Page 44 - 《中国药房》2025年20期

尿路感染是临床常见的泌尿系统感染性疾病，主要 141321008、141123021）均购自深圳迈瑞生物医疗电子
是由于细菌、真菌等病原体在尿路中异常生长、繁殖，侵 股份有限公司；白细胞介素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、
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犯黏膜或组织，继而引起的炎症性疾病 。尿路感染根 IL-6、IL-8、肿 瘤 坏 死 因 子 α（tumor necrosis factor- α，
据病情可分为急性尿路感染和慢性尿路感染（chronic TNF-α）、CD4、CD8、胱抑素C（cystatin C，Cys-C）、分泌型
urinary tract infection，CUTI），其中 CUTI 主要由急性感 免疫球蛋白 A（secretory immunoglobulin A，SIgA）、α1-
染久治不愈所致，病情反复且病程较长，若不及时治疗 微球蛋白（α1-microglobulin，α1-MG）试剂盒（批号分别
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可诱发脓毒血症和肾衰竭，甚至危及患者生命安全 。 为 E20231024-30206B、E20231024-30219B、E20231024-
现代研究表明，大肠埃希菌是CUTI的常见致病菌，约占 30221B、E20231024-31063B、E20240109-31696B、E20240109-
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其致病菌总数的70%～90% 。目前，临床治疗CUTI的 31697B、E20240109-30230B、E20240109-30624B、E20240109-
一线药物为抗菌药物，但长期使用易出现细菌耐药的现 30142B）均购自上海酶联生物科技有限公司；鼠抗TLR4
象，而中药在治疗尿路感染方面具有独特的优势，可缓 单克隆抗体（货号66350-1-Ig）购自武汉三鹰生物技术有
解尿路感染症状，并降低复发率 。 限公司；兔抗NLRP3、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）单
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八正散出自《太平惠民和剂局方》，是治疗湿热淋证 克隆抗体（货号分别为ab263899、ab181602）均购自英国
的代表方，由瞿麦、萹蓄、车前子等多味中药组成，具有 Abcam公司；兔抗NF-κB单克隆抗体（货号#8242）购自美
清热利湿、通淋止痛的功效，被广泛用于尿路感染、前列 国CST公司；辣根过氧化物酶标记的羊抗兔免疫球蛋白G
腺炎、膀胱炎等泌尿系统疾病的临床治疗 [5―6] 。研究发 二抗（批号AS1058）购自武汉阿斯本生物技术有限公司。
现，Toll 样受体 4（Toll-like receptor 4，TLR4）/核因子 κB 1.3 实验动物
（nuclear factor-κB，NF-κB）/核苷酸结合结构域富含亮氨 本研究所用动物为6周龄的SPF级雌性SD大鼠，共
酸 重 复 序 列 和 含 热 蛋 白 结 构 域 受 体 3（nucleotide- 40 只，体重 160～180 g，购自甘肃中医药大学动物实验
binding domain leucine-rich repeat and pyrin domain- 中心，实验动物生产许可证号为 SCXK（甘）2020-0002。
containing receptor 3，NLRP3）信号通路在尿路感染相关 所有大鼠均饲养于中国农业科学院兰州畜牧与兽药研
炎症反应的发生中具有重要作用 [7―9] 。因此，调控上述 究所 SPF 级动物实验室（室温 18～22 ℃、相对湿度
信号通路可能是治疗尿路感染的重要策略。基于此，本 45%～55%）内，自由摄食、饮水，适应性喂养 7 d。本研
研究以大肠埃希菌诱导构建 CUTI 大鼠模型，并基于 究方案经甘肃中医药大学实验动物伦理委员会审查（编
TLR4/NF-κB/NLRP3 信号通路探究八正散对该模型的 号SY2023-608）。
改善作用及潜在机制，以期为八正散治疗尿路感染的科 1.4 细菌
学内涵阐释及CUTI的临床治疗提供参考。 大肠埃希菌（批号2203311）由商城北纳创联生物科
1 材料 技有限公司提供。
1.1 主要仪器 2 方法
PocH-100iV型血细胞分析仪、KNF-100型尿液分析 2.1 大肠埃希菌菌液配制
仪均购自希森美康医用电子（上海）有限公司；BS- 将大肠埃希菌接种于25 mL新鲜Luria-Bertani培养
240VET型动物生化分析仪购自深圳迈瑞生物医疗电子 基中，于37 ℃、250 r/min的恒温培养振荡器中培养8 h；
股份有限公司；CX43 型电子显微镜购自日本 Olympus 收集菌液，以 4 500 r/min 离心 5 min，弃上清液；取细菌
公司；Rayto RT-6100型酶标仪购自深圳杜雷生命科学股 沉淀，用无菌磷酸盐缓冲液（PBS）稀释，备用。临用前，
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份有限公司；L-500 型台式高速离心机购自湘潭湘仪仪 用无菌PBS将菌液密度调整至1×10 cfu/mL 。
器有限公司；HGZF-101-1 型电热恒温鼓风干燥箱购自 2.2 药液制备
上海跃进医疗器械有限公司。 取根据八正散组方，取滑石、川木通、萹蓄、瞿麦、车
1.2 主要药品与试剂 前子、栀子、大黄各9 g和甘草6 g，混合，加10倍量水，浸
八正散组方饮片滑石、川木通、萹蓄、瞿麦、车前子、 泡15～20 min后煎煮45 min，过滤；药渣再加10倍量水，
栀 子 、大 黄 、甘 草（批 号 分 别 为 220901A、22053105、 煎煮 45 min，过滤；合并两次滤液，浓缩，制成质量浓度
221109、211202、230401、230101、230405、230401）均由 为0.78 g/mL（以生药量计）的八正散药液，于－4 ℃下密
甘肃省中医院中药房提供，由甘肃省中医院药学部李喜 封保存，备用。
香主任中药师鉴定均为真品。 2.3 分组、造模与给药
Luria-Bertani 培养基（批号 CM0003）购自北京雷根 将大鼠分为正常对照组、模型组、左氧氟沙星组（45
生物技术有限公司；左氧氟沙星片[阳性对照药，批号 mg/kg，剂量根据临床等效剂量换算，临用时以水为溶剂
22070109，规格 0.5 g（按 C18H20FN3O4计）]购自四川海汇 配制成混悬液）和八正散组（4.95 g/kg，剂量参考文献
药业有限公司；尿素、肌酐检测试剂盒（批号分别为 [11]设置，且前期少量样本预实验结果证实该剂量作用

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