Page 44 - 《中国药房》2025年19期
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境，而 PEG 的修饰进一步提升了拟合度，可见 PEG 表面                      203.84、101.92、50.96、10.192、5.096、1.019  2、0.509  6、
          的亲水壳增强了载药粒子的抗干扰能力（限于篇幅，漏                            0.010 192 μg/mL的系列标准溶液，分别精密吸取空白血
          槽和非漏槽条件下3种制剂在肺液介质中的释药模拟结                            浆和气管、肺、肝、肾组织的空白匀浆液 180 μL，加入上
          果可通过本文首页二维码链接中“增强出版”板块查看                            述系列标准溶液 20 μL，按“2.3.3”项下方法处理，再按
          附表1）。                                              “2.3.1”项下条件进样分析。以药物质量浓度（X）为横坐
          2.3 PEG-Cur-FL在小鼠体内的组织分布                            标、Cur 与内标的峰面积比值（Y）为纵坐标进行线性回
          2.3.1 Cur的色谱、质谱条件                                   归，定量下限质量浓度均为10.192 ng/mL。结果见表1。
             （1）色谱条件：色谱柱为 InertSustain C18 （3.0 mm×                表1 血浆和不同组织的线性关系考察结果
          100 mm，3.0 μm）；流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液（体积比                  样品            回归方程          线性范围/（μg/mL）  相关系数
          75∶25）；柱温为 35 ℃；流速为 0.4 mL/min；进样量为 10              血浆         Y＝0.632 9X+0.067 3  0.010 192～20.384  0.997 2
                                                              气管组织       Y＝1.287 3X+0.097 3  0.010 920～5.096  0.998 6
          μL。（2）质谱条件：采用电喷雾离子源，以多反应监测模
                                                              肺组织        Y＝1.135 4X+0.081 3  0.010 192～50.96  0.998 8
          型进行正离子扫描；加热模块温度为 400 ℃；脱溶剂管                         肝组织        Y＝4.680 7X+0.007 1  0.010 192～5.096  0.999 3
          温度为 250 ℃；雾化气流速为 3.0 L/min；干燥气流速为                   肾组织        Y＝3.892 1X+0.020 7  0.010 192～5.096  0.998 5
          15 L/min；离子源电压为4.0 kV；用于定量分析的离子对                       （3）精密度和准确度试验：分别按“2.3.4（2）”项下方
          分 别 为 m/z  367.20→148.95（Cur）、m/z  269.10→225.00    法配制 Cur 定量下限和低、中、高质量浓度的血浆和气
         （大黄素，内标）。                                            管、肺、肝、肾组织样品，平行配制6份，按“2.3.3”项下方
          2.3.2 溶液的制备                                         法处理后，于同日内进样 6 次，分别以相对标准偏差
             （1）Cur对照品贮备液及标准溶液：取Cur对照品约                      （RSD）、实测质量浓度与理论质量浓度的比值考察精密
          10 mg，精密称定，置于 10 mL 棕色容量瓶中，以甲醇溶                     度、准确度。连续进样3 d。结果显示，血浆和气管、肺、
          解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为1.019 2 mg/mL                     肝、肾组织样品的准确度为 83.89%～106.22%，日内、日
          的Cur对照品贮备液，于4 ℃下避光保存。临用前，用甲                         间精密度的 RSD 均小于 10%，符合 2020 年版《中国药
          醇稀释制成相应质量浓度的标准溶液。（2）内标溶液：取                          典》（四部）对生物样品定量分析的要求 。
                                                                                               [13]
          大黄素对照品约 10 mg，精密称定，置于 100 mL 棕色容                       （4）稳定性试验：分别按“2.3.4（2）”项下方法配制
          量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，即得内标贮备液；精                           Cur 低、中、高质量浓度的血浆和气管、肺、肝、肾组织样
          密量取上述内标贮备液 1 mL，置于 100 mL 棕色容量瓶                     品，按“2.3.3”项下方法处理后，分别于室温下放置24 h、
          中，以甲醇溶解并稀释至刻度，即得质量浓度为 1.08                          －20 ℃放置 24 h、反复冻融（－20 ℃至室温）3 次后，按
          μg/mL的内标溶液，于4 ℃避光保存，备用。                            “2.3.1”项下条件进样分析。每个浓度平行3份。结果显
          2.3.3 生物样品的处理方法                                     示，各样品在上述条件下放置后的准确度为 82.70%～
             （1）血浆样品：取小鼠血浆样品，以4 000 r/min离心10                 101.39%（RSD≤9.88%），稳定性良好，符合 2020 年版
          min；取上清液 180 μL，加入内标溶液 20 μL、蛋白沉淀                  《中国药典》（四部）对生物样品定量分析的要求 。
                                                                                                      [13]
          剂1 mL，涡旋5 min后，以12 000 r/min离心10 min；取上                （5）提取回收率试验：精密量取低、中、高质量浓度
          清液 900 μL 转移至另一离心管中，以氮气流吹干；残渣                      （0.101 92、10.192、50.96 μg/mL）的 Cur 标准溶液，加入
          加流动相200 μL复溶，涡旋3 min后，以12 000 r/min离心               空白血浆和组织各 180 μL，按“2.3.3”项下方法处理后，
          10 min，取上清液进样测定，记录峰面积。（2）组织样品：                      再按“2.3.1”项下条件进样分析，记录峰面积（A1 ）；另取
          取小鼠气管、肺、肝、肾组织适量，剪碎后，加入2倍量生                          空白血浆和组织各 180 μL（不加 Cur），按“2.3.3”项下方
          理盐水匀浆，再以 4 000 r/min 离心 10 min，精密吸取各                法处理，在上清液中加入相同质量浓度（具体浓度同上）
          组织上清液180 μL，余下步骤同“血浆样品的处理”。                         的 Cur 标准溶液，再以氮气流吹干，余下步骤同“2.3.3”
          2.3.4 方法学考察                                         项，按“2.3.1”项下条件进样分析，记录峰面积（A2 ）。以
             （1）专属性考察：分别取小鼠空白血浆/空白组织（气                        A1和A2的比值计算提取回收率。每个浓度平行3份。结
          管、肺、肝、肾）样品（处理时不加内标）、空白血浆/空白组                        果显示，低、中、高质量浓度 Cur 在血浆中的提取回收
          织样品+Cur 对照品（10.192 μg/mL）、给药 0.5 h 的血浆/             率 分 别 为（83.25±3.65）% 、（93.61±1.31）% 、（88.73±
          给药 0.5 h 的组织样品，按“2.3.3”项下方法处理，再按                    7.20）%，在气管组织中分别为（83.77±5.52）%、（91.91±
         “2.3.1”项下条件进样测定，记录色谱图（限于篇幅，色谱                        7.26）%、（87.91±8.22）%，在肺组织中分别为（83.67±
          图可通过本文首页二维码链接中“增强出版”板块查看                            7.69）%、（89.52±2.70）%、（80.77±6.25）%，在肝组织中
          附图 1～3）。结果表明，血浆和各组织中的内源性物质                          分 别 为（82.69±2.77）% 、（86.50±3.12）% 、（84.62±
          不干扰测定。                                              3.06）%，在肾组织中分别为（81.67±6.32）%、（87.93±
             （2）线性关系与定量下限考察：取“2.3.2（1）”Cur 对                  2.56）%、（78.31±3.50）%，内标在血浆和气管、肺、肝、肾
          照品贮备液，用甲醇逐级稀释成质量浓度分别为509.6、                         组织的提取回收率分别为（90.77±3.66）%、（93.11±


          · 2390 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 19                            中国药房  2025年第36卷第19期
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