Page 38 - 《中国药房》2025年19期
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表5 敲低SGK2后各组细胞中WNK信号通路、蜕膜化 3.3.2 CCF对RSA小鼠子宫内膜结构及蜕膜化的影响
相关蛋白表达水平比较(x±s,n=5) HE染色结果(图2)显示,对照组小鼠的子宫内膜组
SGK2/ WNK1/ WNK4/ PRL/ IGFBP-1/ OSR1/ SPAK/ 织中,细胞形态结构完整且有序排列,细胞间连接紧密,
组别
β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin 胞质颜色均匀,可观察到丰富的血管;与对照组比较,模
空白组 1.07±0.07 1.06±0.06 1.07±0.08 1.05±0.06 1.02±0.06 1.03±0.05 1.04±0.05
a
a
a
LPS组 0.47±0.06 0.48±0.08 0.51±0.09 0.40±0.06 0.54±0.08 0.50±0.11 0.46±0.09 a 型组小鼠的子宫内膜血管密度降低,细胞出现嗜酸性
a
a
a
siSGK2组 0.21±0.04 0.19±0.03 0.15±0.03 0.16±0.02 0.14±0.03 0.18±0.04 0.17±0.02 b 变,部分细胞显示出核碎裂和胞质溶解现象,提示有细
b
b
b
b
b
b
c
c
siSGK2+CCF组 0.35±0.06 0.31±0.05 0.32±0.04 0.29±0.03 0.27±0.06 0.33±0.05 0.29±0.04 c
c
c
c
c
胞坏死及凋亡的病理过程存在;与模型组比较,CCF低、
a:与空白组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与siSGK2
高剂量组小鼠子宫内膜结构及蜕膜化进程明显恢复,
组比较,P<0.05。
GSK 组小鼠子宫内膜结构和蜕膜化状态有所恶化;与
表6 敲低SGK2后各组细胞中WNK信号通路、蜕膜化
CCF组比较,联合给药组小鼠的子宫内膜结构及蜕膜化
相关基因mRNA表达水平比较(x±s,n=5)
状态有所恶化。
组别 SGK2 WNK1 WNK4 PRL IGFBP-1 OSR1 SPAK
空白组 2.32±0.14 2.28±0.13 2.19±0.15 2.07±0.16 2.21±0.14 2.06±0.17 2.15±0.13
a
a
a
a
a
LPS组 1.05±0.12 0.97±0.12 1.03±0.10 0.84±0.09 0.92±0.11 0.81±0.11 0.95±0.12 a
a
b
b
b
b
b
b
siSGK2组 0.29±0.08 0.31±0.08 0.26±0.07 0.28±0.06 0.23±0.08 0.27±0.06 0.22±0.08 b
c
c
c
c
siSGK2+CCF组 0.53±0.11 0.61±0.12 0.49±0.12 0.52±0.14 0.58±0.13 0.63±0.13 0.61±0.15 c
c
c
a:与空白组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与siSGK2 A.对照组 B.模型组 C. CCF低剂量组
组比较,P<0.05。
3.2.3 敲低SGK2对细胞中线粒体功能的影响
空白组、LPS 组、siSGK2 组、siSGK2+CCF 组细胞中
红/绿 荧 光 强 度 比 值 分 别 为 11.53±1.81、3.03±0.26、 D. CCF高剂量组 E. GSK组 F.联合给药组
2.16±0.17、5.37±0.61(n=5)。与空白组比较,LPS 组 注:箭头所指为小鼠子宫内膜结构。
细胞中红/绿荧光强度比值显著降低(P<0.05);与 LPS 图2 各组小鼠子宫内膜结构及蜕膜化HE染色显微图
组比较,siSGK2 组细胞中红/绿荧光强度比值显著降低 3.3.3 CCF 对 RSA 小鼠 WNK 信号通路、蜕膜化相关蛋
(P<0.05);与siSGK2组比较,siSGK2+CCF组细胞中红/ 白和mRNA表达的影响
