Page 34 - 《中国药房》2025年19期

growth factor- binding protein-1， oxidative stress responsive kinase 1， and Ste20-like proline-/alanine-rich kinase were significantly
reduced in the LPS group （P＜0.05）； compared with the LPS group， the cell survival rate and the expression levels of the above-
mentioned proteins and mRNAs were significantly increased in the CCF group， while the cell survival rate and the expression levels
of the above-mentioned proteins and mRNAs were significantly decreased in the GSK group （P＜0.05）； compared with the CCF
group， the cell survival rate and the expression levels of the above-mentioned proteins and mRNAs were significantly reduced in
the CCF+GSK group （P＜0.05）. After knocking down SGK2， compared with the LPS group， the cell survival rate， red/green
fluorescence intensity ratio， and the expression levels of the above-mentioned proteins and mRNAs were significantly reduced in the
siSGK2 group （P＜0.05）； compared with the siSGK2 group， the cell survival rate， red/green fluorescence intensity ratio， and the
expression levels of the above-mentioned proteins and mRNAs were significantly increased in the siSGK2+CCF group （P＜0.05）.
The in vivo experimental results showed that CCF treatment can significantly improve the number of implanted embryos and viable
fetuses in RSA model mice and reduce lost embryos， the expression levels of the above-mentioned proteins and mRNAs in
endometrial tissue were significantly increased， and the red/green fluorescence intensity ratio was significantly increased （P＜
0.05）； the combined dosing group could reverse the effect of CCF （P＜0.05）. CONCLUSIONS CCF can activate SGK2， up-
regulate the WNK signaling pathway， promote endometrial decidualization， and improve RSA.
KEYWORDS Cuscuta chinensis flavonoids； recurrent spontaneous abortion； WNK signaling pathway； serum and glucocorticoid
induced kinase； decidualization

复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA） Pac型电泳仪（美国Bio-Rad公司），ABI7500型实时荧光
指2次及以上妊娠失败，发病率为1%～2%，对患者的身 定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）仪（美国ABI公司）。
体和心理健康构成威胁 [1―2] 。RSA 的机制尚不完全明 1.2 主要药品与试剂
确，西医治疗以免疫疗法和抗凝治疗为主，然而上述治 CCF（批号PY20220216，纯度≥98%）购自南京普怡
疗不仅伴随较高的医疗费用，而且存在诸多应用禁忌证 生物科技有限公司；SGK2 抑制剂 GSK650394 的原料药
及潜在的不良反应风险 [3―4] 。因此，寻找更有效的治疗 （纯 度 ≥95%，批 号 S7209）购 自 美 国 Selleck 公 司 ；
方法尤为重要。 DMEM 培养基（批号 C11995500BT）购自美国 Gibco 公
菟丝子具有止泻、滋补肝肾、益精壮阳和安胎等多 司；碘化丙啶（propidium iodide，PI）、脂多糖（lipopoly‐
重功效 [5―6] ，其有效成分复杂，其中黄酮类成分为主要活 saccharide，LPS）、二甲基亚砜（DMSO，纯度≥99%）（批
性成分，在女性生殖疾病治疗领域具有一定优势 [7―8] 。 号 分 别 为 P4170、L2630、D2650）均 购 自 美 国 Sigma-
已有研究证实，菟丝子黄酮（Cuscuta chinensis flavo‐ Aldrich 公 司 ；CCK-8 试 剂 盒（批 号 CK04）购 自 日 本
noids，CCF）可促进辅助型 T 细胞 2 及孕激素受体表达， DOJINDO 公司；磷酸盐缓冲液（PBS，批号 P1020）购自
抑制流产模型大鼠胎盘及蜕膜结构产生病理改变，并降 北京索莱宝科技有限公司；线粒体膜电位检测试剂盒、
低流产率 。血清和糖皮质激素调节激酶（serum and 5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2′-deoxyuri‐
[9]
glucocorticoid induced kinase，SGK）是一类丝氨酸/苏氨 dine，EdU）增殖检测试剂盒、苯甲基磺酰氟（phenylmeth‐
酸激酶，包括SGK1、SGK2、SGK3，参与多种细胞信号的 anesulfonyl fluoride，PMSF；纯度≥98.5%）、RIPA 裂解
[10]
转导 。研究表明，SGK 在 RSA 中起重要作用，其中 液、苏木精-伊红（HE）染色试剂盒（批号分别为C2003S、
SGK2在RSA子宫内膜蜕变中呈低表达，可能与流产相 C0071S、ST2573、P0013B、C0105S）均购自上海碧云天
关 [11―12] 。近年来，WNK 赖氨酸缺乏蛋白激酶（WNK ly‐ 生物技术有限公司；兔抗 β-肌动蛋白（β-actin）、催乳素
sine deficient protein kinase，简称“WNK”）信号通路被发 （prolactin，PRL）抗体、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、
现与子宫稳态及妊娠支持密切相关 [13―14] 。本研究团队 辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗（批
前期利用GeneMANIA数据库预测了与SGK2互作密切 号分别为 ab8227、ab130316、ab9485、ab7090）均购自英
的潜在靶点，结果表明 SGK2 与 WNK 信号通路相关分 国 Abcam 公司；兔抗胰岛素样生长因子结合蛋白 1
子关联。基于此，本研究拟探讨 CCF 改善 RSA 的作用 （insulin-like growth factor-binding protein-1，IGFBP-1）抗
机制，以期为RSA的防治提供新的理论依据。 体（批号 DF7130）购自武汉爱博泰克生物科技有限公
1 材料 司；兔抗 WNK1、WNK4、SGK2、Ste20 相关脯氨酸/丙氨
1.1 主要仪器 酸 丰 富 激 酶（Ste20-like proline-/alanine-rich kinase，
本研究所用主要仪器有 CytoFLEX 型流式细胞仪 SPAK）、氧化应激反应激酶 1（oxidative stress-responsive
（美国 Beckman Coulter 公司），DP72 型倒置荧光显微镜 kinase 1，OSR1）抗体（批号分别为4979S、5713S、5595S、
（日本 Olympus 公司），Multiskan FC 型酶标仪和 3308E 3729、84671）均购自美国 CST 公司；SGK2 的小干扰
细胞培养箱（美国Thermo Fisher Scientific公司），Power‐ RNA（small interfering RNA，siRNA）序列由生工生物工

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