL) 模型组 1.41±0.09 a 0.94±0.06 a 0.91±0.06 a 1.59±0.10 a 1.83±0.10 a 0.47±0.04 a
空白对照组 318.70±6.87 4.34±1.96 170.70±6.99 81.31±6.96 阳性对照组 1.05±0.11 b 0.43±0.08 b 0.59±0.08 b 1.03±0.07 b 1.39±0.08 b 0.88±0.05 b
模型组 150.26±15.46 a 6.53±0.91 a 83.73±11.19 a 47.82±6.30 a LRME低剂量组 1.15±0.11 b 0.52±0.07 b 0.61±0.06 b 1.08±0.07 b 1.23±0.09 b 0.75±0.05 b
阳性对照组 266.02±17.18 b 4.39±0.36 b 147.70±8.72 b 73.95±7.06 b LRME中剂量组 1.10±0.09 b 0.56±0.09 b 0.48±0.09 b 1.16±0.08 b 1.21±0.16 b 1.02±0.08 b
LRME低剂量组 179.23±13.92 5.87±0.85 88.27±8.98 50.76±5.15 LRME高剂量组 1.04±0.08 b 0.38±0.08 b 0.44±0.08 b 0.95±0.09 b 1.20±0.12 b 1.16±0.12 b
LRME中剂量组 189.20±9.53 b 5.46±0.72 b 102.52±7.57 b 58.26±7.47 b a:与空白对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
LRME高剂量组 228.42±13.10 b 5.27±0.78 b 115.02±6.45 b 66.54±7.86 b
a:与空白对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 4 讨论
3.2.5 黑果枸杞对斑马鱼中枢神经递质的影响 本研究通过网络药理学挖掘出了黑果枸杞改善睡
与空白对照组比较,模型组斑马鱼体内 Glu、DA、 眠的5个核心成分(芹菜素、柚皮素、黄豆苷元、山柰酚、
NE 水平均显著升高(P<0.05),5-HT、GABA 水平均显 槲皮素)和 5 个核心靶点(AKT1、EGFR、Bcl-2、SRC、
著降低(P<0.05)。与模型组比较,LRME低、中、高剂量 HSP90AA1)。其中,EGFR 作为一种受体酪氨酸激酶,
组和阳性对照组斑马鱼体内Glu、DA、NE水平均显著降 其被激活后,会招募 SRC,进而通过磷脂酰肌醇 3 激酶/
低(P<0.05),5-HT、GABA 水平均显著升高(P<0.05)。 AKT信号通路向下游传递信号;该通路中的AKT1能够
结果见表4。 进一步激活核因子 κB,最终驱动促炎因子的合成与释
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