绿荧光强度比值显著升高(P<0.05)。限于篇幅,流式 Western blot法(表8)和qRT-PCR法(表9)检测结果
细胞图可通过本文首页二维码链接中“增强出版”板块 显示,与对照组比较,模型组小鼠子宫内膜组织中
查看附图3。 SGK2、WNK1、WNK4、OSR1、SPAK、PRL 和 IGFBP-1 蛋
3.3 CCF对RSA小鼠的影响 白和 mRNA 表达水平均显著降低(P<0.05);与模型组
3.3.1 CCF对RSA小鼠妊娠结局的影响 比较,CCF 低、高剂量组小鼠子宫内膜组织中上述蛋白
与对照组比较,模型组小鼠胚胎着床数、活胎数均 及 mRNA 的表达水平均显著升高,而 GSK 组小鼠子宫
显著减少,丢失胚胎数均显著增加(P<0.05);与模型组 内膜组织中上述蛋白和 mRNA 的表达水平均显著降低
比较,CCF 低、高剂量组小鼠胚胎着床数和活胎数均显 (P<0.05);与CCF高剂量组比较,联合给药组小鼠子宫
著增多,丢失胚胎数均显著减少(P<0.05),而GSK组以 内膜组织中上述蛋白和 mRNA 的表达水平均显著降低
上指标均进一步恶化(P<0.05);与CCF高剂量组比较, (P<0.05)。限于篇幅,蛋白表达电泳图可通过本文首
联合给药组小鼠胚胎着床数、活胎数均显著减少,丢失 页二维码链接中“增强出版”板块查看附图4。
胚胎数显著增加(P<0.05)。结果见表7。
表8 各组小鼠子宫内膜组织中 WNK 信号通路、蜕膜
表 7 各组小鼠胚胎着床数、活胎数及丢失胚胎数比较 化相关蛋白表达水平比较(x±s,n=4)
(x±s,n=4) SGK2/ WNK1/ WNK4/ PRL/ IGFBP-1/ OSR1/ SPAK/
组别
组别 胚胎着床数 活胎数 丢失胚胎数 β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin β-actin
对照组 14.00±0.82 12.25±0.96 1.75±0.50 对照组 1.09±0.08 1.07±0.07 1.05±0.09 1.04±0.07 1.01±0.10 1.04±0.09 1.02±0.08
模型组 6.00±0.82 a 5.25±0.50 a 4.00±0.82 a 模型组 0.34±0.06 0.44±0.05 0.56±0.05 0.32±0.05 0.48±0.05 0.37±0.06 0.41±0.05 a
a
a
a
a
a
a
b
CCF低剂量组 9.00±0.82 b 7.25±0.96 b 3.00±0.82 b CCF低剂量组 0.52±0.07 0.63±0.06 0.78±0.07 0.60±0.08 0.71±0.08 0.67±0.07 0.58±0.09 b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
CCF高剂量组 11.75±0.96 b 11.00±0.82 b 2.50±0.58 b CCF高剂量组 0.89±0.10 0.79±0.09 0.93±0.11 0.86±0.09 0.98±0.11 0.81±0.12 0.74±0.11 b
b
b
GSK组 5.00±0.82 b 4.00±0.82 b 4.25±0.50 b GSK组 0.19±0.04 0.32±0.06 0.37±0.04 0.17±0.03 0.29±0.04 0.23±0.04 0.27±0.03 b
b
b
b
b
b
b
c
c
c
联合给药组 6.50±1.29 c 5.25±0.96 c 3.50±0.58 c 联合给药组 0.30±0.05 0.49±0.07 0.58±0.06 0.36±0.05 0.45±0.06 0.42±0.05 0.44±0.07 c
c
c
c
a:与对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与CCF高 a:与对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与CCF高
剂量组比较,P<0.05。 剂量组比较,P<0.05。
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